BioAssay Systems 孔雀石綠磷酸鹽測定試劑盒-- 試劑非常穩定，不會沉淀

碧綠色孔雀石磷酸鹽檢測試劑盒是基于碧綠色孔雀石、鉬酸鹽和游離磷酸根之間形成的綠色復合物來進行定量的。該反應快速生成的顏色可以在分光光度計（600 - 660 nm）或酶標儀上方便地測量。這些非放射性比色試劑盒經過優化，提供了卓越的靈敏度和延長的保質期。該檢測方法簡單快捷，僅需一個添加步驟即可進行磷酸鹽測定。檢測可以在試管、比色皿或多孔板中進行。檢測可以在 96 孔和 384 孔板中方便地進行，適用于高通量篩選酶抑制劑。

作為BioAssay Systems在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產品孔雀石綠磷酸鹽測定試劑盒。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點：

- 試劑非常穩定：由于我們創新的配方，試劑不會沉淀。因此，在檢測前不需要過濾試劑，這通常是其他商業試劑盒所要求的。

- 高靈敏度和寬檢測范圍：能夠檢測到低至 1 皮摩爾的磷酸鹽，有效范圍在 0.02 uM 至 40 uM 磷酸鹽之間。

- 快速且方便：均相“混合即測”檢測法可在 20 分鐘內定量游離磷酸鹽。

- 兼容常規實驗室和高通量篩選（HTS）格式：檢測可以在試管、比色皿或微孔板中進行，使用分光光度計和酶標儀。

- 穩健且適合 HTS：在 96 孔和 384 孔板中觀察到的 Z' 因子為 0.7 至 0.9。可以在 HTS 液體處理系統上輕松自動化。

應用：

- 磷酸酶檢測：從肽、蛋白質或小分子底物中釋放磷酸鹽。

- 脂肪酶檢測：從磷脂中釋放磷酸鹽。

- 核苷三磷酸酶檢測：從核苷三磷酸（ATP、GTP、TTP、CTP 等）中釋放磷酸鹽。

- 定量磷脂、蛋白質和 DNA 等中的磷酸鹽。

- 藥物發現：高通量篩選磷酸酶抑制劑。

試劑盒內容：96 孔板進行 2,500 次檢測

- 試劑 A：50 mL

- 試劑 B：1 mL

- 標準品：1 mL（1 mM 磷酸鹽）

儲存條件： 該試劑盒在常溫下運輸。當在 4°C 下儲存時，試劑和標準品穩定期為一年。

注意事項： 試劑僅供研究使用。使用試劑時應遵循實驗室試劑的常規預防措施。詳細信息請參閱材料安全數據表。

使用 96 孔板的操作流程：

- 試劑準備：每次檢測需要 20 uL 工作試劑。通過將 100 體積的試劑 A 和 1 體積的試劑 B 混合來準備足夠量的工作試劑（例如，5 mL 試劑 A 和 50 uL 試劑 B）。工作試劑在室溫下至少穩定一天。

- 重要提示：在使用前，試劑必須恢復至室溫。在每次檢測前，重要的是要檢查所有酶制劑和檢測緩沖液中不含游離磷酸鹽。可以通過將 20 uL 工作試劑加入 80 uL 樣本溶液中來方便地進行此操作。在 620 nm 處的空白 OD 值應低于 0.2。如果 OD 讀數高于 0.2，則檢查水中的磷酸鹽水平。雙蒸餾水的 OD 讀數通常低于 0.1。實驗室洗滌劑可能含有高水平的磷酸鹽。確保實驗室器具在徹底清洗后沒有磷酸鹽污染。

1. 磷酸鹽標準品的準備：通過將 40 uL 1 mM 磷酸鹽標準品移入 960 uL 蒸餾水或酶反應緩沖液中，制備含有 40 uM 磷酸鹽的預混溶液。對試管進行編號。按照下表所示稀釋標準品。將 80 uL 標準品雙份移入透明底部 96 孔板的孔中。添加僅含水或反應緩沖液的空白對照。

2. 將 80 uL 待測樣品移入板的單獨孔中。

- 注意：對于酶反應，可以通過添加特定抑制劑來終止反應，或者可以直接通過添加工作試劑來停止反應。在檢測前可能需要稀釋反應混合物（見一般注意事項）。對于 ATP 酶或 GTP 酶檢測，ATP 或 GTP 的濃度應低于 0.25 mM。如果反應混合物中 ATP 或 GTP 的濃度 > 0.25 mM，則需要用蒸餾水稀釋樣品。例如，如果 ATP 酶反應中 ATP 的濃度為 1 mM，在反應結束后，需將反應混合物用水稀釋 4 倍后再進行檢測。

3. 向每個孔中加入 20 uL 工作試劑。輕輕敲擊板子使其混合均勻。

4. 在室溫下孵育 30 分鐘以顯色。

5. 在酶標儀上測量 600 nm - 660 nm（620 nm）處的吸光度。

- 對于 384 孔板的檢測，操作步驟相同，只是標準品和樣品溶液的體積應為 40 uL，工作試劑的體積應為 10 uL。

示例：

圖表：96 孔板中的磷酸鹽標準曲線。孵育 30 分鐘后，讀取 620 nm 處的吸光度。數據以平均值 ± 標準差（n = 2）表示。有效檢測范圍為 0.02 - 40 uM 磷酸鹽。

文獻：

1. Lee, JS et al (2020). Host surface ectonucleotidase-CD73 and the opportunistic pathogen, Porphyromonas gingivalis, cross-modulation underlies a new homeostatic mechanism for chronic bacterial survival in human epithelial cells. Virulence, 11(1), 414-429.

2. Dangi, P et al (2019). Natural product inspired novel indole based chiral scaffold kills human malaria parasites via ionic imbalance mediated cell death. Scientific Reports, 9(1), 17785.

3. Wang, X et al (2020). The antitumor agent ansamitocin p-3 binds to cell division protein ftsz in actinosynnema pretiosum. Biomolecules, 10(5). 

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區的高新技術生物技術公司，專注于研發、生產和銷售高品質的生化檢測試劑盒，產品種類齊全，主要用于科學研究和生物醫藥開發，以滿足生命科學行業日益增長的需求。BioAssay Systems在現代藥物發現領域擁有超過50年的豐富經驗，已經開發了超過250種用于藥物發現和生命科學研究的檢測試劑盒。產品主要包括：1.血液尿液化學；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

作為BioAssay Systems在中國區域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產品。