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Lectenz:SiaFind Pan-Specific Lectenz Kit

發布者:艾美捷科技    發布時間:2024-09-06     
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胰腺導管腺癌(PDAC)是一種極具侵襲性的癌癥,5年生存率僅為約11%。其預后差的主要原因是晚期診斷和有限的治療選擇。

盡管免疫檢查點阻斷(ICB)等免疫療法在多種癌癥中提高了患者生存率,但在PDAC中效果不佳,主要由于低突變負荷和多種免疫抑制機制。

CAF是PDAC腫瘤微環境(TME)中的關鍵成分,占總腫瘤質量的比例高達80%,并富含細胞外基質和特殊結締組織細胞。CAF通過分泌多種因子和細胞間相互作用,對免疫系統產生顯著影響。 唾液酸是一種糖鏈修飾,通過Siglec受體在免疫細胞上發揮免疫檢查點作用。唾液酸的過表達與多種癌癥的免疫逃避相關。

Kelly等人就CAF通過唾液酸-Siglec相互作用調節巨噬細胞分化的機制發表了在線研究《Pancreatic cancer-associated fibroblasts modulate macrophage differentiation via sialic acid-Siglec interactions》

Siglec.png

方法

實驗材料與方法

細胞系:文章使用了多種CAF細胞系(如M1CAF、T1CAF、PS-1CAF)和腫瘤細胞系(如BxPC3、MiaPaca-2)。

免疫組織化學(IHC):利用Lectenz品牌的唾液酸特異性探針(pan-Lectenz)對PDAC患者組織樣本進行染色,以檢測唾液酸表達。

流式細胞術:使用Lectenz探針及多種Siglec-Fc融合蛋白,分析CAF細胞系和腫瘤細胞系上唾液酸的表達及其與Siglec受體的相互作用。

共培養實驗:將CAF細胞系與單核細胞共培養,觀察單核細胞向巨噬細胞的分化情況。

基因敲除與抑制實驗:利用CRISPR-Cas9技術敲除特定基因(如CMAS、ST3GAL4、Siglec-9),或使用唾液酸轉移酶抑制劑(SI),研究唾液酸在CAF介導的免疫調節中的作用。


實驗

唾液酸在CAF中的表達與功能

組織染色:通過IHC染色發現,PDAC組織中CAF區域的唾液酸表達顯著高于腫瘤細胞區域。

轉錄組分析:利用公共數據庫和單細胞RNA測序(scRNA-Seq)數據,發現CAF高表達與唾液酸合成相關的基因,特別是ST3GAL4酶。

功能驗證:通過抑制CAF上的唾液酸合成(使用SI或CMAS敲除),發現唾液酸在CAF介導的巨噬細胞分化中起關鍵作用。

 

CAF與巨噬細胞的相互作用

共培養實驗:CAF細胞系與單核細胞共培養后,單核細胞顯著分化為具有免疫抑制功能的TAM樣巨噬細胞。

Siglec受體作用:發現CAF上的唾液酸作為配體,與巨噬細胞上的Siglec-7、Siglec-9、Siglec-10和Siglec-15受體相互作用,促進巨噬細胞的免疫抑制分化。

關鍵酶的作用:通過敲除CAF中的ST3GAL4酶或巨噬細胞中的Siglec-9受體,進一步驗證了唾液酸-Siglec軸在CAF介導的巨噬細胞分化中的核心作用。


在本研究中,Lectenz品牌產品起到了關鍵性作用

特異性染色:Lectenz品牌的SiaFind Pan-Specific Lectenz Kit(SK0501)被用于檢測PDAC患者組織樣本中的唾液酸表達,顯示出在CAF區域的高表達水平,這為后續實驗提供了關鍵線索。

流式細胞術分析:在流式細胞術中,Lectenz探針也被用于檢測CAF細胞系和腫瘤細胞系表面唾液酸的表達情況,以及這些細胞與Siglec受體的相互作用,為理解CAF的免疫調節機制提供了有力工具。

 

結論

CAF唾液酸在免疫調節中的關鍵作用

唾液酸表達差異:CAF區域唾液酸表達顯著高于腫瘤細胞,且CAF上的唾液酸主要作為Siglec-7、Siglec-9、Siglec-10和Siglec-15的配體。

巨噬細胞分化調控:CAF通過唾液酸-Siglec相互作用,顯著促進單核細胞向具有免疫抑制功能的TAM樣巨噬細胞分化。

治療潛力:針對CAF唾液酸的靶向治療可能成為一種新的免疫療法策略,用于改善PDAC患者的治療效果。


Lectenz品牌產品的價值

精準檢測:Lectenz品牌的唾液酸特異性探針為精準檢測組織樣本和細胞系中的唾液酸表達提供了可靠工具。

科學研究支持:在流式細胞術和IHC實驗中,Lectenz探針的高特異性和靈敏度對于深入理解CAF的免疫調節機制至關重要。

臨床應用潛力:基于Lectenz探針的研究結果,未來可能開發出針對唾液酸-Siglec軸的靶向治療藥物,為PDAC患者帶來新的治療希望。


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