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天狼星紅比色法體外定量檢測可溶性膠原

發布者:艾美捷科技    發布時間:2021-11-25     
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膠原蛋白(Collagen)是動物結締組織的主要組成成分,主要存在于動物皮、骨、肌腱等組織中,發揮支架作用和保護作用。膠原蛋白在心臟中起著重要的結構作用。心臟細胞外基質主要由纖維狀膠原組成,可保持心肌完整性,允許心臟力傳遞,并有助于心肌細胞定向。任何對膠原合成、合成后組裝、翻譯后修飾和降解的精細平衡調節的中斷都可能對心肌功能產生重大影響。此外,膠原蛋白具有多種臨床用途。膠原蛋白已廣泛用于整容手術,以幫助燒傷患者的愈合過程。膠原蛋白還被用于在牙科、整形外科和其他外科手術中重建骨骼。膠原蛋白被用于骨移植,因為它的三螺旋結構使其成為一個非常強大的分子。同時,膠原也最適合用于骨骼,因為它不會損害骨骼的結構完整性。最后,人類和牛膠原蛋白都被用作皮膚填充劑來治療皺紋和皮膚老化。


膠原蛋白

 

膠原蛋白中甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、脯氨酸(Pro)和谷氨酸(Glu)含量較高,特別是甘氨酸的含量幾乎占了1/3,脯氨酸和羥脯氨酸的含量是各種蛋白中含量最高的,其中羥脯氨酸在其他蛋白質中鮮少存在,羥脯氨酸殘基可通過形成分子內氫鍵穩定膠原蛋白分子。三條α-肽鏈借范德化力、氫鍵及共價交聯則以平行、右手螺旋形式纏繞成“草繩狀”三股螺旋結構,使膠原具有很高的拉伸強度膠原蛋白一級結構的特征是含有甘氨酸的三聯體(Gly-X-Y)重復排列,其中X、Y多為脯氨酸和羥脯氨酸,通常由3條多肽鏈構成三股螺旋結構。

 

作為專業的生命科學醫藥原料供應商,Cell Biolabs中國區金牌代理,艾美捷科技為您推薦:可溶性膠原蛋白定量檢測試劑盒,cat#MET-5016,為檢測細胞或組織樣本中的可溶性膠原蛋白提供了一種方便的比色方法——天狼星紅比色測定法,利用天狼星紅與膠原蛋白特異性結合的原理,經NaOH洗脫離心后貨得紅色復合物,在特定波長540-560nm條件下通過測定吸光度確定膠原含量。

貨號MET-5016
名稱Soluble Collagen Assay Kit(可溶性膠原蛋白定量檢測試劑盒)
樣本細胞或者組織樣本,不推薦用于血清、血漿或尿液樣本
試劑盒組分1. Collagen Standard(膠原蛋白標準品)
2. Sirius Red Reagent(天狼猩紅染料)
3. Extraction Solution(提取液)
4. 10XPBS
原理可溶性膠原蛋白檢測試劑盒為檢測細胞或組織樣本中的可溶性膠原蛋白提供了一種方便的比色方法。 首先,將未知樣品或膠原蛋白標準品添加到 96 孔板中并干燥過夜。 然后,加入天狼星紅試劑對膠原蛋白的 [Gly-x-y] 三螺旋結構進行染色。 最后,染色的膠原蛋白用酸性試劑洗滌,用堿性試劑從平板上洗脫,轉移到新的 96 孔板中,用平板分光光度計測量。 通過與預定的膠原標準曲線進行比較來確定未知樣品中的膠原含量。
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實驗結果

可溶性膠原標準曲線

 可溶性膠原標準曲線

檢測雞肝中的可溶性膠原蛋白

檢測雞肝中的可溶性膠原蛋白:根據樣品制備部分,將雞肝在含有0.1 mg/mL胃蛋白酶的2.5%乙酸中勻漿,中和pH,加入PBS。

 

發表文獻:

1.Alqahtani, M.S. et al. (2020). Wound-healing potential of curcumin loaded lignin nanoparticles. J Drug Deliv Sci Technol. doi: 10.1016/j.jddst.2020.102020.

2.Sears, V. et al. (2020). Harnessing mesenchymal stem cell secretome: effect of extracellular matrices on pro-angiogenic signaling. Biotechnol Bioeng. doi: 10.1002/bit.27272.

3.MacKnight, H.P. et al. (2019). The interaction of ceramide 1-phosphate with group IVA cytosolic phospholipase A2 coordinates acute wound healing and repair. Sci Signal. 12(610). pii: eaav5918. doi: 10.1126/scisignal.aav5918.

4.Imai, J. et al. (2019). Flagellin-mediated activation of IL-33-ST2 signaling by a pathobiont promotes intestinal fibrosis. Mucosal Immunol. 12(3):632-643. doi: 10.1038/s41385-019-0138-4.

 

作為一家具有高端的技術實力、先進的經營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業,總部位于武漢光谷高新技術開發區,服務面向全國。艾美捷科技是集進口試劑、實驗室耗材銷售、技術服務與合約開發為一體的專業化高科技公司,為用戶提供專業的前沿資訊、完備的產品、整合的解決方案,及優質的物流服務。

 

艾美捷科技與國內外優秀的生物試劑供應商優保持著密切的合作關系,目前已成為眾多國際知名品牌的中國總代理或一級代理,主要包括:AmyJet、AATBioquest、Abbexa、Abnova、Agrisera、Anogen、Atlas Antibodies、Biosensis、Biovision、BioVendor、CaissonLabs、Cell Biolabs、Columbia Biosciences、Crystal Chem、Cytoskeleton、Demeditec、Duchefa、Echelon Biosciences、Epigentek、Equitech-Bio、EXBio、Fitzgerald、GeneCopoeia、HycultBiotech、Icosagen、ImmunoReagents、ImmunoStep、Jackson、LC Laboratories、LifeSensors、LigaTrap、Lumiprobe、Mabtech、Matreya、MyBiosource、NorgenBiotek、Origene、ProImmune、ProSpec、ScyTek、SolisBioDyne、SouthernBiotech、StressMarq、SySy、USBiological、TRC等,可以在短時間內為用戶提供專業的前沿資訊、完備的產品及物流服務。

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