BioAssay Systems DNA測定試劑盒- 簡單、高通量且干擾低

DNA定量是分子生物學中常見的操作。很多時候，DNA的量非常少，而傳統的260 nm紫外吸收法需要微克級別的量才能獲得可靠的結果。在測序、克隆、轉染和DNA標記等實驗中，準確測定低濃度DNA的濃度對于獲得可重復的結果至關重要。

用于測定DNA濃度的簡單、直接且易于自動化的操作流程是非常理想的。BioAssay Systems的QuantiFluo? DNA檢測試劑盒旨在準確測量質粒DNA、cDNA、聚合酶鏈式反應后的DNA以及從凝膠中洗脫的DNA的納克級別含量。該改進方法利用了能夠特異性結合雙鏈DNA的Hoechst染料。在450 nm（激發波長為350 nm）處測量的熒光強度與樣本中的DNA濃度成正比。優化的配方顯著減少了原始樣本中物質的干擾。

作為BioAssay Systems在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產品DNA測定試劑盒。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點

- 靈敏且準確。在96孔板檢測中，小牛胸腺DNA的線性檢測范圍為2 ng至40 ng（100 - 2,000 ng/mL）。

- 簡單且高通量?！盎旌?讀取”操作流程僅需加入一種工作試劑并讀取熒光強度?？梢暂p松自動化為高通量檢測，每天可處理數千個樣本。

- 干擾低。RNA、鹽（高達3M NaCl）、洗滌劑（< 0.01% SDS）以及常見的DNA提取緩沖液不會對檢測產生干擾。

應用領域

- 直接檢測：質粒DNA、基因組DNA、cDNA、聚合酶鏈式反應后的DNA以及從凝膠和其他基質中提取的DNA。

試劑盒組成（96孔板，250次檢測）

- 試劑：50 mL

- 標準品：1 mL（10 ug/mL小牛胸腺DNA）

儲存條件

- 試劑盒在室溫下運輸。收到后，將DNA標準品儲存于-20°C，試劑儲存于2-8°C。有效期：收到后12個月。

- 注意事項：試劑僅供研究使用。使用試劑時應遵循實驗室試劑的常規注意事項。請參考材料安全數據表以獲取詳細信息。

操作步驟

- 準備：使用前將試劑恢復至室溫。

- 使用96孔板的操作步驟：

1. 將80 uL標準品與320 uL TE緩沖液（10 mM Tris，1 mM EDTA，pH 7.4）混合，制備400 uL 2000 ng/mL的預混液。按照以下方法稀釋標準品。將20 uL稀釋后的標準品和樣本加入黑色平底96孔板的孔中。將標準品儲存于4°C以供后續使用。

2. 加入200 uL工作試劑，并輕輕敲擊以混合。

3. 在室溫下孵育1分鐘，并在440 - 460 nm（峰值450 nm，激發波長為340 - 370 nm）處讀取熒光發射強度。

- 使用比色皿的操作步驟：

1. 將100 uL稀釋后的標準品和樣本轉移到比色皿中。

2. 加入1000 uL工作試劑，并輕輕敲擊以混合。

3. 在室溫下孵育1分鐘，并在440 - 460 nm（峰值450 nm，激發波長為340 - 360 nm）處讀取熒光強度。

一般注意事項

1. 對于未知DNA濃度的樣本，取1 uL樣本與99 uL TE緩沖液混合。進一步進行10倍系列稀釋。對所有稀釋后的樣本進行檢測，并選擇熒光強度值落在線性校準范圍內的稀釋度來計算樣本DNA濃度。

2. 小牛胸腺DNA作為植物和動物DNA的標準品，因為這兩種生物的DNA中AT含量是保守的。對于細菌DNA，應使用與樣本DNA含量最匹配的不同標準品。

3. 該染料與相同單鏈DNA結合時，熒光強度減半。短的單鏈DNA片段不會與該染料產生熒光。

示例：

96孔板測定中的標準曲線

文獻參考：

1. Labuzek K, et al (2010). Metformin has adenosinemonophosphate activated protein kinase (AMPK)-independent effects on LPS-stimulated rat primary microglial cultures. Pharmacol Rep. 62(5):827-48.

2. Mayer-Wagner S et al. (2010). Membrane-based cultures generate scaffold-free neocartilage in vitro: influence of growth factors. Tissue Eng Part A. 16(2):513-21.

3. Bhavnani B.R. et al. (2008). Structure activity relationships and differential interactions and functional activity of various equine estrogens mediated via estrogen receptors (ERs) ERalpha and ERbeta. Endocrinology. 149(10):4857-70. 

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區的高新技術生物技術公司，專注于研發、生產和銷售高品質的生化檢測試劑盒，產品種類齊全，主要用于科學研究和生物醫藥開發，以滿足生命科學行業日益增長的需求。BioAssay Systems在現代藥物發現領域擁有超過50年的豐富經驗，已經開發了超過250種用于藥物發現和生命科學研究的檢測試劑盒。產品主要包括：1.血液尿液化學；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

作為BioAssay Systems在中國區域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產品。