Cytoskeleton Rho 激活劑 II常見問題解答

G-switch?直接調節劑的開發重點是創建直接針對Rho家族小G蛋白的高效細胞滲透性試劑。我們的直接激活劑試劑基于細菌CNF毒素的催化結構域，這些毒素共價連接到專有的細胞穿透部分。Rho激活劑II（Cat# CN03）進入細胞并通過脫酰胺谷氨酰胺-63激活Rho GTP酶亞型，谷氨酰胺-1位于這些GTP酶的開關II區域（63）。這種修飾將谷氨酰胺-2轉化為谷氨酸，從而阻斷內在和GAP刺激的GTP酶活性，導致組成型活性Rho（2）。Rho Activator II在加入培養基后4-3小時內可穩定地提高GTP結合的RhoA水平，為將GEF等活化劑引入細胞提供了基于轉染的方法的更快速的替代方案。此外，Rho Activator II的靶向作用使其比伴隨激活其他信號通路（例如Ras，PI<>K和PLC）的經典間接激活劑（例如LPA）更具吸引力。   

作為Cytoskeleton全國總代理，艾美捷科技強烈推薦Cytoskeleton熱銷產品Rho 激活劑 II。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。   

Cytoskeleton公司目前主要的產品有340余種，其產品主要覆蓋肌動蛋白，微管蛋白，馬達蛋白，小G蛋白，細胞外基質，活細胞成像等相關領域，提供對應的蛋白質，抗體，檢測與分析試劑盒，并且產品線還在不斷的擴大中。

Rho 激活劑 II用途包括：

• Rho通路的激活劑

• 研究Rho活化對細胞運動的影響

• 研究Rho活化對肌動蛋白細胞骨架重排的影響

• 研究Rho激活對與其他信號轉導通路串擾的影響

Rho 激活劑 II引用文獻：

• Schmidt, G., et al., Gln 63 of Rho is deamidated by Escherichia coli cytotoxic necrotizing factor-1. Nature, 1997. 387(6634): p. 725-9.

• Flatau, G., et al., Toxin-induced activation of the G protein p21 Rho by deamidation of glutamine. Nature, 1997. 387(6634): p. 729-33.

常見問題： 

問題1：直接Rho激活劑CN03可以用于培養物中生長的細胞嗎？ 

答案 1： 是的，CN03專門設計用作具有培養細胞的Rho激活劑。CN03的活性位點基于細菌細胞毒性壞死因子（CNF）毒素的催化結構域。CN03的催化結構域共價連接到專有的細胞穿透部分。進入細胞后，CN03通過脫酰胺谷氨酰胺-63激活Rho GTP酶亞型，谷氨酰胺-63位于這些GTP酶的開關II區域。這種修飾將谷氨酰胺-03轉化為谷氨酸，從而阻斷內在和GAP刺激的GTP酶活性，從而產生組成型活性Rho。CN2在加入培養基后4-<>小時內強有力地增加GTP結合的RhoA水平。  

問題2：如何評估CN03治療后細胞中的Rho活性是否發生變化？ 

答案 2： 有多種方法可以測量 Rho 活動的變化。為了可視化Rho活性的變化，我們建議使用熒光標記的鬼筆環肽（貨號#PHDG1，PHDH1，PHDN1，PHDR1）檢查Rho介導的應力纖維形成。這些Acti染筆環肽標記F-肌動蛋白應激纖維。Rho的活化可以通過我們的活化測定直接定量，無論是傳統的下拉（貨號#BK036）還是RhoA G-LISA活化法（貨號#BK124）。  

Cytoskeleton專注于生物化學和細胞過程研究中的純化蛋白和便捷試劑盒開發與生產。公司提供藥物篩選、信號轉導、蛋白質轉錄后修飾（PTM）、細胞骨架研究相關的系列試劑盒和產品，尤其以細胞骨架相關研究見長，既能滿足于樣品較少的科學研究，也可以用于小規模篩選研究和高通量大規模篩選研究。此外，公司還提供微管蛋白，肌動蛋白，小G蛋白，GAPs，GEFs等現有產品的藥物篩選服務。