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轉化

發布者:艾美捷科技    發布時間:2021-05-19     
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1.取 100ul感受態細胞于冰浴上融化。


2. 加入 1ul純質?;蜻B接產物,輕輕吹打混勻,冰浴 30 min。


3. 將菌液放入 42℃水浴中熱激 90 秒,立即放入冰浴中 2 min。


4. 加入 0.9ml SOC,于 37℃恒溫搖床上 200rpm×1hr 溫育。


5. 將菌液 4000rpm/min 離心 3min,留 200ul上清將菌體打散,均勻涂布于含適當


抗生素的瓊脂平板表面,平板于 37℃倒置培養過夜。


i.

注:新倒的平板可于 37℃培養箱中預先放置數小時至過夜干燥。


ii.

當轉化的是 TA 克隆連接產物時可在菌液中加入 8ul 1M IPTG 和 40ul20mg/ml X-gal 以進行藍白斑篩選。

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