ALPCO-CHO MMP-19 ELISA試劑盒：操作簡便，結果可靠

MMP-19檢測試劑盒是一種高靈敏度的雙位點酶聯免疫吸附測定（ELISA），用于定量檢測倉鼠（CHO）細胞樣本中的基質金屬蛋白酶19（Matrix Metalloproteinase 19，MMP-19）。僅供研究使用，不得用于診斷程序。

艾美捷CHO MMP-19 ELISA試劑盒【#41-M19HA-E01】檢測原理：

雙抗體夾心ELISA的原理如圖1所示。在此檢測中，樣本中的MMP-19與已吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗MMP-19抗體發生反應。經洗滌去除未結合的蛋白質后，加入檢測抗體（生物素偶聯的抗MMP-19抗體），形成復合物。洗滌后，加入辣根過氧化物酶（HRP）偶聯的鏈霉親和素，形成復合物。再經洗滌后，通過加入顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯苯胺（TMB）來測定復合物。結合的酶量與樣本中MMP-19的濃度成正比；因此，450 nm處的吸光度是測試樣本中MMP-19濃度的量度。可以通過標準曲線（由標準品構建）來估算測試樣本中MMP-19的量，并根據樣本稀釋情況進行校正。

程序限制：

僅供研究使用：不得用于診斷程序。

可靠性和重復性：當完全理解包裝說明書中的信息并遵循良好的實驗室操作規范時，可以獲得可靠和可重復的結果?？赡苡绊憴z測性能的因素包括儀器功能、玻璃器皿的清潔度、蒸餾水或去離子水的質量、試劑和樣本的移液準確性、洗滌技術以及孵育時間和溫度。不要將不同批次或來源的試劑混合或替換使用。

所需材料（未提供）：

精密移液管（2 ?L至1000 ?L），用于制備和分裝稀釋液

試管

噴壺或微孔板清洗/吸引器

蒸餾水或去離子水

能在450 nm處讀數的微孔板讀數儀

用于制備試劑和緩沖液溶液的各種玻璃器皿

用于樣本收集的離心機

用于血漿收集的抗凝劑

計時器

微孔板振蕩器

樣本采集與處理：

所有生物材料應被視為潛在危險品。在處理和丟棄時應遵循通用預防措施。

已知干擾物質：濃度高于0.1%的疊氮化物和硫柳汞會抑制酶反應。

樣本稀釋：

檢測要求每個測試樣本在使用前進行稀釋。每次進行檢測時，所有樣本都應進行雙份檢測。推薦的稀釋倍數僅為建議。稀釋倍數應基于未知樣本的預期濃度，使得稀釋后的樣本落在標準曲線的動態范圍內。如果不確定樣本水平，在運行整個板之前，強烈建議對一個或兩個代表性樣本進行系列稀釋。

CHO培養上清液或提取樣本：推薦起始稀釋倍數為1:80。要制備樣本的1:80稀釋液，將5 ?L樣本轉移至395 ?L的1X稀釋液中。充分混合。

結果計算：

從所有孔的測試值中減去平均背景值（標準零的平均吸光度讀數）。

對每個標準品的重復讀數取平均值，并使用結果構建標準曲線。通過使用能夠生成四參數邏輯曲線擬合的計算機軟件來處理數據，構建標準曲線。也可以使用二階多項式（二次）或其他曲線擬合；然而，它們將提供數據的擬合精度較低。

從標準曲線上估算測試樣本值。根據稀釋因子進行校正，以得出原始樣本中MMP-19的濃度。