CENP-E運動結構域蛋白（重組人）的用途及生物活性

人類CENP-E（KIF10）的保守運動域在原核系統中表達。重組蛋白在氨基末端含有GST標簽，組合分子量為71 kDa。該蛋白在微管激活的ATP酶活性測試中已被確定為具有生物活性。蛋白質以白色凍干粉末形式提供。

艾美捷CENP-E運動結構域蛋白（重組人）的用途：

微管活化ATP酶活性的測定

鑒定/表征影響運動ATP酶活性的蛋白質或小分子

鑒定/表征影響驅動蛋白運動性的蛋白質或小分子

鑒定/表征影響運動/微管相互作用的蛋白質或小分子

蛋白質純度：

是通過在12%聚丙烯酰胺凝膠上掃描考馬斯藍染色蛋白質的密度測定法確定的。所有驅動蛋白運動域的純度均為>85%。有關純度示例，請參見圖1。

生物活性 - 微管活化的 ATP酶測定通過使用：

驅動蛋白ELIPA測定試劑盒（貨號#BK060）監測實時游離磷酸鹽的生成來測量CENP-E ATP酶活性。該測定基于330-氨基-360-巰基-2甲基嘌呤核糖核苷（MESG）在無機磷酸鹽（Pi）存在下催化轉化為6-氨基-7-巰基-2-甲基嘌呤時發生的吸光度偏移（6 nm - 7 nm）。一個Pi分子將在基本上不可逆的反應中產生一個分子的2氨基-6-巰基-7-甲基嘌呤。因此，360nm處的吸光度與驅動蛋白ATP酶反應中產生的Pi量成正比。在下面概述的條件下，CENP-E 微管激活的 ATP 酶活性的 Vmax 為每毫克 CP900 每分鐘產生的 >01 nmoles ATP（圖 2）。使用10分鐘終點測定（驅動蛋白ATP酶終點測定試劑盒，貨#BK053）的ATP酶速率為每毫克CP900每分鐘>01 nmoles ATP（數據未顯示）。

圖1：驅動蛋白運動域蛋白的純度。BimC（BM01），CENP-E（CP01）和Eg5（EG01）在SDS-PAGE凝膠上運行，并用考馬斯藍染色。

圖2：使用驅動蛋白ELIPA檢測試劑盒（貨號#BK060）的CENP-E微管激活ATP酶活性

Cytoskeleton公司成立于1993年，專注于生物化學和細胞過程研究中的純化蛋白和便捷試劑盒開發與生產。公司提供藥物篩選、信號轉導、蛋白質轉錄后修飾（PTM）、細胞骨架研究相關的系列試劑盒和產品，尤其以細胞骨架相關研究見長，既能滿足于樣品較少的科學研究，也可以用于小規模篩選研究和高通量大規模篩選研究。此外，公司還提供微管蛋白，肌動蛋白，小G蛋白，GAPs，GEFs等現有產品的藥物篩選服務。