BioAssay Systems 乳酸脫氫酶試劑盒-直接檢測血清、血漿及其他來源中的LDH活性

乳酸脫氫酶（LDH） 是一種氧化還原酶，能夠催化乳酸和丙酮酸之間的相互轉化。當疾病或損傷影響含有LDH的組織時，細胞會將LDH釋放到血液中，在那里其水平會高于正常值。因此，LDH通常被用于評估組織或細胞損傷的存在。這種非放射性比色LDH實驗基于四氮唑鹽MTT在NADH偶聯的酶促反應中被還原為一種還原形式的MTT，其在565 nm處有最大吸收峰。形成的紫色強度與酶活性成正比。

作為BioAssay Systems在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產品乳酸脫氫酶試劑盒。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點： 

- 高靈敏度和寬線性范圍。使用3 ?L血清或血漿樣本。檢測限為2 IU/L，線性范圍可達200 IU/L。

- 均相且簡單的操作流程。簡單的“混合-測量”操作流程可在30分鐘內可靠地定量LDH活性。

- 穩定且適用于高通量篩選（HTS）。所有試劑均與高通量液體處理儀器兼容。

應用： 

- 直接檢測：血清、血漿及其他來源中的LDH活性。

- LDH生產中的特性分析與質量控制。

- 藥物發現：篩選和評估LDH調節劑。

試劑盒內容（96孔板100次測試）： 

- 底物緩沖液：20 mL

- 二氫硫色素：120 ?L

- NAD溶液：1 mL

- 校準液：1.5 mL

- MTT溶液：1.5 mL

儲存條件： 試劑盒在常溫下運輸。收到后將所有組分儲存于-20°C。保質期：收到后6個月。

注意事項： 試劑僅供研究使用。使用試劑時應遵循實驗室試劑的常規注意事項。請參考材料安全數據表以獲取詳細信息。

實驗步驟： 

本實驗基于動力學反應。為確保孵育時間一致，向樣本中加入工作試劑時應迅速且混合應簡短但充分。建議使用多通道移液器。實驗可在室溫（25°C）或37°C下進行。

樣本準備： 

- 血清和血漿可直接用于實驗。

- 組織：解剖前，用磷酸鹽緩沖液（pH 7.4）沖洗組織以去除血液。每克組織在含有100 mM磷酸鉀（pH 7.0）和2 mM EDTA的5 mL緩沖液中勻漿。在4°C下以10,000 x g離心15分鐘。取上清液用于實驗。

- 細胞裂解液：通過在4°C下以2,000 x g離心5分鐘收集細胞。對于貼壁細胞，不要使用蛋白酶收獲細胞，而是使用橡膠刮刀。在適當體積的冷緩沖液（含有100 mM磷酸鉀，pH 7.0和2 mM EDTA）中勻漿或超聲處理細胞。在4°C下以10,000 x g離心15分鐘。取上清液用于實驗。

- 所有樣本可在-20到-80°C下儲存至少一個月。

試劑準備： 將試劑平衡至所需的反應溫度（例如25°C或37°C）。使用前短暫離心試劑管。

通過混合以下試劑為所有樣本孔準備足夠的工作試劑（WR）：對于每個孔，加入14 ?L MTT溶液、8 ?L NAD溶液、1 ?L二氫硫色素和175 ?L底物緩沖液。建議現配現用。

示例：

使用96孔板協議對樣本進行實驗。人類血清的LDH活性為41 IU/L，大鼠血清為220 IU/L，胎牛血清為88 IU/L。

在96孔板實驗中，隨著血清濃度的增加，LDH反應的動力學。

文獻參考：

1. Gabel, M et al (2020). Annexin A2 Egress during Calcium-Regulated Exocytosis in Neuroendocrine Cells. Cells, 9(9), E2059.

2. Sharabi, K. et al (2017). Selective chemical inhibition of PGC-1alpha gluconeogenic activity ameliorates type 2 diabetes. Cell, 169(1), 148-160.

3. Demers, M., et al. (2011). Increased efficacy of breast cancer chemotherapy in thrombocytopenic mice. Cancer Res 71(5):1540-9. 

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區的高新技術生物技術公司，專注于研發、生產和銷售高品質的生化檢測試劑盒，產品種類齊全，主要用于科學研究和生物醫藥開發，以滿足生命科學行業日益增長的需求。BioAssay Systems在現代藥物發現領域擁有超過50年的豐富經驗，已經開發了超過250種用于藥物發現和生命科學研究的檢測試劑盒。產品主要包括：1.血液尿液化學；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

作為BioAssay Systems在中國區域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產品。