ALPCO 胰島素(大鼠)ultrasentive,96w：高效檢測，助力內分泌研究

ALPCO大鼠超敏胰島素ELISA試劑盒用于定量檢測大鼠血清和血漿中的胰島素。  

本試劑盒適用于5微升或25微升的樣本量。標準品和對照品的選擇將根據所使用的樣本量而定。

作為ALPCO在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產品胰島素(大鼠)ultrasentive,96w。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

胰島素(大鼠)ultrasentive,96w檢測原理：

ALPCO大鼠超敏胰島素ELISA是一種夾心免疫分析法。96孔微孔板用針對胰島素的單克隆抗體包被。將標準品、對照品和樣品與結合物一起加入微孔板孔中，然后在微孔板振蕩器上以700-900轉/分鐘的速度孵育。第一次孵育完成后，用洗滌緩沖液清洗孔并吸干。加入TMB底物后，再次在微孔板振蕩器上以700-900轉/分鐘的速度孵育。第二次孵育完成后，加入終止液，通過分光光度計在450納米處測量吸光度（OD）。生成的顏色強度與樣品中胰島素的含量成正比。  

*請參考隨每個試劑盒附帶的分析證書以獲取更多信息。

所需材料 

- 精密移液管，用于分裝5、25、75和100微升（配一次性吸頭）  

- 重復或多通道移液管，用于分裝75和100微升  

- 用于試劑準備的容量瓶和移液管  

- 蒸餾水或去離子水，用于試劑準備  

- 微孔板清洗器或洗液瓶  

- 能達到700-900轉/分鐘的微孔板振蕩器  

- 帶450納米濾光片的微孔板讀數儀  

- 用于樣品準備的渦旋混合器  

注意事項 

1. 本試劑盒中的人類血液制品已檢測HIV（人類免疫缺陷病毒）、HBV（乙型肝炎病毒）和HCV（丙型肝炎病毒）。這些病毒的檢測方法不能保證病毒的完全不存在，因此所有試劑應被視為潛在傳染性物質。處理和丟棄應符合所有適用的國家和地方關于潛在生物危害物質處理的規定。  

2. 所有動物源性材料均為BSE（瘋牛?。╆幮浴Ｈ欢?，所有材料仍應被視為潛在傳染性物質。  

3. 避免與皮膚直接接觸。  

4. 本產品不可內服。  

5. 使用本產品時，避免進食、飲水或吸煙。  

6. 不要用嘴吸取任何試劑。  

7. 本試劑盒中的試劑具有批次特異性，不得替換。  

8. 不要使用過期的試劑。  

9. 不建議更改檢測程序，否則可能影響檢測結果。

儲存條件 

試劑盒應在2-8℃下儲存。試劑盒在包裝標簽上的有效期之前是穩定的。

檢測步驟 

所有試劑和微孔板條應在使用前平衡至室溫（18-25℃）。使用前輕輕混合所有試劑。每次檢測運行和每塊微孔板（如果一次使用多塊）都必須進行標準曲線檢測。所有標準品、對照品和樣品應雙份運行。

1. 在打開鋁箔袋之前，應將微孔板平衡至室溫。為標準品、對照品和樣品的雙份測定準備足夠的微孔板條。剩余的微孔板條應密封在含有干燥劑的鋁箔袋中，于2-8℃保存。  

2. 將每個標準品、對照品和樣品分別加入到相應的孔中，每孔5微升或25微升（參見試劑準備和分析證書中的對照品復溶說明）。  

   - 5微升樣本量：使用0.15、0.4、1、3和5.5 ng/mL（C-G）的標準品和2、3號對照品。  

   - 25微升樣本量：使用0.02、0.08、0.15、0.4和1 ng/mL（A-E）的標準品和1、2號對照品。  

3. 每孔加入75微升工作濃度的結合物（參見試劑準備部分）。  

4. 用微孔板密封膜覆蓋微孔板，在室溫下孵育2小時，同時在微孔板振蕩器上以700-900轉/分鐘的速度振蕩。  

5. 倒掉孔中的內容物，用微孔板清洗器用工作濃度洗滌緩沖液（參見試劑準備部分）每孔350微升清洗微孔板6次?；蛘?，使用洗液瓶將工作濃度洗滌緩沖液加入孔中（不要使用多通道移液管）。每次清洗后，倒掉液體，將微孔板倒置并用力在吸水紙上敲擊。最后一次清洗（無論是自動還是手動）后，通過將微孔板倒置并用力敲擊在吸水紙上，去除孔中的任何殘留洗滌緩沖液和氣泡。  

6. 每孔加入100微升TMB底物。  

7. 用微孔板密封膜覆蓋微孔板，在室溫下孵育30分鐘，同時在微孔板振蕩器上以700-900轉/分鐘的速度振蕩。  

8. 每孔加入100微升終止液，并輕輕振蕩微孔板以混合內容物。在進行下一步之前，去除任何氣泡。  

9. 將微孔板放入能夠讀取450納米吸光度的微孔板讀數儀中。在加入終止液后，應立即分析微孔板，且不得超過30分鐘。

結果計算 

根據標準品構建標準曲線。將零標準品作為曲線的一部分繪制。建議使用軟件程序計算標準曲線并確定樣品的濃度。數據分析推薦使用5參數曲線擬合。  

ALPCO大鼠超敏胰島素ELISA是一種配體結合分析法，其反應與分析物濃度呈S形關系。目前接受的此類曲線參考模型使用5參數邏輯（pl）擬合，因為這種模型在整個范圍內優化了準確性和精確性。雖然立方樣條和其他方法也是可接受的，但它們通常在范圍的低端和高端顯示出較低的內部檢測準確性和精確性。  

在下面的例子中，使用了5-pl曲線擬合，以最大化低濃度樣品的準確性和精確性。然而，由于個別實驗室條件的影響，所有模型在可檢測范圍的最低端和最高端的準確性和精確性都受到限制。因此，在解釋分析物反應呈非線性時，應始終謹慎。  

不建議將樣本濃度值外推到標準曲線范圍之外。

典型標準曲線 

以下結果僅用于演示目的，不能替代通過檢測獲得的數據。每次檢測運行和每塊微孔板都必須進行標準曲線檢測。  

大鼠胰島素從ng/mL轉換為?IU/mL（微國際單位）的換算公式：  

1 ng/mL = 24.8 ?IU/mL  

1 ?IU/mL = 6.945 pmol/L

文獻參考：

1. Finlay JWA, Dillard RF. Appropriate Calibration Curve Fitting in Ligand Binding Assays. AAPS Journal. 2007; 9(2): E260-E267

ALPCO產品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉導、糖尿病和肥胖癥、內分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。

作為ALPCO在中國區域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的ALPCO產品。