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特色產品總蛋白濃度可以通過多種方法測定。
然而,蛋白質染料結合法具有簡單、可靠、快速、易于自動化等優點,并且在評估腎功能和血腦屏障功能方面越來越受歡迎。BioAssay Systems的總蛋白測定試劑盒基于改進的焦棓酚紅-鉬酸鹽蛋白質染料結合法。在600納米處的顏色強度與樣品中總蛋白濃度成正比。這種單一試劑可用于定量測定尿液(蛋白尿)和腦脊液(血腦屏障)中的總蛋白。
作為BioAssay Systems在中國的區域總代理,艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產品總蛋白測定試劑盒。產品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
| 產品名稱 | 貨號 | 詳情 |
總蛋白測定試劑盒 | BAS-QTPR-100 | 查看 |
主要特點
- 快速靈敏。測定僅需10分鐘。線性檢測范圍為5-200毫克/分升蛋白。對于尿液樣品,檢測范圍為1-20毫克/分升蛋白。
- 穩健可靠。尿液中的物質干擾極?。?lt;2%)。
- 方便高效。均質“混合-孵育-測量”類型測定法??稍诟咄亢Y選液體處理系統上輕松自動化,每天可處理數千個樣品。
應用
用于生物樣品(例如尿液、腦脊液)中總蛋白的測定。
96孔板讀取器測定程序
在測定前,將所有試劑恢復至室溫。
1. 標準品和樣品。分別將5微升去離子水、5微升提供的蛋白標準品和5微升樣品加入到透明平底96孔板的不同孔中。
2. 測定。向所有測定孔中加入200微升試劑。輕拍孔板以混合均勻。孵育10分鐘。在孔板讀取器上測量600納米處的吸光度。
尿液樣品
尿液樣品通常蛋白質濃度很低,需要較大的樣品體積和內標。應使用以下程序:
1. 在離心管中,將100毫克/分升的標準品用去離子水稀釋至40毫克/分升(40微升100毫克/分升標準品+60微升去離子水)。
2. 樣品需雙份運行。如果存在顆粒物,需離心樣品并使用清亮的上清液進行測定。將每個樣品的20微升分別轉移到四個不同的孔中:兩個樣品孔和兩個內標孔。向樣品孔中加入5微升去離子水,向內標孔中加入5微升40毫克/分升的標準品。將25微升去離子水轉移到兩個孔中。這將作為雙份的空白對照。
注意:每個樣品不需要單獨的空白對照,同一塊孔板上的所有樣品可以使用相同的空白值。
3. 向每個蛋白測定孔中加入200微升試劑。
4. 在室溫下孵育10分鐘,然后在600納米處讀取吸光度。
注意:如果某個樣品的OD標準品 - OD樣品值低于0.05,則用等體積的水稀釋樣品并重復測定。將結果乘以稀釋因子2。低內標信號是由于尿液中的其他分子干擾所致,稀釋可以減少干擾,從而正確測量蛋白水平。
比色皿測定程序
1. 標準品和樣品。分別將20微升去離子水、20微升提供的蛋白標準品和20微升樣品加入到不同的比色皿中。
2. 測定。向每個比色皿中加入1毫升試劑。混合并孵育10分鐘。在分光光度計上測量600納米處的吸光度。
3. 在室溫下孵育10分鐘,然后在600納米處讀取吸光度。
需要但未提供的材料
對于96孔板測定:移液裝置、透明平底96孔板和孔板讀取器。對于比色皿測定:移液裝置、比色皿和能夠讀取600納米吸光度的分光光度計。
示例:

左:在96孔板讀數器(Spectramax M2)上進行的標準曲線;
右:使用比色皿程序的標準曲線。
文獻參考:
1. Joern WA, Schmoele L (1981). Urinary protein measurement by the Coomassie blue dye-binding method adapted to the ABA-l00 bichromatic analyzer. Clin Chem27:1305.
2. Sano K, et al (1981). Automatic assay of urinary protein using CoomassieBrilliant Blue G-250. Anal Biochem 113:197-201.
3. Watanabe N, et al (1984). Automatic method for determination of protein in urine with a Hitachi 726 analyzer: a modification of Bradford’s method.Anal Chem Specimen 7:27-31
BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區的高新技術生物技術公司,專注于研發、生產和銷售高品質的生化檢測試劑盒,產品種類齊全,主要用于科學研究和生物醫藥開發,以滿足生命科學行業日益增長的需求。BioAssay Systems在現代藥物發現領域擁有超過50年的豐富經驗,已經開發了超過250種用于藥物發現和生命科學研究的檢測試劑盒。產品主要包括:1.血液尿液化學;2.酶活性測定;3.能量代謝;4.氧化應激;5.高通量HTS試劑;6.陰陽離子檢測。
作為BioAssay Systems在中國區域的代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產品。

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