BioAssay Systems EnzyChrom 己糖激酶測定試劑盒，每天可處理數千個樣本

己糖激酶（E.C. 2.7.1.1）是一種存在于線粒體和細胞質中的酶，是糖酵解途徑中的第一個關鍵步驟。己糖（主要為葡萄糖）通過ATP磷酸化生成葡萄糖-6-磷酸。己糖激酶與多種人類疾病有關，包括癌癥和糖尿病。BioAssay Systems的非放射性、比色法己糖激酶檢測方法基于NADPH偶聯的酶促反應，通過還原四氮雜唑鹽MTT生成一種在565 nm處有最大吸收峰的有色產物。在565 nm處吸光度的增加與酶活性成正比。

作為BioAssay Systems在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產品EnzyChrom 己糖激酶測定試劑盒。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點

快速且靈敏：線性檢測范圍（20 uL樣本）：15分鐘反應時，檢測范圍為0.22至100 U/L。

便捷：均質“混合-孵育-測量”型檢測。

高通量：可在高通量篩選液體處理系統上自動化操作，每天可處理數千個樣本。

應用

己糖激酶活性測定：可用于生物樣本（如微生物、血漿、血清、培養細胞、組織和培養基）中的己糖激酶活性測定。

試劑盒內容（96孔板，100次檢測）

檢測緩沖液：10 mL

酶A：120 uL

NADP/MTT：1 mL

酶B：120 uL

底物混合液：1 mL

校準液：1 mL

儲存條件

試劑盒在運輸過程中使用冰袋包裝。收到后，請將所有組分儲存于-20°C。保質期：收到后6個月。

注意事項

試劑僅供研究使用。使用這些試劑時，請遵循實驗室試劑的常規注意事項。請參閱材料安全數據表以獲取詳細信息。

操作步驟

檢測原理：本檢測基于動力學反應。為確保孵育時間一致，向樣本中加入工作試劑時應迅速，混合應簡短但充分。建議使用多通道移液器。檢測可在任何期望的溫度下進行（例如25°C或37°C）。

樣本準備：

血清和血漿：可直接進行檢測。

組織：解剖前，用磷酸鹽緩沖液（pH 7.4）沖洗組織以去除血液。將組織（50 mg）在約200 uL含有50 mM磷酸鉀（pH 7.5）的緩沖液中均質化。在4°C下以10,000 × g離心15分鐘。取上清液進行檢測。

細胞裂解液：通過在4°C下以2,000 × g離心5分鐘收集細胞。對于貼壁細胞，不要使用蛋白酶來收獲細胞，而是使用橡膠刮刀或細胞刮板。在含有50 mM磷酸鉀（pH 7.5）的冷緩沖液中適當體積內均質化或超聲處理細胞。在4°C下以10,000 × g離心15分鐘。取上清液進行檢測。

所有樣本：可在-20至-80°C下儲存至少一個月。

試劑準備：將試劑平衡至期望的反應溫度（例如25°C或37°C）。使用前短暫離心試管。通過混合以下成分制備足量的工作試劑（WR），用于所有檢測孔：對于每個96孔檢測，需8 uL底物混合液、8 uL NADP/MTT溶液、1 uL酶A、1 uL酶B和70 uL檢測緩沖液。

文獻參考：

1. De Jesus, A et al (2022) Hexokinase 1 cellular localization regulates the metabolic fate of glucose. Mol. Cell. 82:1261-1277.

2. Patra, KC et al (2013) Hexokinase 2 is required for tumor initiation and maintenance and its systemic deletion is therapeutic in mouse models of cancer. Cancer Cell. 24: 213-228.

3. Wasserman, DH (2022) Insulin, Muscle Glucose Uptake, and Hexokinase:Revisiting the Road Not Taken. Physiology (Bethesda). 37: 115-127. 

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區的高新技術生物技術公司，專注于研發、生產和銷售高品質的生化檢測試劑盒，產品種類齊全，主要用于科學研究和生物醫藥開發，以滿足生命科學行業日益增長的需求。BioAssay Systems在現代藥物發現領域擁有超過50年的豐富經驗，已經開發了超過250種用于藥物發現和生命科學研究的檢測試劑盒。產品主要包括：1.血液尿液化學；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

作為BioAssay Systems在中國區域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產品。