BioAssay Systems α-l-巖藻糖苷酶測定試劑盒- 穩健且適合高通量篩選

α-L-巖藻糖苷酶（AFU）是一種由人類FUCA1基因編碼的酶，能夠催化L-巖藻糖的分解。這種酶的遺傳性缺乏會導致一種神經黏脂沉積癥——巖藻糖苷病，其特征是巖藻糖的積累。巖藻糖苷酶血清活性低下還與卵巢癌有關。在糖尿病、甲狀腺功能亢進、肝硬化和肝炎患者中觀察到巖藻糖苷酶血清活性升高。此外，其活性增加還與肺癌、乳腺癌、胃癌、卵巢癌、子宮癌和肝癌有關。

BioAssay Systems的非放射性、比色法AFU檢測基于從合成底物中水解4-硝基苯酚。加入終止試劑后，硝基苯酚會呈現強顏色反應。加入終止試劑后在405 nm處的吸光度增加與酶活性成正比。

作為BioAssay Systems在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產品α-l-巖藻糖苷酶測定試劑盒。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點：

- 高靈敏度和寬線性范圍。線性檢測范圍（10 uL樣本）：20分鐘反應時間為1 - 100 U/L。

- 均相且簡單的操作流程。簡單的加樣-混合-讀取流程可在20分鐘內可靠定量巖藻糖苷酶活性。

- 穩健且適合高通量篩選。所有試劑均適用于高通量液體處理儀器，可輕松自動化，每天測量數千個樣本。

應用：

- 生物樣本（如血漿、血清、組織、細胞裂解液等）中α-L-巖藻糖苷酶活性的測定。

試劑盒組成（96孔板，100次檢測）：

- 底物緩沖液：10 mL

- 終止試劑：12 mL

- 標準品：1 mL（12.5 mM硝基苯酚）

儲存條件：  

試劑盒在室溫下運輸。收到后將所有組分儲存于-20°C。有效期：收到后6個月。

注意事項：  

試劑僅供研究使用。使用試劑時應遵循實驗室試劑的常規注意事項。請參考材料安全數據表以獲取詳細信息。

操作步驟：

該檢測基于動力學反應。為確保孵育時間一致，加入底物和終止試劑到樣本中的操作應迅速，混合應簡短但充分。建議使用多通道移液器。

樣本準備：

- 血清和血漿可以直接檢測。

- 組織：在解剖前，用磷酸鹽緩沖液（pH 7.4）沖洗組織以去除血液。將組織（50 mg）在含有50 mM磷酸鉀（pH 7.5）的緩沖液中勻漿。在4°C下以10,000 × g離心15分鐘。取上清液用于檢測。

- 細胞裂解液：通過在4°C下以2,000 × g離心5分鐘收集細胞。對于貼壁細胞，不要使用蛋白酶酶收獲細胞，而是使用橡膠刮刀。在含有50 mM磷酸鉀（pH 7.5）的冷緩沖液中適當體積內勻漿或超聲細胞。在4°C下以10,000 × g離心15分鐘。取上清液用于檢測。

- 所有樣本可以在-80至-20°C下儲存至少一個月。

試劑準備：  

將底物緩沖液平衡至所需的反應溫度（例如25°C或37°C）。

標準品準備：  

將10 uL 12.5 mM硝基苯酚標準品與490 uL去離子水混合，制備250 uM標準品。

反應準備：

1. 將每個標準品（ODSTD）的100 uL分別加入透明平底96孔板的孔中。

2. 將每個樣本的20 uL分別加入單獨的孔中。向每個樣本孔中加入80 uL底物。輕拍板子以混合。

3. 在25°C或所需溫度下孵育20分鐘。向每個孔中加入100 uL終止試劑。輕拍板子以混合。

4. 讀取405 nm的吸光度。

注意：如果樣本有顏色或不透明，則需要樣本空白（ODBLANK）。向一個孔中加入20 uL樣本，并加入80 uL去離子水。孵育后加入100 uL終止試劑。

標準曲線：

文獻：

1. Giardina M.G. et al. (1992) Serum alpha-L-fucosidase. A useful marker in the diagnosis of hepatocellular carcinoma. Cancer. 70:1044-1048

2. Fernandez-Rodriguez AD. Et al. (2000) Value of the serum alpha-Lfucosidase activity in the diagnosis of colorectal cancer. Oncology 59(4): 310-316.

3. Alhadeff JA et al. (1975) Human liver alpha-L-fucosidase. Purification,characterization, and immunochemical studies. Journal Biol. Chem.250: 7106-7113.

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區的高新技術生物技術公司，專注于研發、生產和銷售高品質的生化檢測試劑盒，產品種類齊全，主要用于科學研究和生物醫藥開發，以滿足生命科學行業日益增長的需求。BioAssay Systems在現代藥物發現領域擁有超過50年的豐富經驗，已經開發了超過250種用于藥物發現和生命科學研究的檢測試劑盒。產品主要包括：1.血液尿液化學；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

作為BioAssay Systems在中國區域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產品。