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特色產品Calbiotech-17-羥基孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒旨在定量測定血清中的17-OHP。僅供研究使用。不用于診斷程序。
艾美捷Calbiotech-17-羥基孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒(PG338S)檢測原理:
Calbiotech 17α-OH孕酮(17-OHP)是基于測試樣本中的17-OHP與17-OHP-HRP之間的競爭性結合原理,以獲得恒定量的兔抗17-OHP抗體。在試驗中,山羊抗兔IgG包被的孔與25?l 17-OHP標準品、50?l 17-OH HRP偶聯物和50?l兔抗17-OHP一起孵育。HRP標記的17-OHP在標準品和樣品中與17-OHP競爭特定抗17-OHP抗體的固定數量的結合位點。因此,隨著樣本中17-OHP濃度的增加,與孔免疫結合的17-OHP過氧化物酶偶聯物的量逐漸減少。然后通過洗滌步驟去除未結合的17-OHP。TMB基板被添加,導致藍色的發展。加入終止溶液停止顯色,在450nm處分光光度法測量吸光度。制備了一條標準曲線,將顏色強度與17-OHP的濃度相關聯

Calbiotech-17-羥基孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒測定程序:
1. 將所需數量的包被條放入支架中。
2. 向相應的孔中分發25微升17-OHP標準品、對照品和樣本。
3. 向所有孔中加入50微升工作稀釋N-17-OHP酶結合物。
4. 向所有孔中加入50微升N-17-OHP抗體試劑。
5. 輕輕搖動微孔板20-30秒以混合。
6. 在室溫下孵育60分鐘。
7. 迅速搖動以清除孔中的內容物。用1X洗滌緩沖液洗孔3次。在吸水紙上猛擊孔以去除殘留的水滴。
8. 向每個孔中加入100微升TMB底物。
9. 覆蓋微孔板,并在室溫下孵育15分鐘。
10. 向每個孔中加入50微升終止溶液,并輕輕混合,直到每個孔中獲得均勻的顏色。
11. 在加入終止溶液后的15分鐘內,讀取每個孔的吸光度,波長為450nm。
結果計算:
標準曲線的構建如下:
1. 計算每組標準品和患者樣本的平均吸光度值。
2. 為了構建標準曲線,將每個17-OHP標準品的平均吸光度(垂直軸)與其濃度(ng/ml,水平軸)作圖。
3. 通過已繪制的點繪制最佳擬合曲線。
4. 從曲線上讀取每個未知樣本的吸光度,以確定17-OHP的相應濃度。
艾美捷科技是Calbiotech的中國代理商,為科研工作者提供優質的產品與服務。

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