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特色產品一、產品概述
Asprosin 是一種由纖維蛋白原基因(FBN1)編碼的蛋白質,在代謝調節和能量平衡中具有重要作用。本試劑盒通過夾心法檢測 Asprosin,為相關研究提供了可靠的工具。
Abbexa小鼠Asprosin ELISA試劑盒是一種用于體外定量檢測小鼠血清、血漿、組織勻漿、細胞裂解液、細胞培養上清液及其他生物液體中小鼠 Asprosin 濃度的試劑盒。該試劑盒基于酶聯免疫吸附測定(ELISA)技術,具有高特異性和靈敏度,適用于小鼠樣本的檢測。艾美捷作為Abbexa中國區代理商,為大家整理了一份小鼠Asprosin ELISA試劑盒中文說明書。
Abbexa小鼠Asprosin ELISA試劑盒(abx585287)基本信息
目標蛋白:Asprosin
反應性:小鼠
檢測方法:比色法
檢測范圍:78 pg/ml - 5000 pg/ml
靈敏度:< 32 pg/ml
標準品形式:凍干
樣本類型:血清、血漿、組織勻漿、細胞裂解液、細胞培養上清液及其他生物液體
檢測類型:定量
檢測方法:夾心法(Sandwich)
二、試劑盒組成
本試劑盒包含以下主要組分:
預包被的 96 孔微孔板:預先包被有特異性抗體,用于捕獲樣本中的 Asprosin。
標準品:用于建立標準曲線,以定量分析樣本中的 Asprosin 含量。
標準品稀釋緩沖液:用于稀釋標準品溶液,以獲得不同濃度的標準系列。
洗滌緩沖液:用于在各步驟中清洗微孔板,去除未結合的成分,減少背景干擾。
檢測試劑 A 和 B:用于夾心法檢測,結合樣本中的 Asprosin。
稀釋液 A 和 B:分別用于稀釋檢測試劑 A 和 B,確保其在合適的工作濃度下發揮作用。
TMB 底物:用于顯色反應,其顏色變化與 Asprosin 的含量呈正比關系。
終止液:用于終止反應,使顏色變化固定,便于在特定波長下測量吸光度。
封板膜:用于在反應過程中封閉微孔板,防止蒸發和交叉污染。
三、存儲與有效期
運輸條件:試劑盒在運輸過程中應保持在 4℃。
存儲條件:收到后,請按照試劑盒說明書中的存儲說明進行存儲。建議存儲于 4℃。
有效期:本試劑盒的有效期至少為 6 個月。如需更長時間的有效期(最長可達 12 個月),請提前聯系Abbexa。
穩定性:試劑盒的穩定性由活性損失率決定。在適當的存儲條件下,有效期內的損失率小于 5%。為減少性能波動,應嚴格控制操作流程和實驗室條件。強烈建議整個實驗過程由同一位用戶完成。
四、實驗原理
本試劑盒采用夾心 ELISA 技術。預先在 96 孔板上包被有特異性抗體。將標準品、測試樣本加入到孔中并孵育,樣本中的 Asprosin 與包被抗體結合。隨后加入檢測試劑 A 和 B,形成夾心復合物。加入 TMB 底物后,只有含有 Asprosin 的孔才會產生藍色產物,加入酸性終止液后會變為黃色。黃色的強度與結合在板上的 Asprosin 量成正比。在微孔板讀數儀上以 450nm 波長光譜光度法測量 OD 值,從而可以計算出 Asprosin 的濃度。

五、實驗步驟
1.設置標準、測試樣本和對照孔:在預包被的微孔板上分別設置標準孔、測試樣本孔和對照(零)孔,并記錄它們的位置。建議每個標準和樣本至少進行雙份測量。
2.加樣:向標準孔中加入 100uL 稀釋后的標準品,向對照(零)孔中加入 100uL 標準品稀釋緩沖液,向樣本孔中加入 100uL 稀釋后的樣本。在 37℃下孵育 1 小時。
3.加入檢測試劑 A:向每個孔中加入 100uL 檢測試劑 A 工作溶液。用封板膜封住微孔板,在 37℃下孵育 1 小時。
4.洗滌:移除封板膜,棄去溶液。用 1X 洗滌緩沖液洗滌微孔板 3 次。
5.加入檢測試劑 B:向每個孔中加入 100uL 檢測試劑 B 工作溶液,封板后在 37℃下孵育 30 分鐘。
6.再次洗滌:棄去溶液,用洗滌緩沖液按前一步驟所述方法洗滌微孔板 5 次。
7.加入 TMB 底物:向每個孔中加入 90uL TMB 底物。用封板膜封住微孔板,在 37℃下孵育 10 - 20 分鐘。避免光照。孵育時間僅供參考,最佳時間應由最終用戶確定。不要超過 30 分鐘。
8.加入終止液:向每個孔中加入 50uL 終止液。立即在 450nm 波長下讀取吸光度。
六、結果計算
本實驗為夾心 ELISA,樣本中 Asprosin 的濃度與其測量的吸光度呈正比關系。計算每個標準和樣本的平均 OD450 值,并減去對照(零)孔的平均 OD450 值。繪制標準曲線,以標準濃度(X 軸)和相對 OD450 值(Y 軸)為坐標??梢詮臉藴是€上插值計算出樣本中 Asprosin 的濃度。
七、實驗精密度
1.批內精密度(同一批次內的精密度):對低、中、高三個水平的 Asprosin 樣本進行 20 次測試,均在同一塊微孔板上進行。變異系數(CV%)=(標準差/平均值)× 100。批內精密度:CV < 10%。
2.批間精密度(不同批次之間的精密度):對低、中、高三個水平的 Asprosin 樣本在 3 塊不同的微孔板上進行測試,每塊微孔板上各有 8 個重復樣本。批間精密度:CV < 12%。
八、注意事項
1.僅限研究使用:本產品僅供研究使用,不得用于診斷或治療用途。
2.范圍和靈敏度可能發生變化:范圍和靈敏度可能會發生變化。
3.樣本濃度要求:為獲得準確結果,樣本濃度必須稀釋至試劑盒的中等范圍內。
4.樣本類型優化:請注意,Abbexa的試劑盒針對天然樣本的檢測進行了優化,而不是重組蛋白。Abbexa無法保證檢測重組蛋白,因為它們可能具有與天然蛋白不同的序列或三級結構。
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