BPS Bioscience Anti-H3K4me1單克隆抗體的多種應用說明

針對組蛋白H3在賴氨酸4位點單甲基化（H3K4me1）的小鼠單克隆抗體，使用KLH偶聯的合成肽作為免疫原。  

作為BPS Bioscience在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦BPS Bioscience熱銷產品Anti-H3K4me1單克隆抗體。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

Anti-H3K4me1單克隆抗體：

克隆性：單克隆  

宿主物種/表達系統：小鼠  

純化方法：Protein A純化  

形式：水溶液緩沖液  

配方：含有0.05%疊氮化物和0.05% ProClin 300的PBS溶液  

濃度：50 ?g/50 ?l  

免疫原：合成肽  

儲存/穩定性  

在–80°C下可保存長達2年。首次解凍后離心以最大化產品回收。分裝以避免反復凍融循環。分裝可在–20°C下保存至少一個月。

染色質免疫沉淀（ChIP）結果  

使用HeLa細胞、針對H3K4me1的單克隆抗體（產品編號25252）以及優化的qPCR引物集進行染色質免疫沉淀（ChIP）實驗。實驗中使用160萬細胞的剪切染色質。抗體用量分別為1 ?g、5 ?g和10 ?g/ChIP進行梯度實驗分析。以5 ?g IgG作為陰性免疫沉淀（IP）對照。通過qPCR分析，使用特異性引物檢測GAPDH基因的啟動子和編碼區以及RPL10和HBB啟動子。圖1顯示了回收率，以輸入DNA的百分比表示（免疫沉淀DNA與輸入DNA的相對量）。

單克隆抗體的交叉反應性  

為測試特異性，使用針對H3K4me1的單克隆抗體（產品編號25252）進行ELISA實驗，采用該抗體的系列稀釋液。實驗中使用了含有未修飾的H3K4以及單甲基化、雙甲基化和三甲基化H3K4和單甲基化H3K9的肽段進行包被。圖2顯示該抗體對目標修飾具有高度特異性。

Western Blot分析  

使用針對H3K4me1的單克隆抗體（產品編號25252）對HeLa細胞的組蛋白提取物（15 ?g）進行Western Blot分析，抗體稀釋度為1:1,000，使用含有5%脫脂奶粉的TBS-Tween緩沖液。右側標記了目標蛋白的位置，左側顯示了分子量標記（單位：kDa）。

免疫熒光實驗  

使用針對H3K4me1的抗體（產品編號25252）和DAPI對HeLa細胞進行染色。細胞用4%甲醛固定10分鐘，并用含有5%正常山羊血清和1% BSA的PBS/TX-100進行封閉。細胞用H3K4me1抗體（左側）以1:500的比例稀釋在封閉液中進行免疫熒光標記，隨后使用與Alexa594偶聯的抗小鼠抗體進行二抗標記。中間圖顯示DAPI對細胞核的染色。右側圖顯示了兩種染色的合并圖像。

應用  

- 染色質免疫沉淀（ChIP）：1 ?g/IP  

- 酶聯免疫吸附試驗（ELISA）：1:5000  

- Western Blot（WB）：1:1000  

- 免疫熒光（IF）：1:500  

運輸溫度：–20°C或–80°C  

物種反應性：人  

注意事項：每IP的最佳抗體用量應由最終用戶確定。建議測試1–5 ?g/IP。  

警告：避免反復凍融循環。  

科學分類：抗體  

監管狀態：僅限研究使用

BPS Bioscience是一家通過ISO 9001:2015認證的生命科學領域的供應商，公司一直致力于開發藥物研發領域的重組蛋白酶、蛋白酶活性/抑制劑篩選試劑盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年創立，從創立至今一直致力于提供藥物研發領域的創新解決方案，以推動新的藥物發現a。公司主要關注的領域包括免疫療法、表觀遺傳學、新型冠狀病毒、CRISPR、細胞信號轉導等，主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、組蛋白去甲基化酶、組蛋白甲基化轉移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。 

作為BPS Bioscience在中國的區域代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BPS Bioscience以及客戶訂制化服務。