BioAssay Systems 雙熒光素酶報告基因測定試劑盒-高靈敏度和寬檢測范圍

通過使用雙報告基因系統可以提高報告基因檢測的準確性。 

其中一個報告基因與感興趣的啟動子相關聯，用于評估特定實驗條件的影響，而第二個報告基因用作對照，提供基線反應。SuperLight?雙熒光素酶報告基因檢測法允許在單個樣品中順序測量兩種不同熒光素酶（螢火蟲熒光素酶[FFL]和海腎熒光素酶[RL]）的活性。首先通過加入FFL試劑來測量螢火蟲熒光素酶的發光。接下來，向同一孔中加入RL試劑。RL試劑同時猝滅螢火蟲熒光素酶的發光，并啟動海腎熒光素酶反應。兩種反應產生的光都可以方便地用發光儀進行測量。

作為BioAssay Systems在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產品雙熒光素酶報告基因測定試劑盒。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點 

- 高靈敏度和寬檢測范圍：能夠檢測低至2飛克（fg）的熒光素酶。  

- 與常規實驗室和高通量篩選（HTS）格式兼容：檢測可在試管或微孔板中進行，并可使用任何發光儀進行測量?？稍贖TS液體處理系統上輕松自動化。  

- 快速便捷：三步檢測法可在20分鐘內完成雙熒光素酶水平的檢測。

應用 

- 基因調控：基因表達水平、啟動子活性的特征、受體、轉錄因子和小分子對基因表達的調節。  

- 藥物發現：用于基因調節劑的高通量篩選。

試劑盒內容（96孔板100次檢測） 

- 裂解緩沖液：25毫升  

- FFL試劑：25毫克  

- 檢測緩沖液：25毫升  

- RL試劑：400毫克  

可根據要求提供定制的大量試劑。

儲存條件 

試劑盒在常溫下運輸。收到后將所有試劑儲存于-20°C。保質期：收到后12個月。  

注意事項：試劑僅供研究使用。使用試劑時應遵循實驗室試劑的常規注意事項。請參閱材料安全數據表以獲取詳細信息。

操作步驟 

- 試劑準備：建議在檢測緩沖液中新鮮配制FFL和RL試劑。計算每次檢測所需的每種試劑的用量（96孔板每孔100微升，384孔板每孔25微升），并稱取足夠的每種試劑（FFL試劑2毫克/毫升，RL試劑35毫克/毫升）。輕輕搖晃每種配制好的試劑，直至完全溶解（約10分鐘）。配制好的FFL試劑在-20°C下儲存時可穩定保存長達4周；然而，不建議長時間儲存配制好的RL試劑，理想情況下應在4小時內使用。

數據分析 

發光強度（RLU）與熒光素酶濃度成正比。對于每個單獨的樣品，實驗報告基因的RLU應通過對照報告基因的RLU進行標準化。  

上圖：熒光素酶滴定實驗，熒光素酶在細胞裂解液中稀釋，并在96孔板中進行檢測。  

左圖：在HEK293細胞中滴定螢火蟲熒光素酶質粒，以0.2微克的海腎熒光素酶質粒作為對照。在海腎熒光素酶檢測過程中，99.97%的螢火蟲熒光素酶發光被猝滅。

文獻參考：

1. Paguio A, et al. (2010). Improved dual-luciferase reporter assays for nuclear receptors. Curr Chem Genomics. 4: 43-9.

2. Rakauskaite R, et al. (2011). A rapid, inexpensive yeast-based dualfluorescence assay of programmed--1 ribosomal frameshifting for high-throughput screening. Nucleic Acids Res. 39(14): e97.

3. Jia S, et al. (2011). Relative quantification of protein-protein interactions using a dual luciferase reporter pull-down assay system.PLoS One. 6(10): e26414

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區的高新技術生物技術公司，專注于研發、生產和銷售高品質的生化檢測試劑盒，產品種類齊全，主要用于科學研究和生物醫藥開發，以滿足生命科學行業日益增長的需求。BioAssay Systems在現代藥物發現領域擁有超過50年的豐富經驗，已經開發了超過250種用于藥物發現和生命科學研究的檢測試劑盒。產品主要包括：1.血液尿液化學；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

作為BioAssay Systems在中國區域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產品。