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活性氧(ROS)是生物有氧代謝過程中的副產品,包括氧離子,過氧化物和含氧自由基等。今天給大家整理了一批活性氧檢測工具,有同時檢測總的活性氧成分和單獨檢測某一種成分的試劑盒和探針,一起來瞧瞧吧,總有一款適合你的。
首先給大家介紹一款檢測總ROS檢測工具,總ROS檢測試劑/試劑盒可以檢測活細胞中總的ROS,它與ROS反應時,會產生熒光,這款試劑盒有多種規格、顏色,可適用于多種儀器:
| 產品名稱 | 貨號 | 規格 | Ex/Em(nm) | 適用儀器 |
| Cell Meter 熒光法胞內總ROS檢測試劑盒 | 22900 | 200 Tests | 492/520 | 熒光顯微鏡/熒光酶標儀 |
| 22901 | 200 Tests | 520/605 | 熒光顯微鏡/熒光酶標儀 | |
| 22903 | 200 Tests | 658/675 | 熒光顯微鏡/流式細胞儀 | |
| 22904 | 100 Tests | 490/520 | 流式細胞儀 | |
| 探針 | 16050 | 1 mg | 498/517 | |
| 16051 | 1 mg | 498/517 | ||
| 16053 | 1 mg | 560/575 |
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| 圖1. 用Cell Meter 熒光法細胞內總ROS活性測定試劑盒(貨號:22900)檢測HeLa細胞中的ROS。將HeLa細胞以15,000個細胞/ 90 uL /孔在Costar黑色/透明底部96孔板中過夜接種。將細胞未經處理(對照)或在37°C下用1 mM H2O2或100 uM叔丁基氫過氧化物(TBHP)處理30分鐘。加入ROS Brite 670工作溶液(100 uL /孔),并在5%CO2和37°C的培養箱中孵育1小時。使用FlexStation(Molecular Devices)以底部讀取模式在Ex / Em = 650/675 nm(cut off= 665 nm)處檢測熒光信號。 |
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| 圖2. 在Costar黑色/透明底部96孔板中,用Cell Meter 熒光法細胞內總ROS活性測定試劑盒染色的Hela細胞圖像。A:未經處理的對照細胞。 B:細胞在染色前用100 uM氫過氧化叔丁基(TBHP)處理30分鐘。 |
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| 圖3. ROS Brite 700對PBS緩沖液(pH 7.2)中不同活性氧的熒光響應。用Ex / Em = 670 / 700nm測量熒光強度。 |
各種探針可檢測的活性氧種類:
| 活性氧種類 | ROS Brite 570 | ROS Brite 670 | ROS Brite 700 | ROS Brite HDCF | Amplite ROS Green | Amplite ROS Red |
| H2O2 | + | + | + | +++ | +++ | +++ |
| .OH | ++ | ++ | ++ | + | + | + |
| TBHP(叔丁基過氧化氫) | + | + | + | + | + | + |
| HOCl(次氯酸) | - | + | ++ | - | + | - |
| O2-(超氧陰離子) | + | ++ | ++ | - | - | - |
| NO | - | - | - | - | - | - |
| ONOO-(過氧亞硝酸) | - | - | - | - | - | - |
| 貨號 | 22902 | 22903 | 16004 | 16053 | 22900 22904 | 22901 |
過氧化氫(H2O2)檢測:
| 貨號 | 規格 | Ex/Em(nm) | 適用儀器 | 適用樣本 | |
| Amplite 熒光法過氧化氫檢測試劑盒 | 11502 | 500 Tests | 648/668 | 熒光酶標儀 | 細胞裂解液 |
| 11501 | 500 Tests | 571/584 | 熒光酶標儀 | 細胞裂解液 | |
| Cell Meter 細胞內熒光法過氧化氫檢測試劑盒 | 11503 | 200 Tests | 498/517 | 熒光酶標儀/熒光顯微鏡 | 細胞 |
| 11504 | 100 Tests | 405/450 | 熒光顯微鏡 | 細胞 | |
