人IgG-Fc ELISA試劑盒，血清、血漿、尿液等一鍵適配

在免疫學研究和臨床樣本分析中，人免疫球蛋白G（IgG）是最主要的抗體類型，約占血清總抗體的75%。IgG不僅參與中和毒素、激活補體、調理吞噬和抗體依賴細胞介導的細胞毒性（ADCC）等關鍵免疫功能，其Fc段更是介導多種效應器功能的核心結構域。因此，特異性檢測人IgG-Fc片段（而不受Fab片段干擾）對于疫苗免疫評價、自身抗體研究、血腦屏障通透性分析以及乳品中抗體含量測定等場景至關重要。

本文所介紹的Human IgG-Fc Sandwich ELISA 試劑盒（貨號：E88-104）由艾美捷Bethyl Laboratories推出，該試劑盒提供了一種高靈敏度、寬檢測范圍且操作簡便的定量方案，適用于血清、血漿、腦脊液（CSF）、乳汁及尿液等多種生物基質。以下從技術規格、檢測原理、樣本處理、操作流程及注意事項等方面進行功能性說明。

一、試劑盒核心參數

項目 | 具體指標

檢測靶標 | Human IgG-Fc

反應性 | 人

應用平臺 | ELISA

檢測范圍 | 0.69 500 ng/ml

適用樣本類型 | 血清、血漿、腦脊液、乳汁、尿液

檢測方法 | 生物素化-鏈霉親和素-HRP（Biotin-Streptavidin-HRP）

實驗類型 | Sandwich ELISA（雙抗夾心法）

抗原種屬 | 人

儲存條件 | 2 8 °C

有效期 | 收貨后6個月

試劑盒內含：人IgG-Fc預包被96孔板（1塊）、人IgG標準品（500 ng/瓶，2瓶）、人IgG-Fc檢測抗體（12 ml）、10×稀釋緩沖液B（25 ml）、HRP溶液A（12 ml）、TMB底物（12 ml）、終止液（12 ml）、20×洗滌緩沖液（50 ml）以及密封板膜（6張）。所有組分均可在2~8°C冷藏保存，無需冷凍，隨取隨用。

二、檢測原理與特異性優勢

本試劑盒采用經典的雙抗夾心-生物素親和素放大系統：

1.捕獲：96孔板內已預包被抗人IgG-Fc特異性抗體，能夠識別樣本中IgG分子的Fc段，而不與Fab片段或輕鏈發生交叉反應。

2.結合：加入樣本或標準品后，樣本中的人IgG-Fc被固定在板上的捕獲抗體結合。

3.檢測：加入檢測抗體（同樣針對IgG-Fc，且帶有生物素標記），形成“捕獲抗體—目標抗原—檢測抗體”夾心復合物。

4.信號放大：加入鏈霉親和素標記的辣根過氧化物酶（Streptavidin-HRP）。由于每個鏈霉親和素可結合多個生物素，信號得到顯著放大。

5.顯色：加入TMB底物，HRP催化其轉化為藍色產物，終止后變為黃色，在450 nm處讀取吸光度。

關鍵特異性：試劑盒采用的抗體僅識別IgG分子的Fc部分，而非Fab或輕鏈。這意味著即使樣本中存在游離的輕鏈、Fab降解片段或其他免疫球蛋白（IgA、IgM、IgD、IgE），也不會產生非特異性信號。這對于分析腦脊液、乳汁或反復凍融的血清樣本尤其重要——這些樣本中常存在部分降解的IgG片段，若使用通用型抗IgG抗體可能高估完整IgG含量，而本試劑盒只報告含有完整Fc段的IgG分子。

三、樣本采集與處理建議

1. 血清

使用不含抗凝劑的采血管，室溫凝集30分鐘，1000×g離心15分鐘，取上清。

短期（<24h）可2-8°C保存；長期請分裝后-20°C或-80°C凍存，避免反復凍融。

2. 血漿

推薦使用EDTA或肝素抗凝管，采集后30分鐘內離心（1000×g，15分鐘），取上清。

枸櫞酸鈉抗凝血漿也可使用，但需注意抗凝劑比例。

3. 腦脊液（CSF）

一般無需稀釋直接檢測（因IgG濃度遠低于血清）。若超出標準曲線上限，可用1×稀釋緩沖液稀釋2~5倍。

4. 乳汁

初乳或成熟乳含大量脂肪和酪蛋白。建議先4°C 2000×g離心15分鐘，去除上層脂肪和沉淀，取中間澄清乳清層。根據預期濃度可稀釋10~100倍。

5. 尿液

尿液IgG濃度較低，通常無需稀釋即可上樣。若尿液混濁，需離心（3000×g，10分鐘）取上清。

通用稀釋方法：所有樣本均使用1×稀釋緩沖液（將10×濃縮液用去離子水1:9稀釋）進行稀釋。建議進行預實驗確定最佳稀釋倍數，使OD值落在標準曲線中間段。

四、儲存與穩定性

所有試劑盒組分均須儲存于2-8°C，不可冷凍（預包被板若凍結會破壞抗體構象，導致信號下降）。按此條件，試劑盒自收貨之日起6個月內保持性能穩定。已稀釋的標準品建議當日使用，剩余廢液不可重復凍存。TMB底物應避光保存，若出現明顯藍色則表明已污染，請更換新批次。