Cell Biolabs 谷氨酰胺檢測試劑盒(熒光法)--靈敏的定量熒光法檢測谷氨酰胺的試劑盒

谷氨酰胺是一種條件性必需氨基酸（在應激條件下需要從飲食中攝?。?，在蛋白質生物合成中發揮重要作用。谷氨酰胺的側鏈與谷氨酸幾乎完全相同，唯一的區別是側鏈上的羧基被酰胺基團取代。谷氨酰胺是人體血液中最豐富的游離氨基酸。許多食物富含谷氨酰胺，包括富含蛋白質的食物，如乳制品、雞蛋、魚類、雞肉、牛肉，以及蔬菜，如豆類、甜菜、卷心菜、菠菜和胡蘿卜。除了參與蛋白質合成和功能外，谷氨酰胺還在腎臟中通過產生銨離子調節酸堿平衡，作為僅次于葡萄糖的細胞能量來源，以及在許多合成過程中（如嘌呤合成）提供氮源。癌細胞依賴谷氨酰胺作為氮源和碳源。谷氨酰胺在某些腫瘤中的重要性已被證實。例如，阻斷谷氨酰胺代謝已被證明可以抑制乳腺癌、肝癌、腎癌和T細胞急性淋巴細胞白血病等多種腫瘤的生長。

Cell BioLabs的谷氨酰胺檢測試劑盒是一種簡單的檢測方法，無需預處理即可測量生物樣本中的谷氨酰胺水平。該試劑盒的檢測靈敏度下限為1.56 ?M谷氨酰胺。每個試劑盒提供足夠的試劑進行多達200次檢測（包括標準曲線和未知樣本）。

注意：每個樣本重復需要2次檢測，一次用谷氨酰胺酶處理（+G），一次不處理（-G）。谷氨酰胺的計算基于兩個孔的相對熒光單位（RFU）讀數差異。

作為Cell Biolabs全國總代理，艾美捷科技強烈推薦Cell Biolabs熱銷產品谷氨酰胺檢測試劑盒(熒光法)。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

谷氨酰胺檢測試劑盒(熒光法)檢測原理：

谷氨酰胺檢測試劑盒是一種靈敏的定量熒光法檢測谷氨酰胺的試劑盒。谷氨酰胺酶將谷氨酰胺和水（H?O）轉化為谷氨酸和氨（NH?）。谷氨酸氧化酶將谷氨酸轉化為α-酮戊二酸、氨（NH?）以及過氧化氫（H?O?）。反應中還加入了L-丙氨酸和谷氨酸丙酮酸轉氨酶，以再生谷氨酸和H?O?。因此，反應可以多次循環，從而顯著放大H?O?的生成。在辣根過氧化物酶（HRP）存在的情況下，熒光探針與H?O?以1:1的化學計量比反應，生成高熒光的熒光素。熒光素產物可以通過熒光微孔板讀數器在530-560 nm激發波長和590 nm發射波長下輕松讀取。熒光值與樣本中的谷氨酰胺水平成正比。未知樣本中的谷氨酰胺含量通過與標準曲線比較來確定。

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試劑盒組成（藍色冰袋運輸）  

1. 谷氨酰胺酶（部件號51651D）：1瓶1 mL，濃度為2.5 U/mL。  

2. 陰性對照緩沖液（部件號51652B）：1瓶1 mL。  

3. 谷氨酸氧化酶（部件號267402）：1瓶160 ?L，濃度為5 U/mL。  

   注：1個單位定義為在pH 7.4、30°C條件下，每分鐘從L-谷氨酸生成1.0微摩爾α-酮戊二酸的酶量。  

4. 谷氨酸丙酮酸轉氨酶（部件號267403）：1瓶50 ?L，濃度為100 U/mL。  

   注：1個單位定義為在pH 7.5、25°C條件下，每分鐘催化1.0微摩爾L-丙氨酸轉氨的酶量。  

5. L-丙氨酸（部件號267404）：1瓶10 ?L，濃度為200 mM。  

6. L-谷氨酰胺標準品（部件號51653B）：1瓶100 ?L，濃度為10 mM。  

7. 熒光探針（部件號268101）：1瓶250 ?L，10 mM DMSO溶液，棕色瓶。  

8. 辣根過氧化物酶（HRP）（部件號234402）：1瓶100 ?L。  

9. 5倍檢測緩沖液（部件號51654A）：1瓶50 mL，1 M醋酸鈉緩沖液，pH 4.9。  

10. 5倍反應緩沖液（部件號51655A）：1瓶50 mL，1 M Tris緩沖液，pH 8.0。  

未提供材料  

1. 標準96孔黑色熒光微孔板和/或黑色細胞培養微孔板  

儲存條件  

收到試劑盒后，將5倍檢測緩沖液和5倍反應緩沖液在室溫下保存。將谷氨酰胺酶、谷氨酸氧化酶和谷氨酸丙酮酸轉氨酶分裝后儲存在-80℃。將其他所有組分分裝后儲存在-20℃。避免多次凍融循環。熒光探針對光敏感，必須妥善保存。

結果示例  

下圖顯示了典型的谷氨酰胺測定結果。應使用以下數據僅供參考。這些數據不應用于解釋實際結果。

文獻參考：

1. Brosnan JT (2003). J. Nutrition. 133: 2068S–2072S.

2. Votyakova TV, and Reynolds IJ (2001) Neurochem. 79:266-277.

3. Lacey JM and Wilmore DW (1990). Nutrition Rev. 48: 297–309.

4. Corbet C and Feron O (2015). Current Opinion in Clinical Nutrition and Metabolic Care. 18: 346–353

5. Aledo JC (2004) BioEssays. 26 (7): 778–785.

6. Welbourne TC (1979). Canadian J. Biochem. 57: 233–237.

7. Abu Aboud O, Habib SL, Trott J, Stewart B, Liang S, Chaudhari AJ, Sutcliffe J, and Weiss RH(2017). Cancer Res. 77: 6746–6758.

Cell Biolabs公司位于美國加利福尼亞州南部重要的工業城市圣迭戈（San Diego），是有名的細胞學試劑品牌，作為前沿的細胞學分析檢測試劑盒生產商，為生物技術和研究類客戶提供好的基于細胞功能研究以及疾病等方面的高端產品和技術服務。產品主要涵蓋細胞研究、細胞信號通路和蛋白質生物學、代謝研究、病原體和毒素、干細胞研究等領域。全球眾多大學、政府研究機構、生物、制藥企業的科研實驗室均在使用Cell Biolabs的產品。