QA-Bio-Orela O-連接甘氨酸釋放試劑盒，比水合肼法更快、成本更低

QA-Bio-Orela O-連接甘氨酸釋放試劑盒包括進行多達12個糖蛋白樣品的O-連接去糖基化的試劑和材料，這些樣品可以并行分析，或者分為兩組，每組6個樣品，通常每個樣品的糖蛋白量高達1毫克。這種O-糖鏈釋放方法顯著減少了剝離現象，并減少了釋放前的樣品處理步驟。

專為QC實驗室設計的簡單O-連接去糖基化。

直接且簡單的方法。

釋放的糖鏈具有自由還原末端，適合在HPLC和MS分析前進行熒光標記。

熒光標記允許通過HPLC對糖鏈物種進行相對定量。

比水合肼法（LL-HYDRAZ-A2）更快、成本更低。

不需要特殊的處理技巧。

Orela反應：

Orela試劑在糖鏈與肽主鏈之間的連接處反應，將糖鏈作為糖基胺釋放。酸不穩定的糖基胺衍生物被水解，產生自由的糖鏈。

艾美捷QA-Bio-QA-Bio-Orela O-連接甘氨酸釋放試劑盒（LL-ORELA-A2）內容：

Part # Item Quantity

LL-ORELAREAGENT-0 Orela Release Reagent 2 x 3ml

LL-ACETIC-50P-01 Acetic Acid Solution 2 x 3ml

LC-CEX-H-01 LudgerClean CEX-H cartridges 2 x 6 cartridges

LL-COLLV-01 Collection vials with PTFE lined caps 2 x 6 vials

LL-REACT-01 Reaction vials with PTFE lined caps 2 x 6 vials

QA-Bio-QA-Bio-Orela O-連接甘氨酸釋放試劑盒：

準備糖綴合物：通過去除可能干擾標記程序的污染物，如鹽分、洗滌劑和染料，準備糖蛋白或糖肽樣品。

干燥糖鏈：將樣品置于反應瓶中并干燥。

向糖綴合物中添加釋放試劑：向每個樣品中添加Orela釋放試劑。

孵育：孵育樣品以允許釋放反應進行。

酸化：添加醋酸溶液并在4°C下孵育，以將糖基胺轉化為非還原糖鏈

釋放后清潔：使用陽離子交換柱去除肽或蛋白質

儲存或分析釋放的糖鏈：現在釋放的糖鏈已準備好進行分析。

QA-Bio-QA-Bio-Orela O-連接甘氨酸釋放試劑盒文獻參考：

Kozak RP, Royle L, Gardner RA, Bondt A, Fernandes DL, Wuhrer M Improved nonreductive O-glycan release by hydrazinolysis with ethylenediaminetetraacetic acid addition. Anal Biochem. May 15;453:29-37 (2014).

Kozak RP, Royle L, Gardner RA, Fernandes DL, Wuhrer M. Suppression of peeling during the release of O-glycans by hydrazinolysis. Anal Biochem. 2012 Apr 1;423(1):119-28.

Sojar, H. T. and O.P. Bahl. A chemical method for the deglycosylation of proteins. Arch Biochem Biophys 259:52-57 (1987).

Turyan I, Hronowski X, Sosic Z, Lyubarskaya Y. Comparison of two approaches for quantitative O-linked glycan analysis used in characterization of recombinant proteins. Anal Biochem. Feb 1;446:28-36 (2014)..

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