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巖藻糖Fucose探索:糖生物學中的重要角色

發布者:艾美捷科技    發布時間:2025-01-20     
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巖藻糖Fucose特異性地與結合在α1,3中的蛋白質N-聚糖上的巖藻糖殘基發生交叉反應。這種殘基是植物蛋白N-聚糖的特征,在動物蛋白N-聚糖中不存在。將該殘留物加入高爾基體中。

 

艾美捷巖藻糖Fucose:

貨號:AS07-268

免疫原:核心巖藻糖殘基通過α1,3連接至N-糖鏈。

宿主:兔子

克隆性:多克隆

純度:免疫原親和純化的血清,溶于pH 7.4的磷酸鹽緩沖液(PBS)中。

形式:凍干

數量:50 ?g

復溶:復溶時加入50 ?l無菌水。

儲存:凍干品/復溶后儲存于-20°C;復溶后請分裝保存,避免反復凍融。打開前請短暫離心管子,以避免因物質粘附在管蓋或管壁上而導致的損失。

測試應用:酶聯免疫吸附測定(ELISA)、免疫定位(IL)、西方印跡(WB)

推薦稀釋度:0.5 ?g/ml(ELISA),1:40(IL),1 ?g/10 ml(WB)

預期 | 表觀分子量:10 - 100 kDa(針對各種糖蛋白)

確認的反應性:高等植物、Phaeodactylum tricornutum(硅藻)

預測的反應性:高等植物、Phaeodactylum tricornutum

未反應的:目前尚未發現與預測反應性不符的已知例外。

巖藻糖Fucose

圖:抗巖藻糖抗體與PLA2(磷脂酶A2)和鏈霉親和素(Avidin)呈陽性反應,而與去唾液酸胎球蛋白(asialofetuin)呈陰性反應。這表明該抗體僅識別α1,3巖藻糖表位。

對于每份樣品,將1 ?g純化蛋白用Laemmli樣品緩沖液在100°C下變性10分鐘,隨后加載至4-12%的Bis-Tris凝膠上,并通過半干法轉印至硝酸纖維素膜,轉印時間為1小時15分鐘。膜在TBST中過夜飽和,期間不斷攪拌。膜在室溫下用TBST稀釋至1:5000的濃度,與一抗孵育2小時,期間不斷攪拌。棄去抗體溶液,用TBST快速沖洗后,膜在TBST中洗滌3次,每次15分鐘。膜在TBST中稀釋至1:50,000的濃度,與二抗(山羊抗兔IgG,辣根過氧化物酶偶聯,AS09 602,批號1707,來自AGRISE

 

巖藻糖Fucose文獻參考:

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Zhang et al. (2018). An important role of L -fucose biosynthesis and protein fucosylation genes in Arabidopsis immunity. New Phytol. 2018 Dec 15. doi: 10.1111/nph.15639.

Jansing et al. (2018). CRISPR/Cas9-mediated knockout of six glycosyltransferase genes in Nicotiana benthamiana for the production of recombinant proteins lacking β-1,2-xylose and core α-1,3-fucose. Plant Biotechnol J. 2018 Jul 3. doi: 10.1111/pbi.12981.

Nakanishi et al. (2017). Protection of Human Colon Cells from Shiga Toxin by Plant-based Recombinant Secretory IgA. Sci Rep. 2017 Apr 3;7:45843. doi: 10.1038/srep45843. (ELISA)

Hanania et al. (2017). Establishment of a tobacco BY2 cell line devoid of plant specific xylose and fucose as a platform for the production of biotherapeutic proteins. Plant Biotechnol J. 2017 Feb 3. doi: 10.1111/pbi.12702.

Ebert et al. (2015). Identification and Characterization of a Golgi-Localized UDP-Xylose Transporter Family from Arabidopsis. Plant Cell. 2015 Mar 24. pii: tpc.114.133827.

Lehtim?ki et al. (2014). Posttranslational modifications of FERREDOXIN-NADP+ OXIDOREDUCTASE in Arabidopsis chloroplasts. Plant Physiol. 2014 Dec;166(4):1764-76. doi: 10.1104/pp.114.249094

Baiet et all. (2010). N-glycans of Phaeodactylum tricornutum diatom and functional characterization of its N-acetylglucosaminyltransferase I enzyme. J Biol. Chem. Dec 17.


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