兔抗Rictor抗體親和純化，確保批次間穩定性和實驗重復性

一、產品概述

由艾美捷Bethyl Laboratories推出的Rictor抗體（貨號A300-458A）是一款針對人Rictor蛋白的兔源多克隆抗體，由美國制造，采用抗原親和純化工藝制備。該抗體以未偶聯的完整IgG形式提供，濃度為1000 ?g/ml，適用于免疫沉淀（IP）和免疫印跡（WB）實驗。

二、技術規格

參數 | 詳細信息

靶標 | Rictor

反應性 | 人

宿主 | 兔

克隆性 | 多克隆

格式 | 完整IgG

亞型 | IgG

偶聯物 | 未偶聯

純度 | 抗原親和純化

抗原物種 | 人

濃度 | 1000 ?g/ml

保存條件 | 2-8°C

有效期 | 收貨后1年

緩沖液體系：Tris-檸檬酸鹽/磷酸鹽緩沖液，pH 7-8，含0.09%疊氮化鈉作為防腐劑。

免疫原信息

該抗體識別的表位位于人Rictor蛋白第1至50位氨基酸殘基之間（編號參考TrEMBL條目Q6R327，GeneID 253260）。親和純化過程使用固相載體上固定的Rictor特異性表位進行。經嚴格驗證，該抗體在WB中可特異性識別約190 kDa的Rictor蛋白條帶，

抗體濃度通過比爾定律測定，其中1 mg/mL IgG在280 nm波長下的吸光度為1.4。

三、應用方法與實驗條件

免疫印跡（WB）

推薦稀釋比：1:2000 至 1:10000

封閉與稀釋液：5% 牛奶-TBST

一抗孵育：過夜孵育

細胞裂解物檢測：使用山羊抗兔IgG重輕鏈抗體（A120-101P）

免疫沉淀物檢測：使用抗兔IgG輕鏈HRP偶聯抗體，封閉緩沖液中需添加5%正常豬血清（貨號S100-020）

注意：使用A300-458A進行的免疫印跡會顯示額外的條帶，這些條帶在使用A300-459A時不會出現。

免疫沉淀（IP）

推薦用量：6 ?g抗體/ mg裂解物

四、產品背景信息

Rictor是mTORC2復合物的一個亞基，在響應激素信號調控細胞生長和存活中發揮關鍵作用。mTORC2可被生長因子激活，但與mTORC1不同的是，它對營養信號似乎不敏感。

功能特征

mTORC2主要定位于Rho GTPases上游，通過激活一個或多個Rho型鳥嘌呤核苷酸交換因子來調控肌動蛋白細胞骨架。該復合物能夠促進血清誘導的應力纖維或F-肌動蛋白的形成。

關鍵磷酸化調控

AKT1：mTORC2對AKT1的Ser-473位點磷酸化起關鍵作用，這可能促進PDK1對AKT1活化環上Thr-308位點的磷酸化——這是AKT1完全活化的先決條件

SGK1：調控SGK1 Ser-422位點的磷酸化

PRKCA：調節PRKCA Ser-657位點的磷酸化

別名：

AVO3、AVO3 homolog、hAVO3、PIA、pianissimo、rapamycin-insensitive companion of mTOR、TORC2-specific protein AVO3

五、使用建議

1. 儲存注意事項：收到抗體后請存放于2-8°C，避免凍存，以防反復凍融導致活性下降。

2. 防腐劑提示：緩沖液中含有疊氮化鈉，使用時應采取適當防護措施。

3. 實驗優化：對于WB實驗，建議在推薦稀釋比范圍內進行梯度測試，以獲得最佳信噪比。IP實驗中按6 ?g/mg裂解物的用量起始，可根據具體樣本類型進行優化。

4. 對照設置：由于A300-458A可能檢測到額外條帶，建議在實驗中同時使用A300-459A作為平行對照，以區分特異性信號與非特異性信號。