ALPCO Chemerin ELISA, 96孔檢測原理說明及注意事項

Chemerin，也稱為tazarotene誘導基因2（TIG2）或視黃酸受體響應因子2（RARRES2），是一種由163個氨基酸組成的前體蛋白，包括一個20個氨基酸的N端信號肽。不活躍的循環前體Chemerin含有六個半胱氨酸殘基，因此可能形成三個分子內二硫鍵（1）。

已在肝臟、肺、垂體、淋巴結、胃和脂肪組織中證實了前體Chemerin的表達（1, 2）。它已在血液、卵巢和肝癌患者的腹水以及關節炎患者的滑膜液中被檢測到（1）。在脾臟、淋巴結、小腸、肺組織以及巨噬細胞和未成熟樹突狀細胞中發現了不同的受體（1, 3）。

前體Chemerin通過絲氨酸或半胱氨酸蛋白酶轉化為其生物活性形式，分別產生活性蛋白的促炎或抗炎作用。Chemerin的蛋白水解裂解已由以下絲氨酸蛋白酶描述：胰蛋白酶、纖溶酶、彈性蛋白酶、組織蛋白酶G以及半胱氨酸蛋白酶組織蛋白酶S和鈣蛋白酶（4-6）。

活性蛋白參與先天和適應性免疫反應，例如作為未成熟樹突狀細胞和巨噬細胞的強效趨化因子。它通過與其特異性受體結合影響細胞內信號傳導。Chemerin的C末端結構域允許與受體ChemR23/CMKLR1結合，并通過誘導Ca2+內流和ERK1/2激活來引發促炎刺激。此外，Chemerin的N末端結構域與CCRL2受體結合，并允許將C末端結構域呈現給鄰近細胞。在前體Chemerin和半胱氨酸蛋白酶裂解的情況下，產生的肽對ChemR23/CMKLR1受體具有抑制作用，因此具有抗炎效應。

最近，發現Chemerin在脂肪生成和脂肪細胞代謝中的重要性（2, 7）。Goralski等人在小鼠中證明，Chemerin及其受體（ChemR23）在內臟和皮下脂肪組織的脂肪細胞中表達。在脂肪細胞分化過程中，表達和分泌增加。在脂肪細胞的培養基中發現了16 kDa的活性Chemerin。Chemerin還影響脂肪細胞內的信號傳導網絡，例如，已證明其刺激MAPK p42/44（ERK1/2）磷酸化。此外，作者還展示了Chemerin對脂肪細胞基因表達的后分化效應。

基于這些結果，提出了Chemerin對代謝綜合征和胰島素抵抗的影響。研究表明，Chemerin在肥胖人類的脂肪組織中表達更高，并且能夠損害肌肉細胞的胰島素敏感性以及脂肪細胞中的胰島素介導的脂肪分解和脂肪生成（8, 9）。已經表明Chemerin與炎癥標志物和代謝綜合征的成分（10, 11）以及腎功能（12）相關聯。

Chemerin ELISA用于定量測定人血清和血漿樣本中的總Chemerin。僅供研究使用。不用于診斷程序

作為ALPCO在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產品Chemerin ELISA, 96孔。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

Chemerin ELISA, 96孔檢測原理：

Chemerin ELISA是一種所謂的三明治檢測。它利用兩種針對這種蛋白質的特異性和高親和力抗體。樣品中的Chemerin與微量滴定板上固定的第一抗體結合。在接下來的步驟中，生物素化和鏈霉抗生物素蛋白過氧化物酶偶聯的第二特異性抗Chemerin抗體依次與固定的Chemerin結合。在閉合底物反應中，顏色變化是高度特異性的反應，定量取決于樣品的Chemerins水平。

警告和注意事項：

僅限研究使用。不用于診斷程序。

在開始檢測前，完整且仔細地閱讀說明書。使用隨試劑盒提供的說明書的有效版本。確保理解所有內容。

溫度會影響檢測的吸光度讀數。然而，樣本的值不會受到影響。

注意：本試劑盒包含人和/或動物來源的材料。本試劑盒提供的對照血清的人血清來源已進行檢測，結果對乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、丙型肝炎病毒（HCV）和人類免疫缺陷病毒1型和2型（HIV）抗體呈非反應性。沒有已知的檢測方法能完全保證沒有傳染性病原體的存在；因此，應將所有組分和樣本視為潛在的傳染性。

容器和未使用內容物的處置應按照聯邦和當地的監管要求進行。

必須盡可能快地進行樣本和試劑的移液，并在每個步驟中按照相同的順序進行。對每個樣本、對照和試劑使用單獨的移液槍頭，以避免交叉污染。僅對單一試劑使用儲液槽。這一點特別適用于底物儲液槽。使用儲液槽分裝之前用于偶聯液的底物溶液可能會導致溶液變色。不要把試劑倒回瓶中，因為可能會發生試劑污染。徹底混合微孔板孔內的內容物，以確保良好的測試結果。不要重復使用微孔。不要讓孔在檢測過程中變干；在完成沖洗步驟后立即添加試劑。

標準曲線：

圖1。具有3個多項式曲線擬合的標準曲線示例。

文獻參考：

1. Wittamer V, Franssen JD, Vulcano M, Mirjolet JF, Le Poul E, Migeotte I, et al. Specificrecruitment of antigen-presenting cells by chemerin, a novel processed ligand from humaninflammatory fluids. J Exp Med 2003;198:977-85.

2. Bozaoglu K, Bolton K, McMillan J, Zimmet P, Jowett J, Collier G, et al. Chemerin is a noveladipokine associated with obesity and metabolic syndrome. Endocrinology 2007;148:4687-94.

3. Roh SG, Song SH, Choi KC, Katoh K, Wittamer V, Parmentier M, Sasaki S. Chemerin--a newadipokine that modulates adipogenesis via its own receptor. Biochem Biophys Res Commun2007;362:1013-8.

ALPCO產品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉導、糖尿病和肥胖癥、內分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。

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