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Cell Biolabs ADP檢測試劑盒的檢測原理及儲存說明

發布者:艾美捷科技    發布時間:2025-02-24     
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腺苷二磷酸(ADP)是一種在多種細胞過程中發揮能量傳遞作用的有機分子,例如引發神經沖動、肌肉收縮和化學物質合成的酶促反應。ADP存在于所有生物體中,由三個部分組成:含氮堿基(腺嘌呤)、糖(核糖)和焦磷酸基團。在產生ATP的一系列酶促反應(如糖酵解或氧化磷酸化)中,ADP會被消耗。在植物中,陽光通過光合作用將ADP轉化為ATP。代謝消耗后,ATP會被轉化為腺苷二磷酸(ADP)或腺苷單磷酸(AMP)。


Cell BioLabs的ADP檢測試劑盒是一種簡單的熒光法檢測方法,可在96孔微孔板格式中測量生物樣本中總ADP的含量。每個試劑盒提供足夠的試劑進行多達100次檢測(包括空白、ADP標準品和未知樣本)。通過與已知濃度的ADP標準品進行比較,確定樣本中的ADP濃度。該試劑盒的檢測靈敏度下限為3.1 ?M ADP。


注意:每個樣本重復需要2次檢測,一次用丙酮酸激酶處理(+PK),一次不處理(-PK)。ADP的計算基于兩個孔的相對熒光單位(RFU)讀數差異。


作為Cell Biolabs全國總代理,艾美捷科技強烈推薦Cell Biolabs熱銷產品ADP檢測試劑盒。產品僅用于科研,不可用于臨床診斷。

產品名稱貨號詳情
ADP檢測試劑盒MET-5164查看


ADP檢測試劑盒檢測原理:

Cell BioLabs的ADP檢測試劑盒用于測量生物樣本中的總ADP。ADP和磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)在丙酮酸激酶的作用下被轉化為ATP和丙酮酸。隨后,丙酮酸在丙酮酸氧化酶的作用下,在磷酸和氧氣存在的情況下被氧化為乙酰磷酸、二氧化碳和過氧化氫。生成的過氧化氫通過高特異性的熒光探針進行檢測。辣根過氧化物酶催化探針與過氧化氫之間的反應,二者以1:1的比例結合。樣本和標準品在96孔微孔板格式中進行比較,孵育30分鐘后,使用標準96孔熒光板讀數器讀取結果。


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試劑盒組成  

盒子1(藍色冰袋運輸)  

1. ADP標準品(部件號51641C):1管50 ?L,濃度為20 mM。  

2. 氯化鎂(MgCl?)(部件號51623A):1管200 ?L,濃度為1 M。  

3. 磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)(部件號51585C):1管50 ?L,濃度為100 mM。  

4. 丙酮酸激酶(部件號51625D):1管200 ?L。  

5. 丙酮酸氧化酶(部件號50295C):1管300 ?L。  

6. 熒光探針(部件號50231C):1管50 ?L,溶于DMSO。  

7. 辣根過氧化物酶(HRP)(部件號234402-T):1管10 ?L,濃度為100 U/mL,溶于甘油。  

8. 黃素腺嘌呤二核苷酸(FAD)(部件號50293C):1管50 ?L,濃度為2 mM。  

9. 硫胺素焦磷酸(TPP)(部件號50294C):1管50 ?L,濃度為2 mM。  


盒子2(藍色冰袋運輸)  

1. 中和緩沖液(部件號51634A):1瓶25 mL。  

2. 10倍檢測緩沖液(部件號51622A):1瓶25 mL。


未提供材料  

1. 蒸餾水或去離子水  

2. 10 kDa分子量截留(MWCO)離心過濾器(例如Amicon Ultra 0.5 mL)  

3. 標準96孔黑色熒光微孔板和/或黑色細胞培養微孔板  

4. 高濃度高氯酸


儲存條件  

收到試劑盒后,將10倍檢測緩沖液和中和緩沖液在室溫下保存。將丙酮酸激酶和丙酮酸氧化酶儲存在-80℃。將其他所有組分儲存在-20℃。熒光探針對光敏感,必須妥善保存。避免多次凍融循環。


結果示例  

以下圖表展示了ADP檢測試劑盒的典型結果。以下數據僅供參考,不應用于解釋或計算實際樣本結果。

MET-5164.png

文獻參考:

1. Knowles J R (1980) Annu. Rev. Biochem. 49: 877–919.

2. Votyakova TV, and Reynolds IJ (2001) Neurochem. 79:266.

3. T?rnroth-Horsefield S and Neutze R. (2008). Proc Natl Acad Sci USA. 105:19565–19566.

4. Nichols CG, Shyng SL, Nestorowicz A, Glaser B, Clement JP, Gonzalez G, Aguilar-Bryan L,Permutt MA, and Bryan J. (1996) Science. 272:1785-1787.

5. Murugappa S, and Kunapuli SP (2006). Front. Biosci. 11: 1977–1986.


Cell Biolabs公司位于美國加利福尼亞州南部重要的工業城市圣迭戈(San Diego),是有名的細胞學試劑品牌,作為前沿的細胞學分析檢測試劑盒生產商,為生物技術和研究類客戶提供好的基于細胞功能研究以及疾病等方面的高端產品和技術服務。產品主要涵蓋細胞研究、細胞信號通路和蛋白質生物學、代謝研究、病原體和毒素、干細胞研究等領域。全球眾多大學、政府研究機構、生物、制藥企業的科研實驗室均在使用Cell Biolabs的產品。  

    

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