Synaptic Systems：用單克隆重組兔抗-Fos抗體226 008改進c-Fos實驗

原癌基因c-fos屬于即刻早期基因（IEGs），在大腦中快速且短暫地表達（Herrera和Robertson，1996）。它可以被各種刺激誘導，通常用作神經元激活的標記（Morgan等人，1987；Gaiddon等人，1996；Chowdhury等人，2000；Gallo等人，2018；Wakhloo等人，2020）。像許多其他IEGs一樣，c-Fos是一種轉錄因子。它與c-Jun形成異二聚體結合到AP-1結合位點，并增強許多其他涉及增殖、分化、凋亡或炎癥的基因的表達（Ye等人，2014）。

異二聚體bZIP轉錄因子c-Fos/c-Jun與DNA結合的圖示

您的c-Fos實驗的關鍵技術參數

動物處理：在規劃涉及動物的c-Fos實驗時，您應該意識到可能影響您研究的技術陷阱。例如，您應該考慮到c-Fos表達是時間依賴的，易受壓力影響，并且可以在幾分鐘后被檢測到（Herrera和Robertson，1996）。重要的是要考慮到許多因素，如動物處理本身（例如，針頭注射）或在黑暗期暴露于光線下（晝夜節律激活）可能會影響c-Fos表達（Asanuma和Ogawa，1994；Herrera和Robertson，1996）。因此，實驗必須精確規劃和進行，并設置適當的對照組，以避免假陽性結果。

IHC協議：您還應該關注的另一個點是您的免疫組織化學（IHC）協議。似乎c-Fos陽性細胞的總數是閾值依賴的。許多參數影響可檢測的c-Fos陽性細胞數量：組織儲存條件、切片方法（冷凍切片機或振動切片機）、染色參數（例如，孵化溫度）、信號增強試劑（Berghorn等人，1994；Werner等人，1996；Mayer和Bendayan，2001），以及最重要的是，一抗選擇。

c-Fos抗體：一抗在特異性、靈敏度和信噪比方面有所不同，這些特性影響您的實驗結果。因此，Synaptic Systems旨在提供高特異性和一致性的c-Fos抗體，以支持科學研究和實驗可重復性。由于單克隆抗體與多克隆抗體相比具有幾個優點，Synaptic Systems開發了一種新的單克隆重組兔抗c-Fos抗體。

Synaptic Systems單克隆重組c-Fos抗體的優勢：

抗體具有由兩個重鏈和兩個輕鏈組成的共同結構。重鏈和輕鏈都包含物種特異性的恒定區域和負責目標識別的可變序列（Davies和Metzger，1983）。

在來自定義的雜交瘤細胞系的單克隆抗體制劑中，所有單個抗體分子都是相同的，并且共享相同的抗原識別位點。相比之下，多克隆抗體，如兔c-Fos抗體226 003，由抗體分子的混合物組成，它們在目標識別序列上有所不同。一旦血清用完，就必須對新的動物進行免疫。獲得的新血清包含新的c-Fos抗體混合物，具有新的特異性和親和力特性，導致多克隆c-Fos抗體的批次間變異。

通過Synaptic Systems的單克隆重組兔c-Fos抗體226 008，Synaptic Systems永久性地解決了批次間變異的問題。Synaptic Systems對表現一貫良好的大鼠單克隆c-Fos抗體226 017的c-Fos目標識別域進行了測序，并將它們融合到兔IgG的恒定抗體區域。

這種高度定義的單克隆重組抗體可以在受控條件下在哺乳動物細胞中表達，作為一種無限資源，批次間變異最小。它在Synaptic Systems測試的標準應用中顯示出優越的性能，并且等同于甚至優于Synaptic Systems最好的兔多克隆c-Fos批次。雖然多克隆兔抗c-Fos抗體226 003非常容易受到實驗條件的變化影響（例如，IHC實驗中的孵化溫度會影響信號強度），但單克隆重組兔抗c-Fos抗體226 008在各種實驗設置中都能產生穩健的染色結果，因此是您實驗的最佳選擇。

隨著時間的推移，這種單克隆抗體將被用于許多不同的應用，收集到的所有信息將有助于更好地表征這種研究試劑。

與多克隆抗體相比，這些信息會累積并且永遠不會丟失，使這種研究試劑成為您手中越來越有價值和可靠的工具。

新的組織透明技術，如CLARITY和iDISCO，為生物過程和結構提供了全新的見解。與Synaptic Systems的單克隆重組兔抗c-Fos抗體226 008結合使用，它們使Synaptic Systems能夠在整個較大的區域內研究大腦中的途徑。已經展示了如何通過使用CLARITY的修改版本和Synaptic Systems的c-Fos抗體226 008來標記記憶細胞，評估同一小鼠中重疊的細胞群體（Refaeli等人，2024）。

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