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特色產品該測定允許鑒定將在體外與微管(MTs)結合的蛋白質。該測定依賴于這樣一個事實,即MT在以100,000 x g 離心時會沉淀。因此,與MT相關的任何蛋白質都會在離心過程中沉淀。對上清液與沉淀級分進行簡單的SDS-PAGE分析將確定蛋白質是否能夠與MTs相關聯。本手冊中給出的測定描述適用于重組表達的“測試”蛋白,但是,該測定可以適用于細胞裂解物或體外翻譯產物。
應該注意的是,應獲得MT關聯的體內確認,以確認該蛋白質可以歸類為MAP。這種關聯不需要在整個細胞周期中發生,甚至可以在發育上受到調節,事實上,MAP與微管的短暫關聯是常態而不是例外。
艾美捷微管結合蛋白 Spin Down 檢測試劑盒 #BK029用途:
確定蛋白質或化合物是否與微管結合。
測試各種缺失突變體仍然結合微管的能力,然后計算它們對微管的親和力,從而鑒定微管結合位點。
在ATP(驅動蛋白)或GTP(動力蛋白)的不可水解類似物存在下,從細胞中提取這些或在突變時顯示其結合親和力。
微管結合蛋白 Spin Down 檢測試劑盒內容:
該試劑盒包含足夠的材料,可根據檢測量進行 30-100 次檢測。包括以下試劑:
微管蛋白, >99% 純度, (# T240)
微管相關蛋白級分(陽性對照)(# MAPF)
牛血清白蛋白(BSA)蛋白(陰性對照)
一般微管蛋白緩沖液(# BST01)
微管蛋白甘油緩沖液(# BST05)
GTP (# BST06)
微管重懸緩沖液
紫杉醇(# TXD01)
二甲基亞胺
鹽提取緩沖液
包含詳細協議和廣泛故障排除指南的手冊
微管結合蛋白 Spin Down 檢測試劑盒示例結果:
通過將MT與微管相關蛋白級分(Cat.#MAPF)或BSA相結合來測試微管結合旋下測定。正如預期的那樣,MAPF與微管共沉積,而BSA則不(圖1)

圖:使用 BK029 的 MAP 旋速測定。將微管與緩沖液(MT),MAP蛋白(MT + MAPF)或BSA(MT + BSA)混合,并通過100,000×g離心沉淀MTs.通過SDS-PAGE檢查上清液(S)和沉淀(P)級分。MAP蛋白,但不是BSA,與MT結合并共沉淀。MAP(MAPF)或BSA(BSA)蛋白單獨不能沉淀。
Cytoskeleton公司成立于1993年,專注于生物化學和細胞過程研究中的純化蛋白和便捷試劑盒開發與生產。公司提供藥物篩選、信號轉導、蛋白質轉錄后修飾(PTM)、細胞骨架研究相關的系列試劑盒和產品,尤其以細胞骨架相關研究見長,既能滿足于樣品較少的科學研究,也可以用于小規模篩選研究和高通量大規模篩選研究。此外,公司還提供微管蛋白,肌動蛋白,小G蛋白,GAPs,GEFs等現有產品的藥物篩選服務。

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