BioAssay Systems CellQuanti Blue 細胞活力測定試劑盒-靈敏且準確，低至100個細胞可以被準確定量

這種均相實驗僅需簡單地向細胞培養物中加入單一試劑——CellQuanti-Blue 試劑，經過孵育步驟后，測量熒光強度（激發波長 = 530 - 570 nm，發射波長 = 590 - 620 nm）。CellQuanti-Blue 試劑與其他基于還原酶的實驗（如Alamar Blue試劑）類似，利用了非熒光的還原酶染料Resazurin。這種染料在代謝活躍的細胞還原作用下，會轉化為一種高熒光產物（Resorufin）?；罴毎軌蜉p易還原這種無毒試劑，而由此產生的熒光強度增加可以方便地通過熒光分光光度計或平板讀數器進行監測。非活性細胞沒有代謝能力，因此不會還原這種染料。因此，該實驗中觀察到的熒光強度是活細胞數量的真實反映。

CellQuanti-Blue 試劑經過優化，具有最高的靈敏度、重復性和較長的保質期。這種均相細胞實驗可以在多孔板中進行。該試劑與所有培養基和高通量篩選應用中的液體處理系統兼容，適用于96孔和384孔板。應用范圍包括細胞增殖、細胞毒性檢測和細胞凋亡。

作為BioAssay Systems在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產品CellQuanti Blue 細胞活力測定試劑盒。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點：

- 安全。非放射性實驗（與H-胸苷摻入實驗相比）。

- 靈敏且準確。低至100個細胞可以被準確定量。

- 節省時間。在96孔和384孔板中進行的高通量實驗允許每天同時處理數萬個樣本。

- 均相且便捷。單一試劑，“混合-孵育-測量”型實驗。無需洗滌和試劑轉移步驟。

- 穩定且適用于高通量篩選（HTS）：在96孔和384孔板中，Z'因子通常為0.6到0.9?？梢暂p松在HTS液體處理系統上自動化操作。

應用：

- 細胞增殖：細胞因子、生長因子、營養物質的影響。

- 細胞毒性與凋亡：評估毒性化合物、抗癌抗體、毒素、環境污染物等。

- 藥物發現：抗癌藥物的高通量篩選。

儲存條件：試劑盒在室溫下運輸。CellQuanti-Blue 試劑對光敏感，應存放在提供的棕色瓶中，于4°C保存。對照試劑在-20°C下穩定。保質期：收到后12個月。

注意事項：試劑僅供研究使用。使用試劑時應遵循實驗室試劑的常規注意事項。請參考材料安全數據表以獲取詳細信息。

實驗步驟：

CellQuanti-Blue 實驗基于代謝活躍的細胞將非熒光試劑轉化為熒光產物。對于大多數細胞，這種還原反應需要1到5小時。然后在熒光微孔板讀數器上定量產物的熒光強度。盡管大多數培養基中含有酚紅，但酚紅不會干擾該實驗。技術說明中的所有數據均在含有酚紅的培養基中獲得。

一般注意事項：

- 孵育時間：孵育時間取決于細胞系。某些細胞系表現出較強的代謝活性，因此比代謝活性較低的細胞系需要更短的孵育時間?？梢酝ㄟ^多次讀取平板（例如，在加入CellQuanti-Blue 試劑后每30分鐘讀取一次）來輕松確定孵育時間。一般來說，孵育1到5小時是足夠的。長時間孵育（如超過18小時）可能導致高細胞數量時熒光響應非線性。

- 細胞數量：通常優化后的CellQuanti-Blue 試劑對培養細胞數量表現出較寬范圍的線性熒光響應。建議通過細胞稀釋法確定每孔細胞數量，以獲得最高的信噪比?？梢酝ㄟ^細胞稀釋法輕松確定最佳細胞數量。

- 對照組：雖然不是必需的，但可以運行一種細胞毒性或促進細胞增殖的陽性對照。皂甙是一種細胞毒性洗滌劑，可從BioAssay Systems獲得（見技術說明中的圖2）。每次實驗應進行空白對照，即不含細胞的培養基或含有0.1%皂甙的細胞?？瞻讓φ沼糜诖_定背景熒光，該值必須從數據分析中減去。

技術說明：

CellQuanti-Blue 實驗試劑盒經過特別優化和配方調整，以提供一種靈敏、便捷且穩定的細胞增殖和細胞毒性檢測實驗。試劑盒的關鍵特點如下：

- 安全。非放射性實驗（與H-胸苷摻入實驗相比）。

- 靈敏且準確。低至100個細胞可以被準確定量。

- 節省時間。在96孔和384孔板中進行的高通量實驗允許同時處理大量樣本。

- 均相且便捷。單一試劑，“混合-孵育-測量”型實驗。無需洗滌和試劑轉移步驟。

- 穩定且適用于高通量篩選（HTS）。在96孔和384孔板中，Z'因子通常為0.6到0.9?？梢暂p松在HTS液體處理系統上自動化操作。

示例：

圖1. CellQuanti-Blue 熒光與細胞數量的線性關系。HEK293細胞在384孔板中進行稀釋，并用CellQuanti-Blue 試劑處理。熒光強度與細胞數量呈線性關系（R? = 0.999）。從空白對照中估算的檢測限為100個細胞。

圖2. HEK293細胞中皂甙的劑量依賴性細胞毒性。HEK293細胞以每孔15,000個細胞（40 ?L）的密度鋪板。細胞用不同濃度的皂甙處理。過夜培養后，加入5 ?L CellQuanti-Blue 試劑（實心圓圈）。Alamar Blue（空心圓圈）也進行了對比測試。經過3小時孵育后，使用Molecular Devices LJL Analyst測量熒光強度。數據代表平均值 ± 標準差（n = 3）。皂甙的IC??值分別為：CellQuanti-Blue （信號：背景 = 4.8倍）為0.0016 wt%，Alamar Blue（信號：背景 = 3.3倍）為0.0017 wt%。

文獻參考：

1. Kelley, KD et al (2010). YPEL3, a p53-regulated gene that induces cellular senescence. Cancer Res. 70(9):3566-75.

2. Wang T, et al (2010). Activated T-cells inhibit neurogenesis by releasing granzyme B: rescue by Kv1.3 blockers. J Neurosci. 30(14):5020-7.

3. Heminger K, et al (2009). Alterations in gene expression and sensitivity to genotoxic stress following HdmX or Hdm2 knockdown in human tumor cells harboring wild-type p53. Aging 1(1):89-108.

4. Desplats, PA et al (2008). Functional roles for the striatal-enriched transcription factor, Bcl11b, in the control of striatal gene expression and transcriptional dysregulation in Huntington's disease. Neurobiol Dis.31(3):298-308. 

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區的高新技術生物技術公司，專注于研發、生產和銷售高品質的生化檢測試劑盒，產品種類齊全，主要用于科學研究和生物醫藥開發，以滿足生命科學行業日益增長的需求。BioAssay Systems在現代藥物發現領域擁有超過50年的豐富經驗，已經開發了超過250種用于藥物發現和生命科學研究的檢測試劑盒。產品主要包括：1.血液尿液化學；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

作為BioAssay Systems在中國區域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產品。