胰彈性蛋白酶ELISA使用方案及注意事項說明

胰腺彈性蛋白酶ELISA用于定量測定胰腺人體糞便樣本中的彈性蛋白酶。在美國境內用于體外診斷美國和加拿大作為診斷胰腺外分泌功能不全的輔助工具。

艾美捷胰彈性蛋白酶ELISA（30-PANHU-E01）檢測原理：

該ELISA用于定量測定糞便中的胰蛋白酶。在第1次孵育步驟中，樣品中的胰蛋白酶與固定在微孔板表面的單克隆抗體結合。為了去除所有未結合的物質，進行洗滌步驟。在第二次孵育步驟中，加入一種過氧化物酶標記的結合物（小鼠抗胰蛋白酶抗體），該結合物特異性識別已結合的胰蛋白酶。經過另一次洗滌步驟以去除所有未結合的物質后，固相與底物四甲基聯苯胺（TMB）孵育，TMB與過氧化物酶反應。隨后加入酸性終止液以停止反應。顏色由藍色變為黃色。黃色的強度與胰蛋白酶的濃度成正比。通過使用標準品獲得的值生成吸光度單位（在450 nm處的光密度，OD）與濃度的劑量反應曲線。

供應的材料：

需要但未提供的材材料：

? 用于分發高達1000 ?L的精密移液器（帶一次性吸頭）

? 用于分發高達1000 ?L的可重復或多通道移液器

? 用于試劑準備的量筒和移液器

? 用于試劑準備的蒸餾水/去離子水

? 微孔板洗滌器或洗滌瓶

? 能夠以550轉/分鐘、2毫米軌道的微孔板振蕩器

? 微孔板讀取器

? 用于樣品準備的漩渦混合器

? 覆蓋微孔板的箔片

? 計時器

胰彈性蛋白酶ELISA注意事項：

1. 試劑盒組分中使用的人源材料經過檢測，結果為人類免疫缺陷病毒（HIV）、乙型肝炎病毒（HBV）和丙型肝炎病毒（HCV）陰性。然而，出于安全原因，所有試劑盒組分應被視為潛在的傳染性物質。

2. 試劑盒中的試劑含有作為防腐劑的疊氮鈉或ProClin。疊氮鈉或ProClin對健康和環境有害。酶促顏色反應的底物也可能引起皮膚和/或呼吸道刺激。必須避免與這些物質接觸?？稍贏LPCO應要求提供的安全數據表中找到進一步的安全信息。

3. 終止液由稀釋后的硫酸組成，是一種強酸。盡管已經稀釋，但仍需謹慎處理。它可能導致灼傷，應戴手套、眼睛保護和適當的防護服操作。任何溢出應立即用大量水擦拭。不要吸入蒸汽，避免吸入。

4. 10倍濃縮洗滌緩沖液含有表面活性劑，如果接觸到眼睛，可能會引起嚴重的眼部刺激。

警告：引起嚴重的眼部刺激

如果進入眼睛：用水小心沖洗幾分鐘。如果可能且容易的話，取出隱形眼鏡。繼續沖洗。如果眼部刺激持續，請尋求醫療建議/關注。

5. 避免與皮膚直接接觸。

6. 本產品不可內服。使用本產品時，避免吃東西、喝水或吸煙。不要使用嘴部移液任何試劑。

9. 此試劑盒中的試劑是批次特定的，不得替換。

10. 不要使用試劑盒標簽上標明的過期日期之后的試劑。

11. 不建議對測試程序進行變更，可能會影響測試結果。

儲存條件：

試劑盒應儲存在2-8°C。如果儲存得當，試劑盒在盒子標簽上的過期日期前是穩定的。

胰彈性蛋白酶ELISA試劑準備：

所有試劑在使用前必須平衡至室溫。只準備足夠使用的條數的試劑。體積小于100 μL的試劑在使用前應離心，以避免體積損失。

控制品（1級和2級）和標準品以凍干形式提供，并在標簽上標明的有效期內，在2-8°C下是穩定的。重懸細節在特定批次的數據表中給出。重懸后的標準品和控制品不穩定，無法儲存。

洗滌緩沖液濃縮液（10倍）在使用前必須用蒸餾或去離子水1:10稀釋（100 mL 洗滌緩沖液 + 900 mL 蒸餾/去離子水），并混合均勻。由于濃縮液中鹽濃度高，可能會有晶體出現。在使用前，晶體必須在室溫或37°C水浴中重新溶解。洗滌緩沖液在標簽上標明的有效期內在2-8°C下是穩定的。1倍工作洗滌液（1:10稀釋的洗滌緩沖液）可以在2-8°C下儲存在封閉的燒瓶中，有效期為1個月。

提取緩沖液濃縮液（2.5倍）在使用前必須用蒸餾或去離子水1:2.5稀釋（100 mL 提取緩沖液 + 150 mL 蒸餾/去離子水），混合均勻。由于濃縮液中鹽濃度高，可能會有晶體出現。在使用前，晶體必須在37°C水浴中重新溶解。提取緩沖液在標簽上標明的有效期內在2-8°C下是穩定的。1倍工作提取緩沖液（1:2.5稀釋）可以在2-8°C下儲存在封閉的燒瓶中，有效期為4個月。

結合物濃縮液（101倍）必須在1倍工作洗滌液中1:101稀釋（100 ?L 結合物濃縮液 + 10 mL 1倍工作洗滌液）。如果運行半板，準備8 mL的結合物（80 ?L + 8 mL 1倍工作洗滌液）。結合物在標簽上標明的有效期內在2-8°C下是穩定的。制備好的結合物（1:101稀釋的結合物）不穩定，無法儲存。

所有其他測試試劑都可以直接使用。當儲存在2-8°C時，測試試劑在標簽上標明的有效期內是穩定的。