Biogradetech Sphingosine 1-phosphate (S1P) 瓊脂糖珠：探索S1P生物學功能的有力工具

脂質包被珠被設計用于蛋白質下拉實驗。用于檢測純化蛋白質、細胞裂解物中蛋白質的脂質結合，或放射性標記的體外翻譯產物的結合。

S1P珠由瓊脂糖組成，每毫升珠含有10納摩爾的結合鞘氨醇1-磷酸（S1P），足以進行幾次蛋白質結合實驗。每1mL S1P珠粒包括少量對照珠粒。更多數量的控制珠也可供購買。

作為Biogradetech獨家代理，艾美捷科技強烈推薦Biogradetech熱銷產品 Sphingosine 1-phosphate (S1P) 瓊脂糖珠。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

Sphingosine 1-phosphate (S1P) 是一種重要的生物活性鞘脂，參與多種細胞過程。

S1P 瓊脂糖珠的原理與特點

S1P 瓊脂糖珠利用瓊脂糖珠的高吸附性和特異性，通過特定的化學或生物學方法將S1P固定于珠上。這種設計允許研究人員通過簡單的操作步驟，從復雜的生物樣品中捕獲和富集S1P。

S1P 瓊脂糖珠的應用

S1P 瓊脂糖珠在S1P的檢測和分析中具有廣泛的應用潛力。它可以用于：

從細胞培養上清或生物體液中提取S1P。

研究S1P與其受體的相互作用。

作為藥物篩選和開發的工具，評估S1P受體激動劑或拮抗劑的活性。

S1P 瓊脂糖珠操作流程

使用S1P 瓊脂糖珠進行實驗通常包括以下步驟：

樣品準備：收集并處理細胞培養上清或生物體液。

結合S1P：將樣品與S1P 瓊脂糖珠混合，允許S1P與珠結合。

洗滌和分離：去除未結合的物質，分離出結合S1P的珠。

檢測和分析：利用質譜、ELISA或其他檢測方法分析結合的S1P。

脂質珠^TM測定注意事項：

脂質包被珠有1 mL和0.1 mL兩種規格，以1X PBS緩沖液中的50%漿液形式提供。

訂購1 mL的產品會附帶200 ?L的對照珠。對照珠也可單獨購買，建議使用它們進行分析。

儲存在2-8°C。產品對溫度和光線敏感，請勿冷凍。

以1,000 x g或更低的速度離心珠。不要高速離心珠，因為這可能會壓碎珠。

每1 mL珠中有總計10毫摩爾的結合脂質。

珠的直徑范圍在45-165微米之間。

對每種蛋白質使用50-100 ?L的50%漿液脂質包被珠和對照珠。

了解陽性對照蛋白列表。

脂質珠^TM - 蛋白質拉下協議：

我們提供以下協議作為指南，并強烈鼓勵研究人員查閱科學文獻并進行優化實驗，以確定對其感興趣的蛋白質最有利的條件。

充分混合珠（不要渦旋）。將50-100 ?L的50%珠漿液轉移到0.5-1.5 mL的管中。

以1,000 x g或更低的速度離心珠以沉淀。小心移除上清液，避免丟失珠。

用洗滌緩沖液的10倍過量洗滌珠。輕輕混合，孵育1-2分鐘。重復洗滌步驟兩次。

小心移除洗滌上清液，并將珠在含有您的蛋白質的結合緩沖液中重新懸浮。 a. 對于純化的蛋白質，使用1-10 ?g的蛋白質，用足夠的結合緩沖液稀釋形成50%脂質珠漿液。 b. 對于細胞裂解物、提取物、亞細胞組分：使用大約1 mg的總蛋白質對1 mL結合緩沖液。將整個1 mL準備好的樣品加入到您洗滌過的珠中。

將蛋白質-珠溶液孵育1-3小時。孵育可以在室溫或4°C下進行，取決于您蛋白質的穩定性。需要連續運動以保持珠懸浮。

沉淀珠并小心移除上清液。如果需要，上清液可以用來監測未結合的蛋白質。

用洗滌緩沖液的10倍過量洗滌珠。輕輕混合，孵育1-2分鐘。重復洗滌步驟五次。如果您選擇在結合緩沖液中使用牛血清白蛋白（BSA），請確保在進入下一步之前將其徹底洗出。

在最后一次洗滌后，通過向珠中加入等體積的2X Laemmli樣品緩沖液（或類似物）并加熱至70°C 10分鐘來洗脫結合的蛋白質。

加熱后，沉淀珠并移除上清液。將上清液儲存在4°C下，直到分析。丟棄珠。

蛋白質可以通過SDS-PAGE分離，并通過凝膠的Coomassie藍染色、蛋白質轉移和免疫印跡檢測感興趣的蛋白質，或進行自顯影。

文獻參考：

1) N. C. Hait, J. Allegood, et al. (2009) “Regulation of histone acetylation in the nucleus by sphingosine-1-phosphate” Science 325(5945), 1254-7

2) G. M. Strub, M. Paillard, et al. (2011) “Sphingosine-1-phosphate produced by sphingosine kinase 2 in mitochondria interacts with prohibitin 2 to regulate complex IV assembly and respiration” The FASEB Journal 25(2), 600-612 10.1096/fj.10-167502

3) E.-S. Park, S. Choi, et al. (2015) “Tumor Necrosis Factor (TNF) Receptor-associated Factor (TRAF)-interacting Protein (TRIP) Negatively Regulates the TRAF2 Ubiquitin-dependent Pathway by Suppressing the TRAF2-Sphingosine 1-Phosphate (S1P) Interaction” J. Biol. Chem. 290(15), 9660-9673 10.1074/jbc.M114.609685

4) Parham, K. A., et al. (2015). “Sphingosine 1-phosphate is a ligand for peroxisome proliferator-activated receptor-γ that regulates neoangiogenesis.” The FASEB Journal 29(9): 3638-3653.

Biogradetech成立于2015年，總部位于美國加利福尼亞州，早期以產品技術研發服務起家，逐步發展了廣泛的產品線，并將其商業化銷售，包括蛋白質、抗體、酶、培養基、試劑盒和儀器。適用于細胞生物學、蛋白質組學、分子生物學、免疫學、微生物學、診斷學、生物化學、神經科學、血液分析和高通量藥物篩選等領域。