Abbexa丨艾美捷代理DB3.1 化學感受態細胞，高效轉化能力

一、產品概述

DB3.1 化學感受態細胞的基因型為：F-gyrA462 endA1△(sr1 - recA) mcrB mrr hsdS20(rB-, mB-) supE44 ara - 14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20(Sm R) xyl - 5 λleu mtl1。

Abbexa DB3.1 化學感受態細胞是專為DNA的化學轉化而設計的。這種細胞含有 gyrA462 基因，能夠抵抗 ccdB 基因產生的毒性效應，并且對鏈霉素具有抗性。該產品可用于轉化和擴增含有 ccdB 基因的質粒，轉化效率超過108cfu/ug DNA（經 pUC19 質粒 DNA 測試）。

產品規格為 1ml，包含 10×100ul 感受態細胞、20ul（0.1ng/ul）對照質粒 pUC19 和 10ml SOC 培養基。艾美捷作為Abbexa中國區代理商，為大家整理了一份DB3.1 化學感受態細胞中文說明書。

二、存儲與使用說明

（一）存儲條件

DB3.1 化學感受態細胞應存儲于 - 70℃，最長可保存 6 個月。請勿在液氮中保存，避免反復凍融。

（二）使用說明

1. 準備材料：將水浴鍋預熱至 42℃。將 SOC 培養基或 LB 培養基置于室溫下回溫。將含抗生素的選擇性平板在 37℃下預熱 30 分鐘。

2. 感受態細胞解凍：將 100ul DB3.1 化學感受態細胞置于冰上解凍。將 50ul 細胞分裝至預冷的 1.5ml 離心管中，然后加入目標 DNA（1 - 5ul）。切勿通過反復上下移液來混合，將細胞置于冰上靜置 30 分鐘。

3. 熱激處理：將細胞在 42℃下熱激 45 秒，期間不要搖晃。熱激完成后，立即將試管轉移至冰上，靜置 2 分鐘，同樣不要搖晃。

4. 細胞復蘇：向試管中加入 500ul 預熱的 SOC 培養基或 LB 培養基（不含抗生素），充分混勻后在 37℃、200rpm 的條件下振蕩培養 1 小時，以促進細胞復蘇和抗生素抗性基因的表達。

5. 涂布平板：從每個轉化管中取 20 - 200ul 涂布于預熱的選擇性平板上。未涂布的細胞可在 4℃下保存，如有需要，第二天可繼續涂布。

6. 平板培養：將平板倒置，置于 37℃下過夜培養。

7. 篩選與分析：挑選單菌落，通過限制性酶切、PCR 或測序等方法進行分析。

三、Abbexa-DB3.1 化學感受態細胞（abx098865）特點：

1. 高效的轉化能力：DB3.1 化學感受態細胞的轉化效率超過 108cfu/ug DNA，能夠有效轉化目標 DNA，為實驗提供高效率的轉化保障。

2. 抗性基因優勢：該細胞含有 gyrA462 基因，使其能夠抵抗 ccdB 基因產生的毒性，同時對鏈霉素具有抗性，這使得它在處理含有 ccdB 基因的質粒時具有獨特的優勢，避免了因毒性導致的轉化失敗，也方便在含有鏈霉素的培養基中篩選轉化子。

3. 廣泛的應用范圍：適用于多種質粒的轉化和擴增，為分子克隆、基因表達等實驗提供了可靠的工具，尤其在涉及 ccdB 基因的實驗中表現出色，為相關研究提供了便利。

四、注意事項

1. 僅限研究使用：本產品僅供研究使用，不得用于診斷、治療、美容程序或人類及動物食用。

2. 運輸與保存：產品在運輸過程中會使用干冰。收到后請按照上述存儲條件進行保存。

3. 操作建議：為了獲得更高的轉化效率，建議在感受態細胞解凍后立即進行轉化操作，避免反復凍融。在整個實驗過程中，所有樣本和試劑都需要輕柔操作，以防止細胞受損或 DNA 降解。

4. 實驗環境：確保實驗環境的清潔和無菌，以避免雜菌污染，影響實驗結果的準確性和可靠性。

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