兔抗UTX抗體親和純化，聚焦表觀遺傳與發育調控

由艾美捷Bethyl Laboratories推出的本抗體為兔源多克隆抗體（貨號：A302-374A），特異性靶向UTX蛋白（又稱KDM6A，賴氨酸特異性去甲基化酶6A）的內部區域（第725至775位氨基酸之間）。UTX是一種含JmjC結構域和TPR重復序列的組蛋白去甲基化酶，特異性催化組蛋白H3第27位賴氨酸（H3K27）的二甲基化和三甲基化去除，從而激活基因轉錄，在胚胎后部發育和HOX基因表達調控中發揮關鍵作用。該抗體經抗原親和純化，未偶聯標記，適用于免疫沉淀（IP）和免疫印跡（WB），且與人、小鼠樣本有交叉反應性。以下將從基本參數、免疫原信息、應用條件、儲存穩定性及生物學背景等方面進行詳細說明。

一、關鍵規格參數

項目 | 詳細內容

靶標 | UTX / KDM6A (Lysine Demethylase 6A)

反應種屬 | 小鼠、人類

宿主 | 兔

克隆性 | 多克隆

抗體形式 | 完整IgG

免疫原 | 對應人UTX蛋白第725至775位氨基酸之間的表位（參考序列NP_066963.1，GeneID 7403）

亞型 | IgG

偶聯物 | 未偶聯

純化方式 | 抗原親和純化（使用固定化的UTX特異性表位）

抗原物種 | 人

濃度 | 1000 ?g/mL

緩沖液 | Tris-檸檬酸/磷酸緩沖液，pH 7~8，含0.09%疊氮鈉

儲存條件 | 2–8 °C

保質期 | 收貨后1年

生產流程 | 親和純化后，通過Beer定律測定IgG濃度（1 mg/mL IgG在A280下吸光值為1.4）

> 注：0.09%疊氮鈉作為防腐劑，在IP后WB使用HRP標記二抗時需注意其抑制作用。建議在IP洗脫或二抗孵育前充分去除疊氮鈉。

二、免疫原與特異性

本抗體的表位定位于人UTX蛋白的內部區域（第725至775位氨基酸），該區域位于TPR重復序列與JmjC結構域之間。通過固相載體上固定的特異性表位進行親和純化，確保抗體識別天然及變性的UTX。經內部驗證，該抗體可檢測人源和小鼠源UTX，且不與其同源蛋白UTY（由Y染色體編碼，在男性中表達）發生顯著交叉反應（取決于序列保守性）。實際實驗中建議以陽性對照（如HEK293或HeLa細胞裂解液）確認信號。UTX分子量約為154 kDa，在WB中呈現為清晰的高分子量條帶。

三、推薦應用與實驗條件

以下稀釋度均為起始推薦范圍，用戶需根據具體實驗體系進行優化。

1. 免疫印跡（Western Blot, WB）

稀釋度：1:10,000 – 1:25,000（超高稀釋比，顯著節約抗體用量）  

封閉液及抗體稀釋液：5%脫脂奶粉-TBST（Tris緩沖鹽水+0.1% Tween-20）  

孵育條件：一抗4°C孵育過夜（推薦）  

二抗推薦：  

常規細胞裂解液WB：使用山羊抗兔IgG（重鏈+輕鏈）抗體，如貨號A120-101P。  

免疫沉淀后WB：為避免變性IP產物中重鏈（~55 kDa）信號干擾，推薦使用抗兔IgG輕鏈特異性HRP標記二抗，并在封閉液中添加5%正常豬血清（貨號S100-020）以降低背景。  

陽性對照：HEK293、HeLa或小鼠胚胎成纖維細胞裂解液。UTX分子量較大（~154 kDa），建議使用6-8% SDS-PAGE凝膠和PVDF膜（0.45 μm孔徑），轉膜采用濕轉法（100V，2小時或30V過夜）。