| 11505 | 100 Tests | 405/450 | 流式細胞儀 | 細胞 | |
| 11506 | 100 Tests | 498/517 | 流式細胞儀 | 細胞 | |
| 探針 | 15204 | 25 mg | 505/526 | 細胞 | |
| 15206 | 10 mg | 507/529 | 細胞 | ||
| 15203 | 25 mg | 498/517 | 細胞 |
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| 圖1. H2O2濃度由DA單獨產生,并具有來自C-syn α 15分鐘(淺灰色)、30分鐘(深灰色)和60分鐘(黑色)的C-終端序列中的各種肽。DA 本身(無肽)隨著時間的推移產生越來越多的 H2O2。DA 與 YEMPS 肽的共育增強 H2O2生產,而缺乏肽的 Y127-(EMPSEEGY)和 S129-(NEAYEMP)比 DA 單獨或使用 YEMPS 肽產生的 H2O2較少。此外,DA與海氨酸突變肽(YEAPS)的聯育在所有條件下產生最高量的H2O2。 |
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| 圖2. 使用Cell Meter 細胞內熒光過氧化氫檢測試劑盒(貨號:11503)在HeLa細胞中細胞內過氧化氫的熒光圖像。在37℃下用(左)或不用(右)100 uM過氧化氫處理HeLa細胞90分鐘。 |
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| 圖3. 使用Cell Meter 細胞內熒光過氧化氫檢測試劑盒(貨號:11506)檢測Jurkat細胞中的過氧化氫。將Jurkat細胞用OxiVision Green過氧化物探針染色30分鐘,并在37°C下用100 uM過氧化氫處理90分鐘。用OxiVision綠色過氧化物探針染色但未進行過氧化氫處理的細胞用作對照。 |
過氧化物酶類檢測:
| 名稱 | 貨號 | 規格 | Ex/Em(nm) | 儀器 | 適用樣本 |
| Amplite 熒光法過氧化氫酶檢測試劑盒 | 11306 | 200 Tests | 571/584 | 熒光酶標儀 | 細胞裂解液 |
| 11552 | 500 Tests | 571/584 | |||
| 11553 | 500 Tests | 648/668 | |||
| Amplite 熒光法MPO檢測試劑盒 | 11301 | 200 Tests | 571/584 | ||
| ReadiUse 哺乳動物細胞裂解液 | 20012 | 10 ml | / |
超氧陰離子(O2·-):
| 名稱 | 貨號 | 規格 | Ex/Em(nm) | 適用儀器 | 適用樣本 |
| 二氫乙錠 | 15200 | 25 mg | 500/582 | 流式細胞儀 | 細胞 |
超氧化物歧化酶(SOD):
| 產品名稱 | 貨號 | 規格 | 適用儀器 | 適用樣本 |
| Amplite 比色法超氧化物歧化酶(SOD)檢測試劑盒 | 11305 | 200 Tests | 酶標儀 | 細胞裂解液 |
線粒體內活性氧:
| 活性氧種類 | 產品名稱 | 貨號 | Ex/Em(nm) | 規格 | 適用儀器 | 適用樣本 |
| 羥基自由基(·OH) | Cell Meter 線粒體羥基自由基檢測試劑盒 | 16055 | 540/590 | 200 Tests | 熒光顯微鏡 | 細胞 |
| 超氧自由基(O2·-) | Cell Meter 線粒體過氧化物活性檢測試劑盒 | 16060 | 488/530 | 200 Tests | 酶標儀/流式細胞儀 | 細胞 |
| 22970 | 540/590 | 100 Tests | 流式細胞儀 | 細胞 | ||
| 22971 | 540/590 | 200 Tests | 酶標儀 | 細胞 |
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| 圖1.使用MitoROS OH580(Cat#16055)在HeLa細胞中檢測羥基自由基的熒光圖像。將HeLa細胞與MitoROS OH580工作溶液在37°C下孵育1小時,然后用HHBS洗滌一次。 Fenton反應:然后在37°C的1X HBSS緩沖液中,用10 uM CuCl2和100 uM H2O2處理細胞1小時。對照:HeLa細胞未經處理即可保存在1X HBSS緩沖液中。用HHBS洗滌3次后,使用帶有TRITC濾光片組(紅色)的熒光顯微鏡測量HeLa細胞。細胞核用Hoechst 33342(Cat#17530,藍色)染色。 |
