QA-Bio/艾美捷神經氨酸酶Au：精準切割唾液酸殘基，助力生物醫藥研究

α-(2-3,6,8,9) 神經氨酸酶Au能夠從復雜碳水化合物和糖蛋白中切割所有非還原末端的唾液酸殘基。不同連接方式的相對切割速率為：α(2-6) > α(2-3) > α(2-8), α(2-9)。

此外，該酶還能切割分支唾液酸（連接到內部殘基）。這一特性使其在神經氨酸酶中獨一無二。切割分支殘基可能需要較高濃度的酶和較長的孵育時間。若僅切割非還原末端的α(2-3)非分支唾液酸殘基，請使用唾液酸酶SP，編號E-S007。

α-(2-3,6,8,9) 神經氨酸酶是從產尿素棒狀桿菌的一個克隆中分離出來的。該酶已使用寡糖標準品進行了廣泛的表征。

艾美捷QA-Bio-神經氨酸酶Au：

來源 來自大腸桿菌中產尿素棒狀桿菌的重組。

EC 3.2.1.18

內容 20 mM Tris-HCl, 25 mM NaCl, pH 7.5 中的神經氨酸酶

隨附20 uL 和 60 uL 包裝大小：

5倍反應緩沖液 250 mM 磷酸鈉，pH 6.0

比活性 >135 U/mg

活性 >5 U/ml

分子量 70,000 道爾頓

pH 范圍 4.5-7，Z佳 pH 6.0

推薦的緩沖液濃縮物為標準底物提供酶活性的最佳pH。如果由于糖蛋白的溶解度或活性要求而在非Z佳pH下進行糖苷酶處理，預計酶活性會有所降低。

建議用法：

向管中添加最多100 μg的糖蛋白或1 nmol的寡糖。

加水至14 μL。

添加4 μL 5X 反應緩沖液。

添加2 μL α-(2-3, 6,8,9) 神經氨酸酶。

在37°C下孵育1小時。

如果天然和去唾液酸化的蛋白質之間的大小差異足夠大以便于檢測，可以通過SDS-PAGE監測去唾液酸化。

注意：如果存在分支唾液酸，則需要更長的孵育時間。

特異性 切割所有非還原末端的分支和非分支唾液酸

比活性 定義為在37℃，pH 5.0條件下，每分鐘產生1 u mole的甲基傘形酮所需的酶量，從MU-NANA [2′-(4-甲基傘形基)-α-D-N-乙酰神經氨酸]。

儲存 將酶存放在4℃。

純度 每批α-(2-3,6,8,9) 神經氨酸酶都經過以下測試以檢測污染的蛋白酶；10 μg的變性牛血清白蛋白與2 μL的酶孵育24小時。經處理的BSA的SDS-PAGE分析顯示沒有降解跡象。

生產宿主菌株經過廣泛測試，不產生任何可檢測的糖苷酶。

穩定性 妥善儲存至少12個月穩定。幾天暴露在常溫下不會降低活性。酶在37℃下至少保持一周活性。

QA-Bio-神經氨酸酶Au文獻參考：

Corfield, A. P., H. Higa, J. C. Paulson and R. Schauer. The specificity of viral and bacterial sialidases for alpha(2-3) and alpha(2-6)-linked sialic acids in glycoproteins. Biochim Biophys Acta 744: 121-12 6 (1983).

Dwek, R. A., C. J. Edge, D. J. Harvey, M. R. Wormald and R. B. Parekh. Analysis of glycoprotein-associated oligosaccharides. Ann Rev Biochem 62: 65-100 (1993).

Kobata, A. Use of endo- and exoglycosidases for structural studies of glycoconjugates. Anal Biochem 100: 1-14 (1979).

Ohta, Y., Y. Tsukada and T. Sugimori. Purification and properties of neuraminidase isoenzymes in Arthrobacter ureafaciens mutant. J Biochem (Tokyo) 106: 1086- 1089 (1989).

Prime, S., J. Dearnley , A. M. Venton, R. B. Parekh and C. J. Edge. Oligosaccharide sequencing based on exo- and endoglycosidase digestion and liquid chromatographic analysis of the products. J Chromatogr A 720: 263-274 (1996).

Uchida, Y., Y. Tsukada and T. Sugimori. Enzymatic properties of neuraminidases from Arthrobacter ureafaciens. J Biochem (Tokyo) 86: 573-58 5 (1979).

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