Biogradetech Sphingosine 瓊脂糖珠：探索鞘脂信號傳導的新工具

脂質包被珠被設計用于蛋白質下拉實驗。用于檢測純化蛋白質、細胞裂解物中蛋白質的脂質結合，或放射性標記的體外翻譯產物的結合。

S1P珠由瓊脂糖組成，每毫升珠含有10納摩爾的結合鞘氨醇1-磷酸（S1P），足以進行幾次蛋白質結合實驗。每1mL S1P珠粒包括少量對照珠粒。更多數量的控制珠也可供購買。

作為Biogradetech獨家代理，艾美捷科技強烈推薦Biogradetech熱銷產品Sphingosine 瓊脂糖珠。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

Sphingosine 是一種關鍵的生物活性脂質，其在細胞內信號傳導中的作用日益受到重視。Sphingosine 瓊脂糖珠作為一種實驗工具，為研究Sphingosine的功能及其與蛋白質的相互作用提供了新的途徑。本文介紹了Sphingosine 瓊脂糖珠的原理、應用以及在生物醫學研究中的潛力。

Sphingosine 在細胞生理和病理過程中扮演著重要角色，但其在生物體內的動態變化和作用機制仍需進一步研究。Sphingosine 瓊脂糖珠的開發為研究者提供了一種新的實驗工具，有助于深入理解Sphingosine的生物學功能。

Sphingosine 瓊脂糖珠的原理

Sphingosine 瓊脂糖珠通過將Sphingosine固定在瓊脂糖珠上，利用其與特定蛋白質的親和性，實現對目標蛋白的捕獲和純化。這種技術可以用于研究Sphingosine與其受體或結合蛋白的相互作用。

Sphingosine 瓊脂糖珠的應用

Sphingosine 瓊脂糖珠在生物醫學研究中有多種應用，包括：

研究Sphingosine與蛋白質的相互作用。

篩選Sphingosine受體的激動劑或拮抗劑。

從復雜樣品中純化Sphingosine結合蛋白。

作為藥物開發中的篩選工具。

Sphingosine 瓊脂糖珠的操作流程

使用Sphingosine 瓊脂糖珠進行實驗通常包括以下步驟：

樣品準備：收集細胞或組織樣品。

結合Sphingosine：將Sphingosine固定在瓊脂糖珠上。

蛋白質捕獲：將樣品與Sphingosine 瓊脂糖珠混合，捕獲目標蛋白。

洗滌和分離：去除未結合的蛋白質，分離出結合的蛋白。

檢測和分析：通過質譜、ELISA等方法分析捕獲的蛋白質。

脂質珠^TM測定注意事項：

脂質包被珠有1 mL和0.1 mL兩種規格，以1X PBS緩沖液中的50%漿液形式提供。

訂購1 mL的產品會附帶200 ?L的對照珠。對照珠也可單獨購買，建議使用它們進行分析。

儲存在2-8°C。產品對溫度和光線敏感，請勿冷凍。

以1,000 x g或更低的速度離心珠。不要高速離心珠，因為這可能會壓碎珠。

每1 mL珠中有總計10毫摩爾的結合脂質。

珠的直徑范圍在45-165微米之間。

對每種蛋白質使用50-100 ?L的50%漿液脂質包被珠和對照珠。

了解陽性對照蛋白列表。

脂質珠^TM - 蛋白質拉下協議：

我們提供以下協議作為指南，并強烈鼓勵研究人員查閱科學文獻并進行優化實驗，以確定對其感興趣的蛋白質最有利的條件。

充分混合珠（不要渦旋）。將50-100 ?L的50%珠漿液轉移到0.5-1.5 mL的管中。

以1,000 x g或更低的速度離心珠以沉淀。小心移除上清液，避免丟失珠。

用洗滌緩沖液的10倍過量洗滌珠。輕輕混合，孵育1-2分鐘。重復洗滌步驟兩次。

小心移除洗滌上清液，并將珠在含有您的蛋白質的結合緩沖液中重新懸浮。 a. 對于純化的蛋白質，使用1-10 ?g的蛋白質，用足夠的結合緩沖液稀釋形成50%脂質珠漿液。 b. 對于細胞裂解物、提取物、亞細胞組分：使用大約1 mg的總蛋白質對1 mL結合緩沖液。將整個1 mL準備好的樣品加入到您洗滌過的珠中。

將蛋白質-珠溶液孵育1-3小時。孵育可以在室溫或4°C下進行，取決于您蛋白質的穩定性。需要連續運動以保持珠懸浮。

沉淀珠并小心移除上清液。如果需要，上清液可以用來監測未結合的蛋白質。

用洗滌緩沖液的10倍過量洗滌珠。輕輕混合，孵育1-2分鐘。重復洗滌步驟五次。如果您選擇在結合緩沖液中使用牛血清白蛋白（BSA），請確保在進入下一步之前將其徹底洗出。

在最后一次洗滌后，通過向珠中加入等體積的2X Laemmli樣品緩沖液（或類似物）并加熱至70°C 10分鐘來洗脫結合的蛋白質。

加熱后，沉淀珠并移除上清液。將上清液儲存在4°C下，直到分析。丟棄珠。

蛋白質可以通過SDS-PAGE分離，并通過凝膠的Coomassie藍染色、蛋白質轉移和免疫印跡檢測感興趣的蛋白質，或進行自顯影。

文獻參考：

1) Alvarez, S. E., et al. (2010). “Sphingosine-1-phosphate is a missing cofactor for the E3 ubiquitin ligase TRAF2.” Nature 465(7301): 1084.

2) Takasugi, N., et al. (2011). “BACE1 activity is modulated by cell-associated sphingosine-1-phosphate.” J Neurosci 31(18): 6850-6857

3) Parham, K. A., et al. (2015). “Sphingosine 1-phosphate is a ligand for peroxisome proliferator-activated receptor-γ that regulates neoangiogenesis.” The FASEB Journal 29(9): 3638-3653.

4) Nair, S., et al. (2018). “Antigen-mediated regulation in monoclonal gammopathies and myeloma.” JCI insight 3(8) e98259.

Biogradetech成立于2015年，總部位于美國加利福尼亞州，早期以產品技術研發服務起家，逐步發展了廣泛的產品線，并將其商業化銷售，包括蛋白質、抗體、酶、培養基、試劑盒和儀器。適用于細胞生物學、蛋白質組學、分子生物學、免疫學、微生物學、診斷學、生物化學、神經科學、血液分析和高通量藥物篩選等領域。