PBL assay：人 IFN-α全亞型ELISA試劑盒、人IFN-β ELISA試劑盒

研究背景與目的：

背景：以往關于流感生物標志物的研究主要集中在有限的標志物子集上，且很少有研究同時考察I型和II型干擾素（IFNs）濃度與其他下游生物標志物或炎性細胞因子的關系。

目的：開發能夠區分病毒感染與其他感染，甚至可能區分不同病毒的生物標志物組合。

研究方法：

樣本來源：流感捐贈者和健康捐贈者的血清樣本來自BioIVT和BioChemed，均獲得IRB批準用于生物標志物研究。

測量方法：使用多種免疫測定方法，包括單重ELISA、基于板的化學發光多重測定法和電化學發光多重測定法，測量了包括IFN-α、IFN-β、IFN-ω、IFN-γ等在內的多種干擾素和生物標志物。

其中，該研究使用了PBL assay的以下產品： 人 IFN-α全亞型ELISA試劑盒（Human IFN-Alpha All Subtype ELISA Kit, High Sensitivity (Serum, Plasma, TCM), PBL-41115-1）、人IFN-β ELISA試劑盒（Human IFN-Beta ELISA Kit, High Sensitivity (Serum, Plasma, TCM), PBL-41415-1）、Human IFN 9-Plex ELISA kit (PBL-51500-1,已停產) 。

統計分析：

捐贈者類別（健康和流感）基于臨床診斷的疾病狀態確定。樣本中，如果某標志物濃度低于給定測定的分析靈敏度，則根據制造商的檢測限聲明分配一個校正值。通過Mann-Whitney U檢驗比較分層組之間的生物標志物群體。在Spearman條件下比較流感隊列中不同生物標志物分布之間的相關性，并排除在相應測定中呈現雙陰性結果的樣本。所有統計分析中，均設定α值為0.05以界定統計顯著性。

研究解釋：

在流感發病期間，I型和II型干擾素（IFN-α、β、γ和ω）的上調普遍存在且高度相關。CXCL-10、TNF-α、IL-10和新蝶呤水平與綜合干擾素評分（IFN Score）呈正相關趨勢。更大的流感隊列可以提供更多關于臨床生物標志物相互作用和疾病顯著性的解釋。

研究結果：

干擾素表達：在流感患者血清中，I型和II型干擾素（IFN-α、IFN-β、IFN-γ、IFN-ω）的表達普遍上調且高度相關。

其他生物標志物：CXCL-10、TNF-α、IL-10和Neopterin水平與綜合干擾素評分（IFN Score）呈正相關趨勢。

健康對照組：在健康捐贈者中，幾乎檢測不到IFN-α、IFN-β或IFN-ω。

結論：

· 在流感患者血清中，IFN-α和IFN-ω高度相關。

· CXCL-10與流感中的IFN評分高度相關。

· 在健康捐贈者中幾乎檢測不到IFN-α、IFN-β或IFN-ω。

· 更大、信息更完整的患者隊列應提供更可靠的結果。

· 初步的小型研究顯示，乙型肝炎和丙型肝炎捐贈者中未檢測到I型IFN。急性與慢性病毒感染之間的差異？

健康與流感捐贈者人口統計學信息：

· 健康捐贈者（n=64），男性25人（39.1%），女性39人（60.9%），平均年齡39.0±14.1歲。

· 流感捐贈者（n=38），男性16人（42.1%），女性22人（57.9%），平均年齡43.3±15.9歲。

表1. 健康人群和流感人群的人口統計數據。

 表2. 群體間的生物標記、統計和可讀性指標。

圖1：散點圖概述了健康（灰色，n=64）和流感（紅色，n=38）隊列中個體生物標志物水平的中位數和四分位數范圍。

圖2：流感（“流感”）患者生物標志物分層在健康人群切點（第95百分位）以上（藍色）或以下（紅色）水平的熱圖可視化。

圖3：流感隊列的Spearman相關指標。（A-C）所選生物標志物或IFN評分的個體散點圖和解析p值相關性。(D)配對生物標志物之間的Spearman R值。在斯皮爾曼分析中，顯示雙重陰性反應的樣品被省略。

研究意義：

臨床應用：該研究為開發用于區分病毒感染與其他感染或不同病毒感染的生物標志物組合提供了初步數據支持。

未來方向：更大的流感隊列和更完整的患者信息將提供更可靠的結果，并為進一步研究急性與慢性病毒感染之間的差異提供基礎。

研究限制：

樣本量：當前研究樣本量相對較小，可能影響結果的普適性和可靠性。

后續驗證：需要更大規模的研究來驗證當前發現，并探索其他潛在的生物標志物。

參考文獻：

1. Llibre et al. Front. Cell Infect. Microbiol. 2019 Aug 22; 9:296. Alpha and Beta in Flu.

2. Pizzini et al. Influenza Other Respir. Viruses. 2019 Sep 6. Neopterin in Flu.

3. Hoffmann et al. Sci. Rep. 2016 Dec 6; 6:38532. IP-10, IFN-γ in Flu and Pneumonia.