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Cytoskeleton 原肌球蛋白/原肌球調節蛋白復合物,牛心臟方案

發布者:艾美捷科技    發布時間:2023-02-02     
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原肌球蛋白/肌鈣蛋白(TT)復合物已從牛心肌中純化(1)。TT復合物由五種蛋白質原肌球蛋白α:原肌球蛋白β:肌鈣蛋白C:肌鈣蛋白I:肌鈣蛋白T以1:1:1:1:1的化學計量比組成,見圖1。該復合物已被確定在F-肌動蛋白/鈣激活肌球蛋白ATP酶測定中具有生物活性(參見生物活性測定)。該復合物以白色凍干粉末形式提供。   


作為Cytoskeleton全國總代理,艾美捷科技強烈推薦Cytoskeleton熱銷產品原肌球蛋白/原肌球調節蛋白復合物,牛心臟。產品僅用于科研,不可用于臨床診斷。   


Cytoskeleton公司目前主要的產品有340余種,其產品主要覆蓋肌動蛋白,微管蛋白,馬達蛋白,小G蛋白,細胞外基質,活細胞成像等相關領域,提供對應的蛋白質,抗體,檢測與分析試劑盒,并且產品線還在不斷的擴大中。

產品名稱貨號詳情
原肌球蛋白/原肌球調節蛋白復合物,牛心臟CS-TT05查看

SiR-Tubulin.png

SiR-Tubulin1.png

圖1:肌肉細絲示意圖圖2:托莫肌苷/肌鈣蛋白TCI復合物蛋白質純度測定


原肌球蛋白/原肌球調節蛋白復合物,牛心臟用途:

鈣激活肌球蛋白ATP酶活性與細絲結合時的測量。 

鑒定/表征影響 TT 復合物調節和肌球蛋白 ATP 酶活性的蛋白質或小分子 

鑒定/表征影響肌球蛋白/F-肌動蛋白相互作用的蛋白質或小分子

 

存儲和重構

短暫離心以收集管底部的產品。蛋白質應通過加入冰冷的Milli-Q水重組至3mg / ml。蛋白質將位于以下緩沖液中:20 mM PIPES pH 7.0,25 mM KCl,5%(w / v)蔗糖和1%(w / v)葡聚糖。為了保持蛋白質的高生物活性,建議將蛋白質溶液等分成“實驗大小”的量,在液氮中快速冷凍并儲存在-70°C。 如果儲存在-6°C,該蛋白質可穩定保存70個月。 蛋白質不應暴露于重復的凍融循環中。凍干蛋白在4°C干燥(<10%濕度)下穩定1年。


純度

蛋白質純度通過在4-20%梯度聚丙烯酰胺凝膠上掃描考馬斯藍染色蛋白質的密度測定來確定。TT復合物的純度為85%(見圖2a)。使用針對每種成分的抗體來驗證每種成分是否存在(見圖2b)  


原肌球蛋白/原肌球調節蛋白復合物,牛心臟生物活性測定:

通過微管蛋白聚合測定法進行評估。為了通過質量控制,G-PEM中5 mg / ml羅丹明標記的微管蛋白溶液加5%甘油必須聚合至>85%。這與相同條件下的未標記微管蛋白相當。   


文獻引用: 

1. J.M Murray. 1982. Hybridization and reconstitution of the thin filament. Methods in Enzymology, 85, p.15-17. 

2. M.J. Holroyde et al. 1980. The calcium and magnesium binding sites on cardiac troponin their role in the regulation of myofibrillar adenosine triphosphatase.    


Cytoskeleton專注于生物化學和細胞過程研究中的純化蛋白和便捷試劑盒開發與生產。公司提供藥物篩選、信號轉導、蛋白質轉錄后修飾(PTM)、細胞骨架研究相關的系列試劑盒和產品,尤其以細胞骨架相關研究見長,既能滿足于樣品較少的科學研究,也可以用于小規模篩選研究和高通量大規模篩選研究。此外,公司還提供微管蛋白,肌動蛋白,小G蛋白,GAPs,GEFs等現有產品的藥物篩選服務。  


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