ALPCO高靈敏度 IGFBP-6 ELISA檢測說明

IGFBP-6 ELISA用于測定人血清、血漿和細胞培養上清液樣品中的胰島素樣生長因子結合蛋白6（IGFBP-6）。僅供研究使用。不用于診斷程序。

作為ALPCO在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產品 IGFBP-6 ELISA。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

 IGFBP-6 ELISA檢測原理：

該檢測基于多克隆抗體和在真核細胞中表達的重組IGFBP-6。這是一種夾心法，利用兩種高親和力的特異性抗體。首先，樣品中的IGFBP-6與微量滴定板上的固定抗體結合。在兩步序列中，生物素偶聯的抗IGFBP-6抗體和鏈霉抗生物素蛋白過氧化物酶結合。隨后，過氧化物酶催化酶反應，導致藍色。藍色的強度取決于樣品中的分析物含量。通過加入停止溶液來停止反應，并通過測量吸光度來量化顏色強度（黃色）。

樣本類型

血清、血漿和細胞培養上清樣本可用于本試驗。研究了抗凝劑對本試劑盒中IGFBP-6測量的影響，包括相應的EDTA血漿、肝素血漿和血清樣本。平均而言，EDTA（n=10）和肝素（n=5）血漿中血清IGFBP-6的恢復率分別為102%和98%。

樣本收集

使用標準靜脈穿刺進行血液采樣。應避免溶血樣本。

所需樣本體積：10 ?L

樣本穩定性

在密封良好的樣本瓶中：

- 20-25°C儲存：最多2天

- -20°C儲存：至少1年

- 最多1次冷凍-解凍周期

在分離凝血和/或細胞成分后，建議盡快冷藏或冷凍樣本，并避免超過1次冷凍-解凍周期。隨著周期的增加，觀察到樣本依賴的信號增加。

干擾

通常應避免溶血、黃疸和脂血樣本。通過向血清樣本中添加甘油三酯、血紅蛋白或膽紅素，并測量IGFBP-6的恢復，進行了干擾測試。在100 mg/mL、5 mg/mL和200 ?g/mL的濃度下，未檢測到顯著（<30%）干擾。

樣本稀釋

- 稀釋：用稀釋緩沖液VP稀釋1:51

- 在PE/PP管中取500 ?L稀釋緩沖液VP（在較大的系列中推薦使用重復吸管）；加入10 ?L樣本（稀釋1:51）。對于雙重測定，必須在試驗中使用兩個100 ?L的樣本。

- 注意：血清和血漿樣本至少需要用稀釋緩沖液VP稀釋1:20。

- 根據預期的IGFBP-6值，樣本可以進一步稀釋在稀釋緩沖液中。

- 樣本稀釋后的穩定性：在20-25°C下最多1小時。

通過稀釋（1:5至1:640）具有不同IGFBP-6含量的天然血清（樣品1-3）來測試試劑盒的線性。圖2顯示了預期濃度和測量濃度的比較。很明顯，1:10的稀釋不足以使所有樣品呈線性。這些結果通過統計分析符合NCCLS/CLSI EP6-A 2003標準。線性要求最小稀釋度≥1:20。樣品稀釋的線性在標準曲線范圍內是可接受的。

與理論預期濃度相比，y軸上顯示了測量的IGFBP-6濃度的線性。如果稀釋度為1:20，則給出濃度高達0.5 ng/mL的線性關系。

ALPCO產品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉導、糖尿病和肥胖癥、內分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。

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