TopoGEN 人拓撲異構酶I酶--高純度、具有催化活性

高純度、催化活性的Top1酶在桿狀病毒系統中過表達，并純化至單帶均一性。這些制劑比由人體組織制成的天然拓撲異構酶I便宜，純度高，比活性高。

作為TopoGEN在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦TopoGEN熱銷產品人拓撲異構酶I酶。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

人拓撲異構酶I酶：

SKU：TG2005HRC

類別：拓撲異構酶

標簽：人拓撲異構酶1

高純度、具有催化活性的人拓撲異構酶I酶在桿狀病毒系統中過表達并純化至單一條帶均一性。這些制劑比從人體組織中提取的天然拓撲異構酶I便宜，并且提供出色的純度和高比活性。此外，重組拓撲異構酶I的100 kDa形式穩定，相對于人體細胞中的天然蛋白，更不易受到蛋白酶的降解。

拓撲異構酶I的最終制劑在松弛質粒DNA方面非?；钴S。

人拓撲異構酶I酶活性的滴定

使用桿狀病毒過表達系統制備和純化拓撲異構酶I。通過連續2倍稀釋使用超螺旋DNA來確定活性。數據顯示，這種制劑大約滴定到8單位/微升。一個人拓撲異構酶I單位可以在37°C下30分鐘內松弛超過50%的0.25微克（250納克）超螺旋質粒DNA。

包含材料

包含10X反應緩沖液和稀釋緩沖液。這些可以單獨購買，作為TGS 10X拓撲異構酶I反應緩沖液（TG4095）。

質量控制測試

1. 經認證，人拓撲異構酶I無核酸酶污染。

2. 與拓撲異構酶II的交叉污染檢查結果為陰性。在拓撲異構酶II反應條件下，沒有KDNA的解連環。

3. 拓撲異構酶I的最終分數是柱池，并且含有以下緩沖液：20mM NaH2PO4（pH7.4），300mM NaCl，50ug/ml BSA，50%甘油，50mM Imidazole。最終分數通過SDS-PAGE分析，顯示含有一個主要的100 kDa單一條帶。

4. 活性測定。在最終體積為25微升的top1反應緩沖液中進行松弛測定（10X反應緩沖液——也稱為TGS——隨本產品提供：100 mM Tris-Cl（pH 7.9），10 mM EDTA，1.5 M NaCl，1% BSA，1 mM Spermine，50%甘油）。每個反應包含0.25微克超螺旋質粒DNA。反應用5微升（每20微升反應體積）的停止緩沖液（5%十二烷基硫酸鈉，0.0025%溴酚藍，25%甘油）終止。反應產物在1%的原生瓊脂糖凝膠上分析（電泳過程中凝膠或緩沖液中不含乙酰胺）。

人拓撲異構酶I酶在干冰上運輸，應儲存在-20°C。在最佳儲存條件下，其壽命約為6個月。反復的凍融循環會加速活性損失。

文獻：

Yoshizaki A, Yanaba K, Ogawa A, Asano Y, Kadono T, Sato S: Immunization With DNA Topoisomerase I and Freund’s Complete Adjuvant Induces Skin and Lung Fibrosis and Autoimmunity via Interleukin-6 Signaling.  Arthritis and Rheumatism 2011, 63: 3575-3585.  doi: 10.1002/art.30539.

Zhang L, Sullivan P, Suyama J, et. al: Epidermal growth factor-induced heparanase nucleolar localization augments DNA topoisomerase I activity in brain metastatic breast cancer.  Molecular Cancer Research 2010, 8: 278-290. doi: 10.1158/1541-7786.MCR-09-0375

美國TopoGEN創立于1991年, 專業提供拓撲異構酶試劑和分析試劑盒，他們的藥物篩選試劑盒可用于鑒定拓撲異構酶靶向分子，用于癌癥化療和抗菌應用。TopoGEN還可提供檢測和定量原核（DNA回旋酶，拓撲異構酶IV）和真核拓撲異構酶（拓撲異構酶I，IIa，IIb，III）的檢測試劑盒，以及全系列的 DNA 底物和 DNA 切割靶標、拓撲異構酶抑制劑、拓撲異構酶抗體和試劑盒補充試劑，DNA修復的相關系列產品也是他們產品的特色產品。  

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