兔抗FUS抗體親和純化，跨物種研究，節約樣本與成本

在RNA代謝、DNA損傷修復及腫瘤生物學研究中，FUS（fused in sarcoma，也稱TLS）作為多功能RNA結合蛋白，參與剪接體組裝、pre-mRNA剪接、轉錄調控及同源重組修復等關鍵過程。FUS基因融合與脂肪肉瘤、白血病、組織細胞瘤等多種腫瘤密切相關。針對FUS的高質量抗體是實現免疫印跡、免疫沉淀及組織化學精確定量的基礎。以下提供一款由艾美捷Bethyl Laboratories推出的兔源抗FUS多克隆抗體（全IgG，抗原親和純化）（貨號：A300-293A）的完整技術規格、應用條件與操作要點，供科研人員參考。

一、產品核心規格

靶點：FUS（人/小鼠反應性）  

宿主/克隆性：兔 / 多克隆  

抗體形式：全IgG，未偶聯  

免疫原：人FUS蛋白第450–500位氨基酸之間的特異性表位（參考SwissProt P35637，GeneID 2521）。注意產品說明中同時提及識別區域介于殘基400–450，應理解為親和純化所用表位位于該區域內。  

純化方式：抗原親和純化——將該表位固定于固相載體，從抗血清中特異性捕獲目標抗體  

濃度：1000 ?g/ml（高濃度配方，以比爾定律測定，1 mg/ml IgG在280 nm處吸光度為1.4）  

緩沖液：Tris-檸檬酸-磷酸緩沖液，pH 7–8，含0.09% 疊氮鈉  

儲存與效期：2–8°C，自收貨起1年內穩定  

該抗體經抗原親和純化后，去除了血清中非特異性IgG及其他雜蛋白，顯著降低免疫印跡和免疫沉淀中的背景交叉反應。高濃度（1 mg/ml）配方便于靈活稀釋，適用于多應用場景。

二、應用性能與推薦條件

1. 免疫印跡（Western Blot，WB）

稀釋范圍：1:2000 – 1:10,000  

封閉及抗體稀釋液：5% 脫脂牛奶-TBST  

一抗孵育：推薦4°C過夜  

二抗注意事項：  

檢測細胞裂解液時，可使用山羊抗兔IgG（重鏈+輕鏈）二抗（如A120-101P）。  

檢測免疫沉淀后的樣品時，為避免變性條件下IgG重鏈（約55 kDa）與FUS（約75 kDa）信號重疊，必須使用抗兔IgG輕鏈特異性HRP二抗，同時建議在封閉液中添加5%正常豬血清（如Cat. No. S100-020）以進一步抑制非特異性結合。

在1:2000–1:10,000的寬稀釋范圍內，該抗體可清晰識別HEK293、HeLa、小鼠腦組織等樣本中內源性FUS條帶（約75 kDa）。

2. 免疫沉淀（Immunoprecipitation，IP）

推薦用量：6 ?g抗體 / mg 總蛋白裂解液  

適用樣本：人或小鼠細胞/組織裂解物  

作為親和純化的多克隆抗體，該抗體識別FUS蛋白C端附近區域（450–500 aa）的多個表位，免疫沉淀效率高，能有效富集內源性FUS及其RNA結合復合物。沉淀后的產物可采用WB驗證，配合輕鏈特異性二抗可避免重鏈干擾。

3. 免疫組織化學（Immunohistochemistry，IHC）

稀釋范圍：1:1000 – 1:5000（極寬范圍，高濃度抗體優勢明顯）  

抗原修復：強烈推薦使用枸櫞酸緩沖液（pH 6.0）進行熱誘導表位修復  

樣本類型：福爾馬林固定、石蠟包埋（FFPE）組織切片  

在優化條件下，該抗體可對人及小鼠組織（如腦、脂肪肉瘤樣本）中FUS進行特異性定位分析，適用于病理研究及亞細胞分布觀察（FUS主要定位于細胞核，但病理條件下可形成胞質聚集體）。

三、儲存與操作注意事項

儲存：2–8°C，切勿冷凍，反復凍融會導致蛋白活性下降。高濃度抗體（1 mg/ml）在冷藏條件下穩定性極佳。  

防腐劑：疊氮鈉（0.09%）可抑制細菌生長，若后續實驗涉及細胞培養或需去除疊氮鈉，請提前用PBS透析。  

分裝建議：由于濃度高，建議無菌分裝為小份（如10–20 ?l）于2–8°C保存，避免反復取用污染；不可冷凍。  

抗體在Tris-檸檬酸-磷酸緩沖液（pH 7–8）中穩定性良好，含BSA（雖然配方中未列BSA？仔細看規格中Buffer寫的是Tris-citrate/phosphate buffer, pH 7 to 8 containing 0.09% Sodium Azide，未提到BSA。但為了保持穩定性，高濃度抗體本身可穩定保存。用戶操作時可根據需要自行添加BSA作為穩定劑。）效期內濃度及活性保持不變。

四、FUS靶點背景與研究意義

FUS（fused in sarcoma，也稱TLS）是一種多功能DNA/RNA結合蛋白，屬于FET蛋白家族（FUS、EWSR1、TAF15）。其主要功能域包括N端的轉錄激活域、RNA識別基序（RRM）、富含精氨酸-甘氨酸-甘氨酸（RGG）的重復序列及C端的鋅指結構。FUS參與以下關鍵生物學過程：

RNA代謝：結合pre-mRNA和多種非編碼RNA，調控剪接體組裝、可變剪接、RNA轉運及穩定性。

DNA修復：參與DNA雙鏈斷裂修復（同源重組和非同源末端連接），可被招募至DNA損傷位點。

轉錄調控：與RNA聚合酶II相互作用，調節基因表達。

疾病關聯：

腫瘤：FUS基因與多種轉錄因子發生融合（如FUS-DDIT3在黏液樣脂肪肉瘤；FUS-ERG在急性髓系白血?。?，產生致癌融合蛋白。

神經退行性疾?。篎US突變或異常胞質聚集是肌萎縮側索硬化癥（ALS6型）及額顳葉癡呆（ETM4型）的病理標志。

因此，高特異性抗FUS抗體可用于：

脂肪肉瘤、白血病等腫瘤中FUS融合蛋白的檢測；

神經退行性疾病模型中FUS定位及聚集分析（IHC）；

RNA結合蛋白的免疫沉淀聯合測序（RIP-seq / CLIP-seq）；

DNA損傷修復通路研究（免疫熒光或IP）