Calbiotech肺炎支原體IgG ELISA測定程序方案

肺炎支原體是一種病原體，其臨床表現范圍從無癥狀到明顯的肺炎。癥狀在暴露后6到32天開始，包括頭痛、不適、咳嗽、喉嚨痛和發燒。病程可能持續幾天到一個月甚至更長時間。通過ELISA檢測到M. pneumoniae IgM抗體或特異性IgG抗體的顯著增加，是適當臨床環境中近期感染的有力證據。通常在臨床發病后1周特異性IgM抗體顯著增加，第二周特異性IgG水平上升。然而，M. pneumoniae IgM在感染后可以持續存在超過兩年，因此，特異性IgM的檢測并不準確表示感染時間。初次感染和再感染可以通過初次感染中存在特異性IgA和特異性IgM的升高，以及再感染中存在特異性IgA而無特異性IgM的存在來區分。通常，如果在發病后10-20天收集的血清中缺少特異性IgM，則強烈表明不是由M. pneumoniae引起的原發性肺炎。

Calbiotech-肺炎支原體（肺炎支原體）IgG ELISA測試系統是一種酶聯免疫吸附試驗（ELISA），用于檢測人血清或血漿中肺炎支原體的IgG類抗體。

艾美捷Calbiotech肺炎支原體IgG ELISA（MP020G）檢測原理：

將稀釋的患者血清加入到涂有純化抗原的孔中。如果存在IgG特異性抗體，它會與抗原結合。所有未結合的物質都被洗去，然后加入酶結合物與存在的抗體-抗原復合物結合。過量的酶結合物被洗掉，然后加入底物。孵育板以允許酶水解底物。產生的色澤強度與樣本中IgG特異性抗體的數量成正比。

測定程序：

將所有樣本和試劑盒組分置于室溫（20-25°C）并輕輕混合。

1. 將所需數量的包被條放入支架中。

2. 陰性對照、陽性對照和校準品已準備好使用。通過向200微升樣品稀釋液中加入10微升樣本來準備測試樣品的1:21稀釋?；旌暇鶆?。

3. 向相應的孔中分發100微升稀釋血清、校準品和對照品。對于試劑空白，在1A孔位分發100微升樣品稀釋液。輕敲支架以去除液體中的空氣泡，并混合均勻。在室溫下孵育20分鐘。

4. 清除所有孔中的液體。用300微升1X洗滌緩沖液洗孔三次。用吸收紙或紙巾拍干。

5. 向每個孔中分發100微升酶結合物，并在室溫下孵育20分鐘。

6. 清除所有孔中的酶結合物。用300微升1X洗滌緩沖液洗孔三次。用吸收紙或紙巾拍干。

7. 向每個孔中分發100微升TMB底物，并在室溫下孵育10分鐘。

8. 加入100微升終止溶液。

9. 在15分鐘內使用ELISA讀數器讀取450納米處的光密度（O.D.）。建議使用參考濾光片600-650納米的雙波長。

肺炎支原體IgG ELISA文獻參考：

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