泛素-蛋白酶系統

泛素-蛋白酶體系統(ubiquitin-proteasome system, UPS)是細胞內蛋白質降解的主要途徑，參與細胞內80%以上蛋白質的降解。泛素-蛋白酶體系統降解蛋白的途徑包括兩個主要階段。第一階段為泛素與蛋白底物的相互作用，第二階段為蛋白酶體對底物的降解。

一、泛素-蛋白酶體系統

泛素-蛋白酶體系統由以下幾個組分構成：①泛素，②泛素活化酶E1，③泛素結合酶E2，④泛素連接酶E3，⑤蛋白酶體（2.5MDa）

二、雙泛素底物

泛素-蛋白酶體（ubiquitin-proteasome system，UPS）途徑介導的蛋白降解是機體調節細胞內蛋白水平與功能的一個重要機制。負責執行這個調控過程的組成成分包括泛素及其啟動酶系統和蛋白酶體系統。泛素啟動酶系統負責活化泛素，并將其結合到待降解的蛋白上，形成靶蛋白多聚泛素鏈，即泛素化。蛋白酶體系統可以識別已泛素化的蛋白并將其降解。此外，細胞內還有另一類形成反向調節的解離泛素鏈分子的蛋白酶——去泛素化酶(Deubiquitinase，DUB)。

三、全泛素及多聚泛素鏈

根據蛋白底物所添加泛素分子數目的不同，泛素化修飾分為單泛素化修飾和多泛素化修飾。為您提供針對各種位點突變以及帶有不同標記的泛素重組蛋白：

四、去泛素化酶(DUB)

去泛素化酶是一類數量很大的蛋白酶家族，人類基因組編碼大約100個去泛素化酶，主要分為五個家族，分別是泛素羧基末端水解酶（UCH）家族，泛素特異性蛋白酶（USP/UBP）家族，Otubaim（OTU）家族，Josephin結構域蛋白家族及JAMM家族。

五、分離富集泛素化蛋白

基于UBD對泛素的高親和力，泛素研究專家LifeSensors已開發出利用串聯泛素結合實體（Tandem Ubiquitin Binding Entities，TUBE）從細胞和組織裂解液中特異性分離富集泛素化蛋白的技術。TUBEs由多個UBDs串聯構成，對泛素鏈親和性極高，而且，TUBEs通過與泛素鏈的結合可以保護蛋白質不被去泛素化，同時避免靶蛋白發生蛋白酶體介導的降解，為研究泛素化蛋白質組學提供了很好的工具。

六、如何判斷蛋白是否泛素化? 是哪種類型的泛素化修飾？

UbiTest檢測原理：先通過TUBEs富集純化樣本中的泛素化總蛋白，隨后，將分離到的泛素化蛋白經或者不經去泛素化酶DUBs處理，（+）/（-）DUBs處理的蛋白樣本用靶蛋白的特異性抗體進行免疫印跡（WB）分析，通過條帶比對分析實現對泛素化蛋白的定性及半定量檢測。