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流式細胞術—射流系統/前向和側向散射光的檢測

發布者:艾美捷科技    發布時間:2021-05-08     
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一、流式細胞儀:射流系統


Jet-System.png


懸浮緩沖液中被染色細胞樣品通過流式細胞儀時,由于鞘液的作用,細胞被限制在液流的軸線上,從而能通過一個非常小的噴嘴。這種微小 的“流液束”使細胞一個接一個地通過激光。細胞/顆粒通過通道時所散射的光線將被多個檢測器檢測到。其中光柱前有一個檢測器,稱為前 向散射 (Forward Scatter,或簡稱 FS),而光柱的旁邊則有幾個檢測器,稱為側向散射 (Side Scatter,或簡稱 SS)。熒光檢測器是用作檢測 由陽性染色的細胞/顆粒散發的熒光。


二、流式細胞儀:前向和側向散射光的檢測


顆粒/細胞通過光束時使光線散射,并通過前向散射 (FS) 和側向散射 (SS) 而被檢測到。散射光和熒光會被檢測并一并分析。其中前向散射與 細胞大小有關,而側向散射則取決于顆粒/細胞的密度(即胞漿顆粒數量、細胞膜尺寸)。因此,透過這種方式,根據細胞大小和密度通???把不同細胞群區分開。


細胞散射的光線方向與以下有關:


細胞大?。ㄇ跋蛏⑸洌籉S)

粒度(側向散射;SS)


下圖顯示綠色激光照射細胞時的光散射模式:


Light scattering.png


此技術的一個有用的例子是使用流式細胞儀分析血液樣本。


側向散射和前向散射數值都很高的龐大細胞群屬較大和較高粒度的粒細胞。


單核細胞屬形狀較大的細胞,但粒度較低,因此其細胞群的前向散射數值高而側向散射數值低。


前向散射較低的獨立細胞群屬較小的淋巴細胞和淋巴母細胞。它們不是粒狀細胞,因此側向散射也較低。


因此,這些細胞可以根據其前向散射和側向散射分成不同的細胞群。


Forward angle light scattering.png


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