AAT Bioquest-iFluor Ultra 594琥珀酰亞胺酯：精準的生物分子標記解決方案

熒光染料偶聯抗體為識別蛋白質提供了一種工具，廣泛應用于熒光細胞成像、流式細胞術、西方印跡、免疫組織化學等領域。使用熒光標記抗體的優勢包括更高的靈敏度、多重能力以及易用性。iFluor? Ultra系列是AAT Bioquest受歡迎的iFluor?染料的最新升級，針對用于熒光成像和流式細胞術應用的抗體標記進行了優化。與Alexa Fluor? 594等其他類似染料相比，使用iFluor? Ultra 594制備的抗體偶聯物在性能上遠遠優于前者。在相同條件下，iFluor? Ultra 594偶聯物的亮度明顯高于Alexa Fluor? 594偶聯物。此外，iFluor? Ultra 594的熒光不受pH（4-10）的影響。iFluor? Ultra 594 SE染料穩定性合理，對蛋白質氨基基團顯示出良好的反應性和選擇性。iFluor? Ultra 594的光譜特性和反應性與Alexa Fluor? 594相似（Alexa Fluor 是ThermoFisher的商標）。

圖：HeLa細胞與小鼠抗微管蛋白一起孵育，然后與AAT的iFluorTM Ultra 594山羊抗小鼠IgG偶聯物或Alexa Fluor?594山羊抗鼠IgG一起孵育。

艾美捷AAT Bioquest-iFluor Ultra 594琥珀酰亞胺酯：

單位大?。? 毫克

分子量：1436.72

溶劑：DMSO

吸收峰（納米）：585

校正因子（260 納米）：0.07

校正因子（280 納米）：0.05

消光系數（厘米 -1 M -1）：1800001

激發（納米）：586

發射（納米）：600

量子產率：0.52

H-短語：H303, H313, H333

危害符號：XN

預期用途：僅限研究使用（RUO）

R-短語：R20, R21, R22

儲存：冷凍（< -15°C）；盡量減少光照

UNSPSC：12171501

庫存溶液的準備：除非另有說明，所有未使用的庫存溶液應在制備后分成單次使用的小份，并儲存在-20°C。避免反復凍融。

儲備溶液的制備：

1. 蛋白質庫存溶液（溶液A）

將100微升的反應緩沖液（例如，1M 碳酸鈉溶液或pH約9.0的1M磷酸緩沖液）與900微升的目標蛋白質溶液（例如抗體，蛋白質濃度盡可能>2 mg/mL）混合，得到1毫升蛋白質標記庫存溶液。

注意     蛋白質溶液（溶液A）的pH值應為8.5 ± 0.5。如果蛋白質溶液的pH值低于8.0，使用1M 碳酸鈉溶液或pH 9.0的1M磷酸緩沖液調整pH值至8.0-9.0的范圍。

注意     蛋白質應溶解在1X磷酸鹽緩沖鹽水（PBS）中，pH 7.2-7.4。如果蛋白質溶解在Tris或甘氨酸緩沖液中，必須對其進行透析，以1X PBS，pH 7.2-7.4，去除廣泛用于蛋白質沉淀的游離胺或銨鹽（如硫酸銨和醋酸銨）。

注意     不純的抗體或用牛血清白蛋白（BSA）或明膠穩定的抗體將不會被很好地標記。硫柳汞或汞硫柳汞的存在也可能干擾偶聯反應。硫柳汞或汞硫柳汞可以通過透析或旋轉柱去除，以獲得最佳的標記結果。

注意     如果蛋白質濃度低于2 mg/mL，偶聯效率將顯著降低。為了獲得最佳的標記效率，建議最終蛋白質濃度范圍為2-10 mg/mL。

2. iFluor? Ultra 594 SE庫存溶液（溶液B）

將無水DMSO加入iFluor? Ultra 594 SE的瓶中，制成10 mM庫存溶液。通過移液或渦旋混合均勻。

注意     在開始偶聯之前準備染料庫存溶液（溶液B）。請立即使用。染料庫存溶液的長期儲存可能會降低染料活性。溶液B可以在避光和防潮的情況下冷凍保存兩周。避免凍融循環。

AAT Bioquest-iFluor Ultra 594琥珀酰亞胺酯文獻參考：

MicroRNA-126 inhibits pathological retinal neovascularization via suppressing vascular endothelial growth factor expression in a rat model of retinopathy of prematurity.

Authors: Fan, Yuan-Yao and Liu, Chi-Hsien and Wu, An-Lun and Chen, Hung-Chi and Hsueh, Yi-Jen and Chen, Kuan-Jen and Lai, Chi-Chun and Huang, Chung-Ying and Wu, Wei-Chi

Journal: European journal of pharmacology (2021): 174035

Retinal ganglion cells projecting to superior colliculus and pulvinar in marmoset.

Authors: Grünert, Ulrike and Lee, Sammy C S and Kwan, William C and Mundinano, Inaki-Carril and Bourne, James A and Martin, Paul R

Journal: Brain structure & function (2021)

A fully integrated isotachophoresis with a programmable microfluidic platform.

Authors: Shebindu, Adam and Somaweera, Himali and Estlack, Zachary and Kim, Jungtae and Kim, Jungkyu

Journal: Talanta (2021): 122039

Liquid Droplet Formation and Facile Cytosolic Translocation of IgG in the Presence of Attenuated Cationic Amphiphilic Lytic Peptides.

Authors: Iwata, Takahiro and Hirose, Hisaaki and Sakamoto, Kentarou and Hirai, Yusuke and Arafiles, Jan Vincent V and Akishiba, Misao and Imanishi, Miki and Futaki, Shiroh

Journal: Angewandte Chemie (International ed. in English) (2021)

Effect of VIRP1 Protein on Nuclear Import of Citrus Exocortis Viroid (CEVd).

Authors: Seo, Hyesu and Kim, Kyunghee and Park, Woong June

Journal: Biomolecules (2021)

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