TECHNICAL COLUMN
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今天我們安利二個實用的miRNA的在線數據庫以及重點介紹如何通過篩選到的靶基因或者hub基因搜索與之相關的miRNAs。
1,安利數據庫miRTarBase v8.0
當我們需要尋找miRNA時推薦使用數據庫miRTarBase v8.0非常便捷的網站(圖1)。點擊download,即可跳轉到下載頁面(圖2),可以下載經過實驗驗證的或者文獻提及存在共表達的miRNA與靶基因互作數據,這里的數據是按照物種統計的。

圖1. miRTarBase主頁

圖2. miRTarBase下載頁面
點擊圖1的Statistics,還會跳轉到數據統計頁面,不得不說,這個數據庫納入的還是非常全的,有人、小鼠、大鼠還有其他物種的;使用熒光素酶檢測的、芯片檢測的、測序檢測的還有CLIP-seq檢測的,都有(圖3)。

圖3. miRTarBase v8.0數據統計頁面
點擊圖1中的Search,即可跳轉到檢索頁面。另外該數據庫還是可以基于實驗結果進行批量檢索(圖4)。

圖4. miRTarBase v8.0數據批量檢索
之后,就可以去構建miRNAs-hub genes網絡圖了。
2、安利miRWalk 3.0
另外一個比較友好的在線數據庫叫miRWalk 3.0,它是一個很便捷的檢索網站(圖5)。中間有一個檢索框,可以根據實驗的相關種屬進行接下來的檢索。比如檢索基因名稱XBP1,只需在Gene之后的搜索框輸入XBP1即可,就會跳轉到相關頁面(圖6)。同樣地,輸入miRNA名稱也會跳轉到相關頁面(圖7)。

圖5. miRWalk 3.0網站頁面

圖6. miRWalk 3.0網站檢索基因名稱跳轉頁面

圖7. miRWalk 3.0網站檢索miRNA名稱跳轉頁面
在圖5中,下半部分還有一個Target Mining,后兩個不用看,造成的假陽性太大,只看前兩個。這個可以進行批量上傳miRNA和基因名稱,從而可以批量獲得二者結合數據。值得注意的是,每個miRNA和基因名稱必須準確,而且每行一個(圖8、圖9)。

圖8. miRNA數據挖掘批量上傳頁面

圖9. 基因名稱數據挖掘批量上傳頁面
這些數據都是可以下載,然后Excel打開的。打開之后,就可以去構建miRNAs-hub genes網絡圖了。如何去構建網絡圖,可以使用Cytoscape進行圖片繪制。
3、使用Cytoscape構建miRNA-hub基因網絡圖
接下來,我們介紹一下如何使用Cytoscape構建miRNA-hub基因網絡圖。首先得有一個關于miRNA與靶基因相關聯的表格文件以及該miRNA與靶基因的屬性的表格文件,如下圖所示:

之后就可以使用Cytoscape進行miRNA-hub基因網絡圖繪制了。將上述兩個表格分別導入Cytos cape即可。

軟件會根據導入的屬性表格文件信息判定哪一個是miRNA,哪一個是靶基因,所以只需要在左側的style中將二者修改為不同的格式,然后導出圖片就可以啦。即如下圖所示,將顏色和形狀根據attribute進行修改,修改完成的圖片導出就行,另外導出時候像素一定要選擇最大像素,這樣可以防止組圖時候因圖片像素問題還得返工。

看完教程miRNA-hub基因網絡圖的構建是不是簡單易上手,還不趕緊實操起來吧。需要軟件歡迎留言給我們哦~
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