ALPCO 嚙齒動物胰島素化學發光ELISA試劑盒(10板)檢測原理&步驟說明

胰島素小鼠/大鼠化學發光ELISA試劑盒用于定量檢測大鼠和小鼠血清、血漿以及細胞培養上清液中的胰島素。具體適用于以下樣本類型：大鼠血清、大鼠肝素血漿、大鼠EDTA血漿、小鼠血清、小鼠肝素血漿和細胞培養上清液。

作為ALPCO在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產品嚙齒動物胰島素化學發光ELISA試劑盒(10板)。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

嚙齒動物胰島素化學發光ELISA試劑盒(10板)檢測原理：

胰島素小鼠/大鼠化學發光ELISA是一種夾心免疫分析法。96孔微孔板用針對胰島素的單克隆抗體包被。將標準品、對照品和樣品與結合物一起加入微孔板孔中，然后在室溫下于微孔板振蕩器上以700-900轉/分鐘的速度孵育。孵育完成后，用洗滌緩沖液清洗孔并吸干。加入化學發光底物后，使用化學發光微孔板讀數儀在1分鐘后讀取結果。生成的光強度與樣品中胰島素的含量成正比。

所需材料  

- 精密移液管，用于分裝5-100微升（配一次性吸頭）  

- 重復或多通道移液管，用于分裝100微升  

- 用于試劑準備的容量瓶和移液管  

- 蒸餾水或去離子水，用于試劑準備  

- 微孔板清洗器或洗液瓶  

- 能達到700-900轉/分鐘的微孔板振蕩器  

- 帶化學發光檢測功能的微孔板讀數儀  

注意事項  

1. 本試劑盒中的人類血液制品已檢測HIV（人類免疫缺陷病毒）、HBV（乙型肝炎病毒）和HCV（丙型肝炎病毒）。這些病毒的檢測方法不能保證病毒的完全不存在，因此所有試劑應被視為潛在傳染性物質。處理和丟棄應符合所有適用的國家和地方關于潛在生物危害物質處理的規定。  

2. 所有動物源性材料均為BSE（瘋牛?。╆幮?。然而，所有材料仍應被視為潛在傳染性物質。  

3. 避免與皮膚直接接觸。  

4. 本產品不可內服。  

5. 使用本產品時，避免進食、飲水或吸煙。  

6. 不要用嘴吸取任何試劑。  

7. 本試劑盒中的試劑具有批次特異性，不得替換。  

8. 不要使用過期的試劑。  

9. 不建議更改檢測程序，否則可能影響檢測結果。  

10. 附錄中提供了用于讀取化學發光信號的儀器設置示例。每個實驗室應根據儀器制造商的說明優化儀器設置。如有疑問，請聯系微孔板讀數儀制造商的技術支持部門以獲取最佳儀器設置。

儲存條件  

試劑盒應在2-8℃下儲存。試劑盒在包裝標簽上的有效期之前是穩定的。

檢測步驟  

所有試劑和微孔板條應在使用前平衡至室溫。使用前輕輕混合所有試劑。每次檢測運行和每塊微孔板（如果一次使用多塊）都必須進行標準曲線檢測。所有標準品、對照品和樣品應雙份運行。建議的微孔板布局已提供。

1. 在打開鋁箔袋之前，應將微孔板平衡至室溫。為標準品、對照品和樣品的雙份測定準備足夠的微孔板條。剩余的微孔板條應密封在含有干燥劑的鋁箔袋中，于2-8℃保存。  

2. 將每個標準品、對照品和樣品分別加入到相應的孔中，每孔5微升（參見試劑準備和分析證書中的對照品復溶說明）。  

3. 每孔加入75微升工作濃度的結合物（參見試劑準備部分）。  

4. 用微孔板密封膜覆蓋微孔板，在室溫下孵育2小時，同時在微孔板振蕩器上以700-900轉/分鐘的速度振蕩。  

5. 倒掉孔中的內容物，用微孔板清洗器用工作濃度洗滌緩沖液（參見試劑準備部分）每孔350微升清洗微孔板6次。  

a. 或者，使用配備洗液噴頭的洗液瓶或手動清洗器將工作濃度洗滌緩沖液加入孔中（不建議使用多通道移液管。為確?？椎某浞智逑?，洗滌緩沖液必須以足夠的力量均勻分配）。浸泡孔1分鐘。將微孔板倒置以倒掉液體，并用力將倒置的微孔板在吸水紙上敲擊。重復清洗和浸泡步驟2次，總共進行3次清洗。  

最后一次清洗（無論是自動還是手動）后，通過將微孔板倒置并用力敲擊在吸水紙上，去除孔中的任何殘留洗滌緩沖液和氣泡。  

6. 每孔加入100微升工作濃度化學發光底物（參見試劑準備部分）。  

7. 將微孔板放入能夠讀取孔的化學發光信號的微孔板讀數儀中。在加入化學發光底物后1分鐘內讀取結果，且不得超過20分鐘。讀取時間為1秒。

典型標準曲線  

以下結果僅用于演示目的，不能替代通過檢測獲得的數據。每次檢測運行和每塊微孔板都必須進行標準曲線檢測。數據分析采用5參數曲線擬合，權重為1/y?。

文獻參考：

1. Finlay JWA, Dillard RF. Appropriate Calibration Curve Fitting in Ligand Binding Assays.AAPS Journal. 2007; 9(2): E260-E267.

ALPCO產品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉導、糖尿病和肥胖癥、內分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。

作為ALPCO在中國區域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的ALPCO產品。