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| 圖2.在Costar黑色/透明底部96孔板中,用Cell Meter 熒光法細胞內總ROS活性測定試劑盒染色的Hela細胞圖像。A:未經處理的對照細胞。 B:細胞在染色前用100 uM氫過氧化叔丁基(TBHP)處理30分鐘。 |
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| 圖3.使用Cell Meter 熒光細胞內超氧化物檢測試劑盒檢測Jurkat細胞中的細胞內超氧化物。 AMA處理(紅色):將細胞在37°C下用50 uM抗霉素A(AMA)處理30分鐘,然后與MitoROS 580孵育1小時。對照(藍色):在未經AMA處理的情況下,將細胞與MitoROS 580在37°C孵育1小時。使用流式細胞儀(BD FACSCalibur)在FL2通道上監測熒光信號。 |
次氯酸陰離子(ClO-):
| 產品名稱 | 貨號 | Ex/Em(nm) | 規格 | 適用儀器 | 適用樣本 |
| Amplite 比色法次氯酸檢測試劑盒 | 13845 | / | 200 Tests | 酶標儀 | 細胞裂解液 |
| Amplite 熒光法次氯酸檢測試劑盒 | 13846 | 555/576 | 200 Tests | 熒光酶標儀 | 細胞裂解液 |
谷胱甘肽GSH:
| 產品名稱 | 貨號 | Ex/Em(nm) | 規格 | 適用儀器 | 適用樣本 |
| Amplite 熒光法谷胱甘肽GSH/GSSG比率檢測試劑盒 | 10056 | 510/524 | 200 Tests | 熒光酶標儀 | 細胞裂解液 |
| Amplite 熒光法谷胱甘肽GSH/GSSG比率快速檢測試劑盒 | 10060 | 510/524 | 200 Tests | 熒光酶標儀 | 細胞裂解液 |
| Cell Meter 細胞內谷胱甘肽GSH檢測試劑盒 | 22809 | 415/499 | 100 Tests | 流式細胞儀 | 細胞 |
| 22810 | 510/525 | 100 Tests | 流式細胞儀 | 細胞 |
一氧化氮(NO)與過氧亞硝酸(ONOO-):
| 產品名稱 | 貨號 | Ex/Em(nm) | 規格 | 適用儀器 | 適用樣本 | |
| 一氧化氮(NO) | Cell Meter 細胞內一氧化氮(NO)活性檢測試劑盒 | 16350 | 552/575 | 200 Tests | 熒光酶標儀/熒光顯微鏡 | 細胞 |
| 16351 | 552/575 | 100 Tests | 流式細胞儀 | 細胞 | ||
| 16356 | 586/607 | 100 Tests | 流式細胞儀 | 細胞 | ||
| 16359 | 650/680 | 200 Tests | 熒光顯微鏡/酶標儀 | 細胞 | ||
| 16360 | 650/680 | 100 Tests | 流式細胞儀 | 細胞 | ||
| 一氧化氮NO熒光探針 DAX-J2 紅 | 16301 | 587/609 | 1 mg | 細胞 | ||
| 一氧化氮NO熒光探針 DAX-J2 橙 | 16300 | 552/575 | 1 mg | 細胞 | ||
| 一氧化氮NO熒光探針 DAX-J2 | 16302 | 778/792 | 1 mg | 細胞 | ||
| 一氧化氮NO熒光探針 DAX-J2 | 16310 | 404/468 | 1 mg | 細胞 | ||
| 亞硝酸鹽(ONOO-) | Amplite 熒光法過亞硝酸鹽定量檢測試劑盒 | 16316 | 502/535 | 100 Tests | 熒光酶標儀 | 細胞裂解液 |
| Cell Meter 熒光法細胞內過亞硝酸鹽檢測試劑盒 | 16315 | 502/535 | 100 Tests | 熒光酶標儀/熒光顯微鏡 | 細胞 | |
| Cell Meter 熒光法細胞內過亞硝酸鹽檢測試劑盒 | 16317 | 502/535 | 100 Tests | 流式細胞儀 | 細胞 |
脂質過氧化(MDA):
| 產品名稱 | 貨號 | Ex/Em(nm) | 規格 | 適用儀器 | 適用樣本 |
| Amplite 比色法丙二醛(MDA)定量試劑盒 | 10070 | 695 | 200 Tests | 酶標儀 | 細胞裂解液 |
| Amplite 熒光法法丙二醛(MDA)定量試劑盒 | 10071 | 365/435 | 200 Tests | 熒光酶標儀 | 細胞裂解液 |
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