ALPCO-CHO PLBL2 ELISA試劑盒：樣本稀釋&試劑準備方案

PLBL2檢測試劑盒是一種高靈敏度的雙位點酶聯免疫吸附測定（ELISA），用于定量檢測倉鼠（CHO）細胞樣本中的磷脂酶B樣蛋白2（Phospholipase B-Like 2，PLBL2）。僅供研究使用，不得用于診斷程序。

艾美捷CHO PLBL2 ELISA試劑盒【#41-PLBL2HA-E01】檢測原理：

雙抗體夾心ELISA的原理如圖1所示。在此檢測中，樣本中的PLBL2與已吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗PLBL2抗體發生反應。經洗滌去除未結合的蛋白質后，加入檢測抗體（生物素偶聯的抗PLBL2抗體），形成復合物。洗滌后，加入辣根過氧化物酶（HRP）偶聯的鏈霉親和素，形成復合物。再經洗滌后，通過加入顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯苯胺（TMB）來測定復合物。結合的酶量與樣本中PLBL2的濃度成正比；因此，450 nm處的吸光度是測試樣本中PLBL2濃度的量度。可以通過標準曲線（由標準品構建）來估算測試樣本中PLBL2的量，并根據樣本稀釋情況進行校正。

程序限制：

僅供研究使用：不得用于診斷程序。

可靠性和重復性：當完全理解包裝說明書中的信息并遵循良好的實驗室操作規范時，可以獲得可靠和可重復的結果。可能影響檢測性能的因素包括儀器功能、玻璃器皿的清潔度、蒸餾水或去離子水的質量、試劑和樣本的移液準確性、洗滌技術以及孵育時間和溫度。不要將不同批次或來源的試劑混合或替換使用。

所需材料（未提供）：

精密移液管（2 ?L至1000 ?L），用于制備和分裝稀釋液

試管

噴壺或微孔板清洗/吸引器

蒸餾水或去離子水

能在450 nm處讀數的微孔板讀數儀

用于制備試劑和緩沖液溶液的各種玻璃器皿

用于樣本收集的離心機

用于血漿收集的抗凝劑

計時器

微孔板振蕩器

樣本稀釋：

檢測要求每個測試樣本在使用前進行稀釋。每次進行檢測時，所有樣本都應進行雙份檢測。推薦的稀釋倍數僅為建議。稀釋倍數應基于未知樣本的預期濃度，使得稀釋后的樣本落在標準曲線的動態范圍內。如果不確定樣本水平，在運行整個板之前，強烈建議對一個或兩個代表性樣本進行系列稀釋。在使用前立即稀釋樣本。

CHO培養提取樣本：推薦起始稀釋倍數為1:20。要制備樣本的1:20稀釋液，將15 ?L樣本轉移至285 ?L的1X稀釋液中。充分混合。

試劑準備：

恢復至室溫：使用前將所有試劑恢復至室溫（16℃至25℃）。

稀釋液：直接使用。

洗滌液濃縮液：提供的洗滌液為20X濃縮液，需用蒸餾水或去離子水稀釋1:20（1份濃縮液，19份水）。當儲存溫度較低時，濃縮液中可能會出現結晶。在稀釋前將濃縮液加熱至30-35℃可以溶解結晶。

檢測抗體：根據每條微孔板檢測條的需求，將10 ?L檢測抗體加入990 ?L 1X稀釋液中，制備工作液。使用前立即稀釋，避免光照。均勻混合，但動作要輕柔，避免起泡。

HRP-鏈霉親和素：根據每條微孔板檢測條的需求，將10 ?L HRP-鏈霉親和素加入990 ?L 1X稀釋液中，制備工作液。使用前立即稀釋，避免光照。均勻混合，但動作要輕柔，避免起泡。

預包被ELISA微孔板：直接使用。打開鋁箔袋，取出微孔板。將不用于檢測的檢測條和孔放回袋中，并與干燥劑一起重新密封。

倉鼠（CHO）PLBL2校準品：根據批次特定的分析證書進行準備。