BPS Bioscience Anti-H3K4ac多克隆抗體免疫熒光實驗分析

針對組蛋白H3在賴氨酸4位點乙?；℉3K4ac）的多克隆抗體，使用KLH偶聯的合成肽作為免疫原。

作為BPS Bioscience在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦BPS Bioscience熱銷產品Anti-H3K4ac多克隆抗體。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

Anti-H3K4ac多克隆抗體：

克隆性：多克隆  

宿主物種/表達系統：兔  

純化方法：親和純化  

形式：水溶液緩沖液  

配方：含有0.05%疊氮化物和0.05% ProClin 300的PBS溶液  

濃度：50 ?g/34 ?l  

免疫原：合成肽  

儲存/穩定性  

在–80°C下可保存長達2年。首次解凍后離心以最大化產品回收。分裝以避免反復凍融循環。分裝可在–20°C下保存至少一個月。

染色質免疫沉淀（ChIP）結果  

使用野生型（WT）和H3K4R突變型S. pombe細胞，針對H3K4ac的抗體（產品編號25251）以及優化的qPCR引物對進行染色質免疫沉淀（ChIP）實驗。實驗中使用10 ?g DNA對應的剪切染色質和0.5 ?g抗體。通過qPCR分析，使用特異性引物檢測兩個不同的近著絲粒重復區域和常染色質adh1基因。圖1顯示了回收率，以輸入DNA的百分比表示（免疫沉淀DNA與輸入DNA的相對量）。

抗體滴度測定  

通過ELISA實驗測定抗體滴度，使用針對H3K4ac的抗體（產品編號25251）的系列稀釋液，并在抗原包被的孔中進行檢測。實驗中使用的抗原是含有目標組蛋白修飾的肽段。通過繪制抗體稀釋度與吸光度的關系圖（圖2），估算純化抗體的滴度為1:27,800。

交叉反應性測試  

通過點樣（Dot Blot）分析測試針對H3K4ac的抗體（產品編號25251）與其他組蛋白H3修飾以及未修飾H3K4序列的交叉反應性。將含有相應修飾的肽段（100至0.2 pmol）點樣于膜上，抗體稀釋度為1:10,000。圖3顯示該抗體對目標修飾具有高度特異性。

Western Blot分析  

使用針對H3K4ac的抗體（產品編號25251）對HeLa細胞的組蛋白提取物（15 ?g）進行Western Blot分析，抗體稀釋度為1:500，使用含有5% BSA的TBS-Tween緩沖液。左側顯示分子量標記（單位：kDa），右側標記了目標蛋白的位置。

免疫熒光實驗  

野生型和H3K4R突變型S. pombe細胞用針對H3K4ac的抗體（產品編號25251）（紅色）和Hoechst染色（藍色，左側）進行染色，或單獨使用H3K4ac抗體（右側）。抗體稀釋度為1:300。

應用  

- 染色質免疫沉淀（ChIP）：0.5 ?g/ChIP  

- 酶聯免疫吸附試驗（ELISA）：1:500  

- 點樣（Dot Blot，DB）：1:10,000  

- Western Blot（WB）：1:500  

- 免疫熒光（IF）：1:300  

運輸溫度：–20°C或–80°C  

物種反應性：人、酵母  

注意事項：每IP的最佳抗體用量應由最終用戶確定。建議測試1–5 ?g/IP。  

警告：避免反復凍融循環。  

科學分類：抗體  

監管狀態：僅限研究使用

BPS Bioscience是一家通過ISO 9001:2015認證的生命科學領域的供應商，公司一直致力于開發藥物研發領域的重組蛋白酶、蛋白酶活性/抑制劑篩選試劑盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年創立，從創立至今一直致力于提供藥物研發領域的創新解決方案，以推動新的藥物發現a。公司主要關注的領域包括免疫療法、表觀遺傳學、新型冠狀病毒、CRISPR、細胞信號轉導等，主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、組蛋白去甲基化酶、組蛋白甲基化轉移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。 

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