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特色產品由于部分純化的組分中存在拓撲異構酶I,基于超螺旋DNA弛豫的使用粗提取物進行拓撲異肽酶II活性的測定可能會很復雜。污染核酸酶活性(由于Mg++)會降解或劃傷超螺旋底物,從而產生額外的并發癥。這些問題可以通過使用由昆蟲Crithidia fasiculata錐蟲動質體制備的鏈狀DNA底物來避免。KDNA是互鎖的DNA微環(大多為2.5kb)的集合,形成了高分子量的超大網絡。因此,這些網絡無法進入瓊脂糖凝膠。當與拓撲異構酶II一起孵育時,它會使DNA參與雙鏈斷裂和重組循環,從而有效地釋放(脫鏈)微環DNA。由于尺寸小,脫鏈的微環迅速進入凝膠。拓撲異構酶I不會發生這種反應。TopoGEN修改了Miller等人描述的原始凝膠系統,以允許使用kDNA對活性進行額外區分。
艾美捷TopoGEN-線性kDNA:
編號:TG2018-1
分類:DNA底物
標簽:kDNA標記,線性kDNA,線性kDNA標記
kDNA是II型酶的理想底物,無論是原核生物還是真核生物。它對于斷裂和重新連接DNA雙鏈的拓撲異構酶具有高度特異性;這定義了II型(雙鏈DNA)的作用機制。確保kDNA純凈、純化至已知濃度、無核酸酶且驗證可與top2酶一起工作至關重要。

線性kDNA質量控制測試:
對于連環kDNA底物,至少90%的DNA將保留在1%瓊脂糖凝膠的孔中。
每批kDNA的解鏈都經過純化的拓撲異構酶II測試。
該標記在常溫下運輸,應儲存在4°C。
TopoGEN-線性kDNA文獻參考:
Miller et al., J. Biol. Chem. 256:9334-9339 (1981)
Muller et al., Biochem. 27:8369-8379, 1988
Muller et al., Nuc. Acid. Res. 17:9499, 1989
艾美捷科技是TopoGEN的中國代理商,為科研工作者提供優質的產品與服務。

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