2. 免疫沉淀（IP）

用量：6 ?g抗體 / mg總蛋白裂解液  

操作建議：  

裂解液推薦使用非變性裂解緩沖液（如NP-40或RIPA緩沖液，但避免SDS），以維持UTX與復合物（如COMPASS樣復合物）的相互作用。  

孵育條件：4°C旋轉孵育2小時或過夜。  

使用Protein A/G瓊脂糖或磁珠捕獲免疫復合物。  

洗脫后通過WB檢測，務必使用抗兔IgG輕鏈特異性二抗以避免重鏈干擾。  

陽性對照：過表達UTX的細胞裂解液或內源性表達較高的細胞（如HEK293、HeLa）。

> 注：本產品未驗證用于IHC或ICC-IF，用戶需自行探索。

四、產品特性與質量控制

純化工藝：采用表位特異性親和純化，較常規蛋白A/G純化具有更高的特異性，顯著降低非特異性背景。免疫原選擇在保守的TPR和JmjC之間的獨特區域，有助于區分UTX與其他JmjC家族成員（如JMJD3/KDM6B）。  

濃度與效價：濃度高達1000 ?g/mL，WB推薦稀釋比達1:10,000~1:25,000，每微升抗體可制備10-25 mL工作液，經濟性極佳，尤其適合高通量篩選或長期項目。  

功能驗證：每批抗體均通過WB檢測多種細胞裂解液中的內源性UTX（~154 kDa），確認單一條帶位置正確。同時通過IP驗證其捕獲內源性UTX及相互作用蛋白的能力。  

批次間一致性：生產記錄完整，遵循內部QC標準，符合ISO 9001質量管理體系（母公司Fortis Life Sciences）。  

優勢總結：  

WB超高稀釋比（1:25,000） → 單次實驗成本極低  

IP用量明確（6 ?g/mg裂解液） → 減少優化時間  

輕鏈專用二抗配套方案 → IP-WB無重鏈干擾  

長效穩定儲存（2-8°C） → 即用型方便  

五、儲存與穩定性

儲存溫度：2–8°C，嚴禁冷凍。反復凍融會導致抗體變性、效價下降。  

運輸條件：濕冰運輸，收貨后請立即按上述溫度保存。  

分裝建議：若需長期使用，建議分裝成小份后存放于2–8°C，避免污染。不可稀釋后長期儲存。  

有效期：自收貨之日起1年。過期產品可能信號減弱，建議重新訂購。  

六、生物學背景：UTX的功能與研究價值

UTX（KDM6A）是一種依賴JmjC結構域的組蛋白去甲基化酶，特異性去除組蛋白H3第27位賴氨酸的二甲基化（H3K27me2）和三甲基化（H3K27me3），但對單甲基化（H3K27me1）無活性。H3K27me3是多梳抑制復合物（PRC2）沉積的抑制性組蛋白標記，UTX通過去除該標記激活基因轉錄。UTX的主要功能與研究領域包括：

發育調控：UTX是后部發育的關鍵調節因子，通過調控HOX基因簇的表達影響體節分化和肢體形成。  

表觀遺傳與轉錄激活：UTX作為COMPASS樣復合物的核心組分，促進H3K4甲基化（活性標記）與H3K27去甲基化的協同作用，激活靶基因。  

腫瘤抑制與癌癥：UTX在多種癌癥（如膀胱癌、腎癌、多發性骨髓瘤）中發生功能缺失突變，作為腫瘤抑制因子發揮作用。KABUKI綜合征2型（Kabuki syndrome type 2）即由KDM6A突變引起。  

性別特異性生物學：UTX由X染色體編碼，在女性中可能逃脫X失活，其同源基因UTY位于Y染色體，兩者功能部分冗余但存在差異。  

免疫與炎癥：UTX調控Th1和Th17細胞分化，影響自身免疫疾病進程。

典型研究領域：  

表觀遺傳學與染色質調控  

發育生物學（HOX基因、體節形成）  

癌癥生物學（腫瘤抑制、耐藥性）  

X染色體失活與性別差異  

免疫細胞分化與功能