皮質酮(小鼠/大鼠)ELISA使用說明&文獻參考

皮質酮是由腎上腺皮質在垂體激素ACTH的控制下通過負反饋機制分泌的。由于缺乏酶C17-羥化酶，它在大鼠中是循環中最多的類固醇，因為嚙齒動物無法合成人類主要的糖皮質激素——皮質醇。

皮質酮在嚙齒動物中具有廣泛的活性。它調節碳水化合物、蛋白質和脂肪的代謝。它還對造血系統有影響，并且會減少淋巴細胞和嗜酸性粒細胞的總數，但程度小于皮質醇。與皮質醇相比，皮質酮的抗炎活性非常小。

夜行性動物如大鼠的皮質酮水平表現出明顯的晝夜變化，在一天的后半部分達到峰值，隨后在早晨降至最低點（1），并且被認為在睡眠-覺醒周期中起重要作用（2）。這與白天活動的哺乳動物相反，在它們身上，糖皮質激素的峰值濃度出現在早晨。已經觀察到，在基礎和壓力條件下，與雄性大鼠相比，雌性大鼠的皮質酮釋放增加（6）。

測定大鼠體內的皮質酮對于進行神經生理學研究的設施、學術機構以及擁有藥物研究部門的制藥公司都有興趣。影響內分泌系統的藥物可以增加或減少腎上腺皮質的皮質類固醇產量。因此，大鼠血清中的皮質酮是潛在治療劑副作用的理想指標。在大鼠身上看到的同樣的效果通常也在人類身上看到。大鼠的血漿皮質酮通常與ACTH測量一起用作壓力指標（3,4）。慢性壓力對下丘腦-垂體-腎上腺皮質系統功能的影響是年齡依賴的。最近的研究表明，衰老增加了大腦中皮質酮的基礎水平，但并沒有增加壓力誘導的水平（5）。

小鼠/大鼠皮質酮ELISA是一種競爭性免疫測定方法，用于定量小鼠和大鼠血清或血漿中皮質酮的測定。僅供研究使用。不是為了用于診斷程序

艾美捷皮質酮（小鼠/大鼠）ELISA（ALP-55-CORMS-E01）檢測原理：

小鼠/大鼠皮質酮ELISA試劑盒是一種固相酶聯免疫吸附試驗（ELISA），基于競爭性結合原理。未知量的皮質酮樣品中存在一定量的與辣根結合的皮質酮過氧化物酶競爭皮質酮抗血清的結合位點微孔板。在搖床上孵育后，將微孔板洗滌四次。添加后底物溶液皮質酮的濃度與光學測量密度。

提供的試劑：

1. 微孔板

12 x 8（可拆分）條，共96孔；孔涂有兔抗皮質酮多克隆抗體。

2. 校準品0

1瓶，0.3 mL，即用型。

3. 校準品（校準品1-5）

5瓶，每瓶0.3 mL，即用型；濃度：15, 50, 185, 640, 2250 ng/mL。

 孵育緩沖液

4. 1瓶11 mL，即用型。

5. 酶結合物

1瓶，7 mL，即用型；皮質酮與辣根過氧化物酶結合。

6. 底物溶液

1瓶，22 mL，即用型；

含有四甲基聯苯胺（TMB）和過氧化氫的緩沖基質。

7. 終止液

1瓶，7 mL，即用型；含有2N鹽酸溶液。

8. 洗滌液

1瓶，50 mL（10倍濃縮）；參見“試劑的準備”。

需要但未提供的材材料

? 離心機

? 能夠進行450 nm終點測量的微孔板讀取器

? 轉速超過600 rpm的微孔板混合器

? 漩渦混合器

? 校準的可變精度微量移液器（10 ?L, 50 ?L, 100 ?L, 200 ?L, 1000 ?L）

? 吸水紙

? 蒸餾水或去離子水

? 計時器

? 半對數圖表紙或用于數據整理的軟件

試劑準備

使用前所有試劑應處于室溫。

洗滌液：將50 mL的10倍濃縮洗滌液用450 mL去離子水稀釋至最終體積500 mL。

稀釋后的洗滌液在室溫下至少穩定3個月。

儲存條件

在2°C至8°C下儲存，未開封的試劑可保持穩定直至過期日期。不要使用超過該日期的試劑。開封后的試劑必須儲存在2°C至8°C。首次開封后，如果使用和儲存得當，試劑可穩定30天。微孔板必須儲存在2°C至8°C。確保鋁箔袋密封嚴實。

典型校準器曲線示例：

以下數據僅用于說明，不應用于計算以下結果

皮質酮（小鼠/大鼠）ELISA文獻參考：

1. D?Agostino J, Vaeth GF & Henning SJ (1982): Diurnal rhythm of total and free concentration of serum corticosterone in the rat. Acta Endocrinologica 100, Vol. 1, 85-90.

2. Vázquez-Palacios G et al. (2001): Further definition of the effect of corticosterone on the sleep-wake pattern in the male rat. Pharmacol. Biochem. Behav. 70: 305-310.

3. De Souza EB & van Loon GR (1982): Stress induced inhibition of the plasma corticosterone response to a subsequent stress in the rat: A nonadrenocorticotropinmediated mechanism. Endocrinology 110, 1: 23-33.

4. Kant GJ, Leu JR, Anderson SM & Mougey EH (1987): Effects of chronic stress on plasma corticosterone, ACTH and prolactin. Physiology & Behaviour 40, 6: 775-779.

5. Garrido P, de Blas M, Del Arco A, Segovia G & Mora F (2010): Aging increases basal but not stress-induced levels of corticosterone in the brain of the awake rat. Neurobiol Aging.2010 Apr 21.

6. Handa RJ, Burgess LH, Kerr JE, O'Keefe JA (1994): Gonadal Steroid Hormone Receptors and Sex Differences in the Hypothalamo-Pituitary-Adrenal Axis. Hormon. Behav. 28 (4):464-76.