兔抗MCM2抗體親和純化，表位特異性富集，三平臺高信噪比驗證

產品概述

MCM2（微型染色體維持蛋白2）是DNA復制 licensing 過程中的核心組件，屬于MCM復合物（MCM2-7六聚體）的重要組成部分。本文介紹的由艾美捷Bethyl Laboratories推出的A300-191A抗體（貨號：A300-191A）是一款針對MCM2的高質量兔多克隆抗體，適用于小鼠和人類樣本的多種檢測應用。

基本規格

該抗體為兔源多克隆IgG，以完整IgG形式提供，未經偶聯修飾。免疫原對應人MCM2蛋白第1至50位氨基酸殘基區間（參考序列NP_0045117.2，GeneID 4171）。抗體經抗原親和純化，純度可靠。濃度測定采用比爾定律（1 mg/mL IgG在A280nm處吸光度為1.4），最終濃度為1000 ?g/ml。

儲存與穩定性：抗體保存于Tris-檸檬酸/磷酸緩沖液（pH 7-8），含0.09%疊氮化鈉作為防腐劑。應在2-8°C條件下儲存，自收貨之日起穩定期為1年。注意：產品生產地為美國。

推薦應用與實驗條件

1. 免疫印跡（Western Blot，WB）

稀釋比例：1:1000 至 1:10,000

實驗要點：

封閉液和抗體稀釋液均使用含5%脫脂牛奶的TBST

一抗孵育建議過夜（O/N），以獲得最佳信噪比

檢測系統選擇：

細胞裂解液樣本：推薦使用山羊抗兔IgG（重鏈+輕鏈）二抗（如A120-101P）

免疫沉淀后樣本：需使用HRP標記的抗兔IgG輕鏈特異性二抗，并在封閉緩沖液中添加5%正常豬血清（如S100-020），以避免重鏈交叉干擾

2. 免疫組織化學（IHC）

推薦稀釋比：1:2000 至 1:10,000

抗原修復：對福爾馬林固定石蠟包埋（FFPE）組織切片，強烈推薦使用pH 6.0的檸檬酸緩沖液進行熱誘導抗原修復。

3. 免疫沉淀（IP）

用量：每毫克裂解液蛋白使用6 ?g抗體

產品特性

特異性表位：抗體識別位點定位在人MCM2蛋白第1-50氨基酸區域。采用固相載體固定該特異性表位進行親和純化，確保高特異性。

反應種屬：已驗證可檢測小鼠（Mouse）和人（Human）樣本。

同種型：IgG

背景知識：MCM2的生物學功能

MCM2是微型染色體維持（MCM）復合物的關鍵亞基。MCM復合物由MCM2、MCM3、MCM4、MCM5、MCM6和MCM7六種蛋白組成異源六聚體，在DNA復制 licensing 中發揮核心作用，確保每個細胞周期中DNA僅復制一次。

具體而言，MCM2與核心復合物（MCM4/6/7）相互作用，調控其解旋酶活性。因此，MCM2的表達水平與細胞增殖狀態密切相關，常被用作細胞增殖標志物。

別名：BM28、CCNL1、cdc19、CDCL1、D3S3194、DFNA70、MITOTIN、核蛋白BM28等。

技術建議與注意事項

1. 稀釋優化：推薦的應用稀釋比為起始參考范圍，用戶應根據具體實驗體系和樣本類型進行梯度稀釋優化。

2. 疊氮化物影響：緩沖液中含有疊氮化鈉，若計劃進行細胞培養或體內實驗，需注意其細胞毒性；對于HRP偶聯檢測系統，疊氮化物會抑制HRP活性，需在二抗孵育前充分洗脫。

3. 特殊檢測需求：若需進行免疫沉淀后的Western blot檢測，務必使用輕鏈特異性二抗，以免變性的抗體重鏈（約50 kDa）與目標蛋白信號重疊。添加正常豬血清可進一步降低非特異性背景。

A300-191A是一款經過抗原親和純化的高濃度兔抗MCM2多克隆抗體，適用于WB、IHC和IP等多種應用。其識別表位位于MCM2蛋白N端1-50區域，反應種屬包括人和小鼠。實驗者應根據具體應用選擇推薦的稀釋比例和配套檢測試劑，尤其注意IP后WB需使用輕鏈特異性二抗并添加豬血清封閉，以獲得清晰、特異的檢測結果。儲存于2-8°C可穩定保存一年。